本文關鍵詞：SOX4在口腔扁平苔蘚相關口腔鱗狀細胞癌中的表達驗證及其意義

  更多相關文章： 口腔扁平苔蘚 口腔鱗狀細胞癌 LC-MS/MS 免疫組織化學 SOX4

【摘要】：目的：1.采用液相色譜-串聯(lián)質譜(Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry, LC-MS/MS)技術篩選可能引起口腔扁平苔蘚(Oral Lichen Planus, OLP)癌變的相關高風險分子標志物SOX4。2.從蛋白水平檢測SOX4在口腔鱗狀細胞癌(Oral Squamous Cell Carcinoma, OSCC)細胞株及正常人口腔角質上皮(Normal Human Oral Keratinocyte, NHOK)細胞株中的表達情況。3.利用免疫組化技術進一步檢測SOX4在OLP、OSCC及口腔扁平苔蘚相關鱗狀細胞癌(Oral Lichen Planus Related Oral Squamous Cell Carcinoma, OLP-OSCC)組織中的表達變化。方法：1.實驗中所用的福爾馬林固定石蠟包埋(Formalin-Fixed and Parrf fin-Embedded, FFPE)組織標本為2004年-2013年間在四川省醫(yī)學科學院·四川省人民醫(yī)院口腔科就診的單純OSCC(非OLP相關的OSCC)患者標本27例,單純OLP患者標本19例,OLP-OSCC患者標本5例,、均由四川省醫(yī)學科學院·四川省人民醫(yī)院病理科提供,采用LC-MS/MS技術檢測各組標本,分離肽段,鑒定蛋白質,獲得差異蛋白SOX4；2.進一步利用western blotting蛋白免疫印記技術檢測SOX4蛋白在NHOK細胞株和OSCC細胞株中的表達變化；3.對19例OLP患者標本,27例OSCC患者標本,5例OLP-OSCC患者標本進行免疫組化檢測,檢測3組標本中SOX4的表達情況。結果：1.利用LC-MS/MS技術在OLP的FFPE標本中一共鑒定出97種蛋白,在OSCC的FFPE標本中鑒定出135種蛋白,在OLP-OSCC的FFPE標本中鑒定出142種蛋白,并篩選出差異蛋白SOX4,發(fā)現SOX4蛋白僅在OLP-OSCC組織中表達;2.western blotting結果顯示SOX4在NHOK細胞株中基本不表達,在OSCC細胞株中高表達；3.免疫組化結果顯示SOX4在oscc和OLP-OSCC組織的細胞核內均呈強陽性表達,且表達陽性率分別是96.29%及100%,SOX4在OLP組織中基本不表達,陽性率為5.26%。結論：1.本實驗成功地利用LC-MS/MS技術從OLP、OSCC和OLP-OSCC的FFPE標本中獲得并鑒定出差異蛋白,篩選出關鍵差異蛋白SOX4；2.在蛋白水平對SOX4的表達進行驗證,發(fā)現SOX4在OSCC細胞及組織中高表達；3.SOX4蛋白可能作為OSCC的一種新風險標志物,參與OLP惡變?yōu)镺SCC的過程。
【關鍵詞】：口腔扁平苔蘚 口腔鱗狀細胞癌 LC-MS/MS 免疫組織化學 SOX4
【學位授予單位】：四川醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R739.85
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• 英文摘要5-7
• 前言7-9
• 第一部分：SOX4在OLP、OSCC、OLP-OSCC中的表達及驗證9-33
• 實驗一：OLP、OSCC、OLP-OSCC組織的蛋白組學分析9-20
• 材料與方法9-15
• 結果15-20
• 實驗二：利用western blotting蛋白免疫印跡技術檢測SOX4在不同細胞株中的表達20-24
• 材料與方法20-23
• 結果23-24
• 討論24-32
• 結論32-33
• 第二部分：SOX4在OLP、OSCC、OLP-OSCC組織中的差異表達33-46
• 1 實驗材料33
• 2 主要實驗設備33
• 3 主要試劑33
• 4 實驗步驟33-36
• 結果36-41
• 討論41-45
• 結論45-46
• 全文總結46-48
• 參考文獻48-54
• 英漢縮略詞對照表54-55
• 致謝55-56
• SOX基因家族與頜面部腫瘤的研究進展(綜述)56-69
• 參考文獻64-69

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本文編號：740088