本文關(guān)鍵詞：芪藍(lán)制劑對(duì)體外培養(yǎng)口腔癌前細(xì)胞增殖、凋亡影響研究

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【摘要】：目的:本研究應(yīng)用不同濃度的芪藍(lán)制劑作用于人口腔黏膜正常上皮細(xì)胞(Human Oral Keratinocytes HOK)、口腔黏膜異常增生細(xì)胞(Dysplastic Oral Keratinocyte DOK)、人舌鱗癌細(xì)胞(Tca8113),觀察芪藍(lán)制劑對(duì)不同癌變程度細(xì)胞是否有選擇性抑制作用,對(duì)DOK細(xì)胞增值和凋亡的影響機(jī)制,為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1.培養(yǎng)HOK、DOK、Tca8113.形成不同癌變程度的三種細(xì)胞系。2.采用CCK-8法檢測(cè)芪藍(lán)制劑對(duì)HOK、DOK、Tca8113增殖的抑制作用。3.采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同濃度芪藍(lán)制劑作用后DOK細(xì)胞周期和凋亡的變化。4.采用蛋白質(zhì)印跡法(Western blot WB)檢測(cè)DOK細(xì)胞內(nèi)b細(xì)胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2 Bcl-2)蛋白、Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bcl-2 Associated X Protein Bax)和細(xì)胞周期蛋白D1(Cylin D1)蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果:1.HOK角蛋白染色陽(yáng)性,HOK、DOK、Tca8113具有不同的生長(zhǎng)特性。2.CCK-8法檢測(cè)表明芪藍(lán)制劑對(duì)HOK、DOK、Tca8113細(xì)胞增殖的抑制作用逐漸增強(qiáng),并呈劑量效應(yīng)關(guān)系3.流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示DOK細(xì)胞用藥組G0/G1期細(xì)胞高于對(duì)照組,凋亡率隨芪藍(lán)制劑濃度的升高而增加。4.WB結(jié)果顯示一定濃度的芪藍(lán)制劑作用于DOK 24h后,隨著濃度的升高Cyclin D1及Bcl-2蛋白的表達(dá)逐漸降低,Bax蛋白的表達(dá)與Bax/Bcl-2比值逐漸升高結(jié)論:1.成功體外培養(yǎng)HOK、DOK、Tca8113。三者具有不同的生長(zhǎng)特性,形成不同癌變程度的三種細(xì)胞系2.芪藍(lán)制劑對(duì)Tca8113、DOK的增殖具有顯著的抑制作用。3.芪藍(lán)制劑具有低毒性和選擇性抑制作用,抑制作用隨癌變程度的增加而增強(qiáng)。4.芪藍(lán)制劑可促進(jìn)DOK細(xì)胞凋亡。5.通過(guò)對(duì)EGFR,P27,Cylin D1作用導(dǎo)致G0/G1期阻滯,可能是芪藍(lán)制劑抑制DOK增殖的機(jī)制6.上調(diào)P53介導(dǎo)的Bax及下調(diào)Bcl-2,可能為芪藍(lán)制劑促進(jìn)DOK細(xì)胞凋亡機(jī)制
【關(guān)鍵詞】：芪藍(lán)制劑 口腔黏膜異常增生細(xì)胞 細(xì)胞周期 凋亡
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.8
【目錄】：

• 附錄4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 第一部分 芪藍(lán)制劑對(duì)不同癌變程度細(xì)胞選擇性抑制作用研究9-28
• 前言9-10
• 材料與方法10-16
• 結(jié)果16-24
• 討論24-27
• 結(jié)論27-28
• 第二部分 芪藍(lán)制劑對(duì)癌前細(xì)胞增殖、凋亡的作用機(jī)制研究28-49
• 前言28-29
• 材料與方法29-34
• 結(jié)果34-43
• 討論43-48
• 結(jié)論48-49
• 參考文獻(xiàn)49-55
• 綜述55-67
• 參考文獻(xiàn)62-67
• 致謝67

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：794362