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醋酸棉酚對人舌鱗癌Cal-27裸鼠移植瘤抑制作用的實驗研究

發(fā)布時間:2017-08-30 12:09

  本文關鍵詞:醋酸棉酚對人舌鱗癌Cal-27裸鼠移植瘤抑制作用的實驗研究


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【摘要】:[目的]研究醋酸棉酚對人舌鱗癌Cal-27裸鼠移植瘤的治療作用,并初步探討醋酸棉酚對頭頸鱗癌的抑制作用及其機制,為臨床治療相關腫瘤提供一種新途徑和科學理論依據(jù)。[材料與方法]1.建立動物模型。選4-6周BALB/C-nu裸鼠,將常規(guī)培養(yǎng)的人舌鱗癌Cal-27細胞接種于裸鼠右腋皮下,每只注射0.1ml(細胞密度3×107/ml),觀察裸鼠成瘤情況,計算成瘤率。2.實驗分組及藥物干預。2周后將成瘤裸鼠隨機分為三組(n=8),設立空白組(生理鹽水0.2ml/只);DMSO組(0.2%的DMSO0.2ml/只);醋酸棉酚GAA組(0.2% DMSO助溶的GAA 15mg/kg)。給藥方式均為腹腔注射,1次/2天,共6次。3.藥物治療作用觀察。記錄裸鼠體重及移植瘤變化情況,繪制腫瘤生長曲線。最后一次給藥2天后處死裸鼠,剝離瘤體組織及其主要臟器,稱量腫瘤質量計算抑瘤率。4.制作石蠟切片。HE染色觀察各組腫瘤組織病理變化及其主要臟器是否有癌細胞轉移,TUNEL檢測各組腫瘤細胞凋亡率。5.免疫組化行CD31檢測,統(tǒng)計各組腫瘤中MVD值的結果。[結果]1.成功建立人舌鱗癌Cal-27裸鼠移植瘤動物模型,成瘤率為96%。2.裸鼠體重及移植瘤體積變化:空白組裸鼠質量最重;DMSO組次之;GAA組裸鼠質量最輕。空白組和DMSO組體重變化無顯著差異(P0.05),GAA組與其余兩組之間體重變化均有顯著差異(P0.05)。GAA組移植瘤體積在藥物干預后變化明顯,瘤體增長速度緩慢,移植瘤體積明顯小于空白組及DMSO組,與空白組及DMSO組比較具有顯著性差異(P0.05)3.抑瘤率情況:空白組腫瘤,其平均瘤重為(1.835±0.293)g,抑瘤率為0%;DMSO組腫瘤,平均瘤重(1.764±0.184)g,抑瘤率(3.87±3.7)%;GAA組腫瘤,平均瘤重(0.839±0.091)g,抑瘤率(54.28±6.9)%。GAA組與其余兩組(空白組和DMSO組)比較,抑瘤率存在顯著性差異(P0.05)。4,HE染色示:空白組,細胞排列最緊密,血管數(shù)最多,核大深染;DMSO組,細胞排列疏松,血管數(shù)較少,間質較多,核深染;GAA組,細胞異型性不明顯,呈巢狀、索條狀排列,腫瘤血管最少。三組裸鼠主要臟器均未發(fā)現(xiàn)鱗癌細胞轉移。5.TUNEL檢測各組腫瘤細胞凋亡率:空白組凋亡率為(21.144-10.01)%;DMSO組(23.80±4.45)%;GAA組(96.16±2.80)%?瞻捉M與DMSO組比較無顯著性差異(P0.05);GAA組與其余兩組分別比較有顯著性差異(P0.01)。6.各組裸鼠移植瘤MVD值結果:空白組及DMSO組MVD值高于GAA組,差異具有顯著性(P0.01);空白組與DMSO組MVD值比較差異無顯著性(P0.05)。[結論]1.成功建立人舌鱗癌Cal-27裸鼠移植瘤動物模型,成瘤率為96%。2.醋酸棉酚(GAA)對人舌鱗癌Cal-27裸鼠移植瘤的生長具有明顯抑制作用,HE染色示:人舌鱗癌Cal-27裸鼠移植瘤模型未見鱗癌發(fā)生遠處轉移。3.醋酸棉酚(GAA)可促進人舌鱗癌Cal-27裸鼠移植瘤細胞凋亡。4.醋酸棉酚(GAA)抑制人舌鱗癌Cal-27裸鼠移植瘤生長可能與抑制腫瘤血管生成及降低腫瘤內微血管密度MVD值有關。
【關鍵詞】:醋酸棉酚 舌鱗癌 裸鼠 細胞凋亡 微血管密度
【學位授予單位】:昆明醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R739.86
【目錄】:
  • 英文縮略表5-6
  • 摘要6-8
  • Abstract8-11
  • 引言11-14
  • 一、實驗材料14-16
  • 1. 細胞株14
  • 2. 實驗動物14
  • 3. 實驗藥物14
  • 4. 主要儀器設備14-15
  • 5. 主要試劑15-16
  • 二、實驗方法16-22
  • 1. 試劑配制16
  • 2. 細胞培養(yǎng)16-17
  • 3. 建立動物模型17-18
  • 4. 實驗分組與給藥18
  • 5. 藥物治療作用觀察18
  • 6. 腫瘤組織病理學觀察18-19
  • 7. TUNEL檢測各組腫瘤細胞凋亡率19-20
  • 8. 各組移植瘤微血管密度值(MVD)檢測20-21
  • 9. 統(tǒng)計學分析21-22
  • 三、實驗結果22-34
  • 1. 細胞形態(tài)及動物模型觀察22-23
  • 2. 裸鼠體重及移植瘤變化情況23-25
  • 3. 藥物對腫瘤組織大小、質量及抑瘤率的作用25-28
  • 4. 腫瘤組織及其主要臟器病理學觀察28-30
  • 5. TUNEL檢測各組腫瘤細胞凋亡率30-31
  • 6. CD31染色結果判定及微血管密度值的統(tǒng)計31-34
  • 四、討論34-40
  • 五、結論40-41
  • 參考文獻41-46
  • 綜述46-55
  • 參考文獻52-55
  • 攻讀學位期間發(fā)表的文章55-56
  • 致謝56

【參考文獻】

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本文編號:759202

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