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溶膠-凝膠法制備鈦酸鋇涂層對(duì)L929細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期及凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-08-23 02:17

  本文關(guān)鍵詞:溶膠-凝膠法制備鈦酸鋇涂層對(duì)L929細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期及凋亡的影響


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【摘要】:目的本課題從細(xì)胞生物學(xué)角度對(duì)新型純鈦烤瓷冠的中間涂層進(jìn)行生物安全性檢測(cè),應(yīng)用MTT比色法和流式細(xì)胞儀定量測(cè)試的方法,通過(guò)觀(guān)察鈦酸鋇涂層浸提液對(duì)L929細(xì)胞的活性、增殖抑制情況、細(xì)胞周期變化及凋亡情況的影響,評(píng)價(jià)鈦酸鋇涂層的生物安全性,以期為鈦酸鋇涂層應(yīng)用于臨床提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法本研究分為三部分:1溶膠-凝膠法制備鈦酸鋇涂層對(duì)L929細(xì)胞增殖的影響,實(shí)驗(yàn)分四組:鈦酸鋇涂層的鈦瓷試件(A組)、常規(guī)鈦瓷試件(B組),并以含10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基為陰性對(duì)照組(C組),1%苯酚溶液為陽(yáng)性對(duì)照組(D組),測(cè)定加樣后1d、3d、5d各組的吸光度值(OD),計(jì)算細(xì)胞相對(duì)增殖率(RGR),評(píng)定細(xì)胞毒性等級(jí)。2溶膠-凝膠法制備鈦酸鋇涂層對(duì)L929細(xì)胞細(xì)胞周期的影響,本實(shí)驗(yàn)分為三組:含鈦酸鋇涂層的鈦瓷試件組、常規(guī)鈦瓷試件組,陰性對(duì)照組,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組浸提液培養(yǎng)48h的L929細(xì)胞周期的變化。3溶膠-凝膠法制備鈦酸鋇涂層對(duì)L929細(xì)胞凋亡的影響,本實(shí)驗(yàn)分為三組:含鈦酸鋇涂層的鈦瓷試件組、常規(guī)鈦瓷試件組,陰性對(duì)照組,采用Annexin V/PI法染色法,用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞凋亡進(jìn)行定量檢測(cè)。結(jié)果1鈦酸鋇涂層的制備:溶膠凝膠法制備出鈦酸鋇涂層,掃描電鏡下涂層組織致密,有一定粗糙度,表面有紋理,無(wú)明顯裂紋;能譜分析數(shù)據(jù):Ti的原子百分率為10.97%,Ba為74.22%,O為7.17%,Si為5.91%,Al為1.73%。2本實(shí)驗(yàn)室條件下細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)結(jié)果:細(xì)胞的鏡下觀(guān)察及A值分析,L929細(xì)胞在本實(shí)驗(yàn)室的最適生長(zhǎng)密度為6×104/ml。3 MTT法檢測(cè)L929細(xì)胞增殖率、評(píng)價(jià)細(xì)胞毒級(jí)結(jié)果:同一培養(yǎng)時(shí)間,不同濃度浸提液與陽(yáng)性對(duì)照組的吸光度值比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),100%鈦酸鋇涂層組吸光度值大于陰性對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);除陽(yáng)性對(duì)照組外,各組濃度浸提液的吸光度值均隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而增加(P0.05),25%、50%、75%鈦酸鋇涂層組第1d吸光度與陰性對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而到第5d,25%、50%、75%鈦酸鋇涂層組吸光度與陰性對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4 PI法測(cè)細(xì)胞周期結(jié)果,G1期:鈦酸鋇涂層組和常規(guī)鈦瓷結(jié)合組與陰性組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),鈦酸鋇涂層組與常規(guī)鈦瓷結(jié)合組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);S期:鈦酸鋇涂層組和常規(guī)鈦瓷結(jié)合組與陰性組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),鈦酸鋇涂層組與常規(guī)鈦瓷結(jié)合組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);G2期:三組間數(shù)值無(wú)明顯差異(P0.05)。5 PI/Annexin V檢測(cè)細(xì)胞凋亡結(jié)果:鈦酸鋇涂層組和常規(guī)鈦瓷結(jié)合組凋亡與陰性組凋亡比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),鈦酸鋇涂層組與常規(guī)鈦瓷結(jié)合組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1含有鈦酸鋇涂層的鈦瓷結(jié)合組與常規(guī)鈦瓷結(jié)合組比體外毒性試驗(yàn)中無(wú)短期細(xì)胞毒性,并且有促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用。2與常規(guī)鈦瓷結(jié)合組比較,細(xì)胞周期和凋亡的影響無(wú)顯著性差異。3建議臨床使用鈦酸鋇涂層來(lái)增加鈦瓷結(jié)合強(qiáng)度,減少崩瓷瓷裂的現(xiàn)象發(fā)生,從而提高修復(fù)治療的成功率。
【關(guān)鍵詞】:鈦酸鋇涂層 L929細(xì)胞 細(xì)胞毒性 細(xì)胞周期 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】:華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:R783.1
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-11
  • 引言11-12
  • 第1章 溶膠-凝膠法制備鈦酸鋇涂層對(duì)L929細(xì)胞增殖的影響12-27
  • 1.1 材料和方法12-17
  • 1.2 結(jié)果17-24
  • 1.3 討論24-25
  • 1.4 本章結(jié)論25
  • 參考文獻(xiàn)25-27
  • 第2章 溶膠-凝膠法制備的鈦酸鋇涂層對(duì)L929細(xì)胞周期的影響27-35
  • 2.1 材料與方法27-31
  • 2.2 結(jié)果31-32
  • 2.3 討論32-33
  • 2.4 本章結(jié)論33-35
  • 第3章 溶膠凝膠法制備的鈦酸鋇涂層對(duì)L929細(xì)胞凋亡的影響35-44
  • 3.1 材料與方法35-39
  • 3.2 結(jié)果39-40
  • 3.3 討論40-42
  • 3.4 結(jié)論42
  • 參考文獻(xiàn)42-44
  • 第4章 綜述 牙科材料細(xì)胞毒性的研究進(jìn)展44-56
  • 4.1 生物學(xué)評(píng)價(jià)的細(xì)胞44-45
  • 4.2 生物相容性的評(píng)價(jià)方法45-49
  • 4.3 生物安全性評(píng)價(jià)在口腔材料領(lǐng)域的應(yīng)用49-53
  • 參考文獻(xiàn)53-56
  • 結(jié)論56-57
  • 致謝57-58
  • 導(dǎo)師簡(jiǎn)介58-59
  • 作者簡(jiǎn)介59-60
  • 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集60

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本文編號(hào):722412

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