本文選題：鐵超載　切入點：丹參　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:鐵對新陳代謝和生物活動具有很重要的意義。然而，過多的鐵會沉積在肝臟、心臟、腎臟等組織中，造成組織器官氧化損傷。目前治療鐵超載的方法主要是使用螯合劑，但是存在著一些缺點，比如，肝功能障礙，過敏反應(yīng)，粒細胞缺乏癥，患者依從性較差等。因此，研究開發(fā)治療鐵超載疾病的新藥品是十分有意義的。丹參具有抗脂質(zhì)過氧化作用和清除羥基自由基的能力。因此，我們推測，丹參可能對鐵超載致腎臟損傷具有保護作用。本研究的目的是探討丹參注射液對鐵超載致腎毒性的保護作用及可能的作用機制。 方法:將75只小鼠隨機分為5組，分別為空白對照組、鐵超載模型組、去鐵胺陽性藥物對照組、丹參注射液低劑量治療組和丹參注射液高劑量治療組，每組15只。其中，丹參注射液低劑量組和丹參注射液高劑量組小鼠分別腹腔注射丹參注射液3g/kg/d和6g/kg/d，去鐵胺陽性藥物對照組小鼠腹腔注射去鐵胺100mg/kg/d，空白對照組和鐵超載模型對照組分別注射等量的生理鹽水。然后，在腹腔注射給藥4小時后，鐵超載模型組、去鐵胺陽性藥物對照組、丹參注射液低劑量組和丹參注射液高劑量組小鼠均腹腔注射右旋糖酐鐵50mg/kg/d，空白對照組小鼠注射等量的生理鹽水。 在第14天于末次給藥后，稱量小鼠的體重，然后用戊巴比妥鈉麻醉。取血，分離血清，以便于用試劑盒檢測血清中肌酐（CR）和尿素氮（BUN）等水平。迅速分離小鼠腎臟組織，并用冰預(yù)冷的生理鹽水洗滌，取部分組織迅速放入液氮中冷凍，采用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT）介導(dǎo)的缺口末端標記法（TUNEL）檢測細胞凋亡；用火焰原子吸收光譜法分析腎臟勻漿中的鐵濃度；采用試劑盒測定腎組織中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性以及丙二醛（MDA）的含量。剩下的腎臟組織浸泡在4%多聚甲醛中，一部分組織做普魯士藍染色，用來觀察組織中鐵的沉積情況。剩下部分組織分別作蘇木素和伊紅（HE）染色、PAS染色、Massson染色，用于病理形態(tài)學(xué)的檢測。 采用高效液相色譜法測定丹參注射液主要成分。 結(jié)果： 1丹參注射液的主要成分分析 結(jié)果顯示，丹參注射液中含有的丹參素，原兒茶醛和丹參酚酸B的濃度分別是2.15、0.44和1.01mg/mL。 2丹參注射液對小鼠體重的影響 與空白對照組小鼠相比，鐵超載模型組的小鼠體重增加明顯降低（P0.01）。然而，丹參注射液低劑量組、丹參注射液高劑量組和去鐵胺陽性對照組小鼠的體重結(jié)果說明鐵超載小鼠給予丹參和去鐵胺治療后，體重增加量則明顯高于鐵超載模型組（分別是P 0.01，P 0.01，P 0.05）。 3丹參注射液對腎臟中鐵普魯士藍染色結(jié)果的影響 與正常腎臟組織相比較，在鐵超載模型小鼠的腎小球中存在著大量的沉積鐵。然而給予丹參和去鐵胺治療后，腎小球中鐵的沉積量則明顯下降。 4丹參注射液對小鼠病理形態(tài)學(xué)的影響 空白對照組小鼠的腎臟組織沒有明顯的形態(tài)學(xué)改變。然而相比之下，鐵超載模型小鼠的腎臟則出現(xiàn)了顯著的組織學(xué)改變。損傷情況評估分數(shù)也直接顯示出鐵超載模型組的腎小球損傷和腎小管間質(zhì)損傷接近于正常腎臟組織的21倍，，兩者之間呈現(xiàn)顯著性差異（P 0.01）。當給予鐵超載小鼠低劑量和高劑量丹參注射液治療后，腎小球損傷和腎小管間質(zhì)損傷程度降低40%-50%，有顯著性差異（P 0.01）。 5丹參注射液對小鼠腎臟組織中鐵沉積的影響 鐵超載模型組的小鼠的腎臟組織中存在著大量的沉積鐵。但是，在給予丹參治療后，小鼠腎臟中鐵的含量明顯下降（P 0.01）。 6丹參注射液對小鼠血清中BUN和CR的影響 與空白對照組相比，鐵超載模型組小鼠的血清BUN和CR水平呈現(xiàn)明顯升高的現(xiàn)象（P 0.01）。但是，與鐵超載模型組小鼠相比較，在所有丹參注射液低劑量組和丹參注射液高劑量治療組的小鼠的血清BUN和CR水平已經(jīng)表現(xiàn)出明顯的降低趨勢，并且有顯著性差異（P 0.01）。 7丹參注射液對小鼠腎臟組織中SOD、GSH-Px、MDA的影響 與空白對照組相比，鐵超載模型組的腎臟組織中SOD和GSH Px的活性明顯降低（P 0.01）。但是與鐵超載模型小鼠腎臟組織相比，去鐵胺組和丹參治療組的小鼠腎臟中，這兩種酶的活性的下降趨勢明顯減小（P0.01）。此外，鐵超載模型組小鼠的腎臟組織中的MDA的濃度比空白對照組明顯增高（P 0.01）�？墒牵o予丹參治療后，MDA濃度明顯低于鐵超載模型組（P 0.01）。 8丹參注射液對小鼠腎臟細胞凋亡的影響 空白對照組腎管狀細胞凋亡程度維持在一個較低水平。相比之下，鐵超載模型組的腎臟組織中腎管狀細胞凋亡明顯增多，TUNEL陽性數(shù)量也明顯增多（P 0.01）。給予丹參注射液治療后，TUNEL陽性的腎管狀細胞數(shù)量顯著減少（P 0.01）。 結(jié)論：我們的研究結(jié)果表明丹參注射液能夠抑制鐵超載引發(fā)的腎臟損傷。丹參的這些對抗鐵超載損傷的作用機制很可能與抑制鐵的沉積、抑制脂質(zhì)過氧化、減少細胞凋亡等有關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

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本文編號：1629060