茄尼醇對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎抗炎抗氧化作用研究
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【摘要】:[目的]通過(guò)建立體內(nèi)外炎癥模型探討茄尼醇對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎抗炎抗氧化作用研究。[方法]1.體內(nèi)實(shí)驗(yàn):126只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常組(N組,18只),牙周炎建模組108只。通過(guò)雙側(cè)上頜第二磨牙絲線結(jié)扎配合黏性高糖飲食4周建立牙周炎模型。成模后,牙周炎大鼠再隨機(jī)分為牙周炎組(P組)、替硝唑組(T組)、維生素C組(VitC組)、茄尼醇低劑量組(S1)、中劑量組(S2)、高劑量組(S3),每組18只。灌胃給予不同藥物,替硝唑首日劑量為20mg/100g,后面按10mg/100g給藥;維生素C組劑量為10mg/100g;茄尼醇組劑量分別為1.5mg/100g、3mg/100g、6mg/100g, N組、P組灌胃等體積溶劑,1次/天,分別在灌胃的2、4、6周,每組隨機(jī)抽取6只大鼠行腹主動(dòng)脈采血后處死,并分離大鼠上頜骨,左側(cè)用于測(cè)量牙槽骨喪失,右側(cè)行組織學(xué)HE染色和TRAP染色。ELISA檢測(cè)血漿中白介素1-β(interleukins1-β,IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、前列腺素E2 (Prostaglandin E2, PGE2)表達(dá)水平以及用羥胺法和DTNB法檢測(cè)SOD、GSH-Px的活性,TBA法檢測(cè)MDA含量。2.體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn):脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激巨噬細(xì)胞RAW264.7,構(gòu)建細(xì)胞炎癥模型。通過(guò)MTS法檢測(cè)化合物茄尼醇對(duì)RAW264.7細(xì)胞的毒性后,利用構(gòu)建的細(xì)胞炎癥反應(yīng)模型,對(duì)茄尼醇進(jìn)行抗炎和抗氧化作用的研究。實(shí)驗(yàn)分為陰性對(duì)照組,LPS組,LPS+VitC組,LPS+VitE組,LPS+不同濃度茄尼醇組(3.75uM、7.5uM、15uM、30uM、60uM)。細(xì)胞培養(yǎng)液被收集后ELISA檢測(cè)各組炎癥因子TNF-α、IL-1β、PGE2表達(dá)水平;收集細(xì)胞,羥胺法和DTNB法檢測(cè)SOD、GSH-Px的活性,TBA法檢測(cè)MDA含量。以上實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS17.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。[結(jié)果]1.建模4周后大鼠牙周組織中大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),上皮釘突伸長(zhǎng),牙槽骨不規(guī)則吸收,深牙周袋形成,表明牙周炎模型建立成功。在藥物分別干預(yù)2W、4W、6W后,茄尼醇組牙槽骨喪失程度和破骨細(xì)胞活躍程度有減輕趨勢(shì),與牙周炎組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。炎癥因子和氧化應(yīng)激指標(biāo)在大鼠血漿中的變化:與正常組相比,牙周炎組IL-1β、TNF-α、PGE2的表達(dá)均明顯增加(P0.05),給藥后,牙周炎大鼠血漿中IL-1β、 TNF-α、PGE2的表達(dá)水平均顯著降低(P0.05),同時(shí)SOD、GSH-Px活性升高, MDA的含量降低(P0.05)。2.1mg/mlLPS作用RAW264.7細(xì)胞24h后,炎性因子IL-1β、TNF-α、PGE2的表達(dá)和MDA的含量均顯著增加,SOD和GSH-Px的活性降低。茄尼醇各濃度組均明顯降低TNF-α、IL-1β、PGE2的表達(dá),呈濃度依賴性,同時(shí)增加了抗氧化酶SOD和GSH-Px的活性,降低了MDA的含量。[結(jié)論]應(yīng)用茄尼醇可以顯著降低炎癥因子TNF-α、IL-1β、PGE2的表達(dá)水平,還可以不同程度的提高SOD、GSH-Px抗氧化酶的活性,降低MDA的含量,但對(duì)減輕牙槽骨喪失和抑制破骨細(xì)胞的活化作用不明顯。
【關(guān)鍵詞】:茄尼醇 牙周炎 自由基 炎癥因子 抗氧化酶
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R781.4
【目錄】:
- 英文縮略詞表5-6
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-11
- 前言11-17
- 實(shí)驗(yàn)一 茄尼醇對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎炎癥及自由基水平的影響17-55
- 實(shí)驗(yàn)材料與方法17-29
- 結(jié)果29-48
- 討論48-54
- 結(jié)論54-55
- 實(shí)驗(yàn)二 茄尼醇對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞的作用研究55-80
- 實(shí)驗(yàn)材料與方法55-65
- 結(jié)果65-76
- 討論76-79
- 結(jié)論79-80
- 全文總結(jié)80-81
- 問(wèn)題及展望81-82
- 參考文獻(xiàn)82-89
- 綜述89-102
- 參考文獻(xiàn)96-102
- 攻讀學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果102-103
- 致謝103
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4 陳s,
本文編號(hào):935212
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