本文關(guān)鍵詞：從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑探討益氣除痰方對肺癌未折疊蛋白反應(yīng)相關(guān)蛋白ATF6、XBP1、CNX的影響

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【摘要】：背景:惡性腫瘤已成為威脅人類健康的常見疾病之一。根據(jù)世界衛(wèi)生組織發(fā)布的報告,肺癌的發(fā)病及死亡是惡性腫瘤的第一位,且仍在不斷上升,因此肺癌的防治成為全世界廣泛關(guān)注的問題。目前針對肺癌的治療方法主要包括手術(shù)、放療、化療、分子靶向治療及生物治療等,但存在副作用大,易耐藥,療效不理想等問題。中醫(yī)藥作為我國傳統(tǒng)且獨有的方法,在防治肺癌上有獨特的效果。益氣除痰方已經(jīng)過前期研究及長期的臨床實踐證明,能有效地抑制肺癌細(xì)胞生長及抑制肺癌的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。目的:本研究通過應(yīng)用益氣除痰方(Yiqi Chutan formula,YQCTF)干預(yù),以人類肺癌細(xì)胞A549為靶細(xì)胞,結(jié)合BALB/c裸小鼠實驗,測量并計算肺癌A549裸鼠移植瘤體積、瘤重、抑瘤率,檢測移植瘤激活轉(zhuǎn)錄因子6(activating transcription factor 6,ATF6)、調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)、鈣聯(lián)蛋白(calnexin,CNX)的表達(dá)情況,從調(diào)控內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑的角度研究其抗癌的具體機(jī)制。方法:在BALB/c裸鼠背側(cè)皮下接種處于對數(shù)生長期的A549細(xì)胞懸液(1×107/mL),0.2mL/只。隨機(jī)分為模型組(生理鹽水0.2mL)、順鉑注射液組(0.002g·kg-1)、益氣除痰方低劑量組(3.0 g·kg-1)、益氣除痰方高劑量組(6.0 g·kg-1)、聯(lián)合用藥組(6.0 g·kg-1/0.002g·kg-1),每組8只。接種第8天,給予中藥灌胃,每天1次,1次0.2mL,連用14天。第17天,順鉑注射液組及聯(lián)合用藥組給予順鉑注射液腹腔注射,每天1次,1次0.2mL,連用5天。在第22天,麻醉后處死裸鼠,稱取瘤重,測量瘤體大小。采用免疫組織化學(xué)法、免疫印跡法(Western blot)及實時熒光定量多聚核苷酸鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法檢測各組移植瘤組織ATF6、XBP1及CNX的表達(dá)。結(jié)果:與模型組比較,除益氣除痰方低劑量組外,各組移植瘤體積、瘤重、ATF6、XBP1、CNX mRNA表達(dá)、蛋白表達(dá)及平均吸光度均明顯降低(P0.01)。聯(lián)合用藥組瘤重及瘤體積低于順鉑注射液組(P0.05,P0.01)。聯(lián)合用藥組ATF6、XBP1及CNX的平均吸光度較順鉑注射液組降低(P0.05,P0.01)。聯(lián)合用藥組ATF6、XBP1、CNX蛋白及mRNA的表達(dá)低于順鉑注射液組(P0.01)。結(jié)論:益氣除痰方能夠抑制肺癌A549裸鼠移植瘤的生長,其機(jī)制與降低瘤體組織ATF6、CNX、XBP1蛋白及其mRNA的表達(dá),減少腫瘤細(xì)胞發(fā)生未折疊蛋白反應(yīng)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：益氣除痰方 肺癌 未折疊蛋白反應(yīng)相關(guān)蛋白
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R273
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-12
• 第一部分 益氣除痰方對肺癌A549裸鼠移植瘤生長的影響12-17
• 1 材料12-13
• 2 方法13-15
• 3 結(jié)果15-16
• 4 小結(jié)16-17
• 第二部分 益氣除痰方對肺癌A549裸鼠移植瘤ATF6、XBP1、CNX表達(dá)的影響17-27
• 1 材料17-18
• 2 方法18-22
• 3 結(jié)果22-25
• 4 小結(jié)25-27
• 討論27-30
• 總結(jié)30-31
• 創(chuàng)新及意義31-32
• 參考文獻(xiàn)32-35
• 附圖35-39
• 文獻(xiàn)綜述：中醫(yī)藥對肺癌化療所致不良反應(yīng)的影響39-43
• 參考文獻(xiàn)41-43
• 致謝43-44
• 攻讀碩士期間發(fā)表的論文44

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2 黎智q，

本文編號：1018104