本文關(guān)鍵詞：不同表面特性種植體與煙草浸提液對(duì)成骨細(xì)胞生物學(xué)性能的影響

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【摘要】：目的：通過檢測(cè)機(jī)械磨光(smooth pretreatenmt, PT)、噴砂酸蝕(sandblasted and acid etched, SLA)、陽(yáng)極氧化(anodic oxidation, AD)三種經(jīng)過不同表面處理的純鈦片試件對(duì)成骨細(xì)胞增殖、細(xì)胞骨架形態(tài)及對(duì)白細(xì)胞介素-6 (interleukin-6, IL-6).核心結(jié)合因子α1(core binding factor alpha 1, Cbfα1) mRNA的表達(dá)的影響,探討種植體表面特性對(duì)種植術(shù)后早期骨改建、骨結(jié)合的影響機(jī)制。方法：用機(jī)械磨光法(PT組)、噴砂酸蝕法(SLA組)、陽(yáng)極氧化法(AD組)制備3種不同表面特性的純鈦標(biāo)準(zhǔn)試件,掃描電子顯微鏡(Scanning Electronic Microscopy, SEM)觀察其表面微形貌及應(yīng)用X射線能譜儀(Energy Dispersive Spectrometer, EDS)分析表面元素構(gòu)成；應(yīng)用表面粗糙度儀檢測(cè)各組表面粗糙度,應(yīng)用接觸角測(cè)量?jī)x檢測(cè)各組鈦片表面靜態(tài)水接觸角;將小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14 (MC3T3-E1 Sub-clone 14, MC3T3)與各組純鈦片共同培養(yǎng),以培養(yǎng)在未放置鈦片試件的24孔細(xì)胞培養(yǎng)板(tissue culture plates, TCPS)孔內(nèi)的細(xì)胞為對(duì)照組,噻唑藍(lán)(3-(4,5-diethylthiazol-2-yl)-2,5diphenyltetrazolium Bromide, MTT)法檢測(cè)共同培養(yǎng)1d、3d、5d、7d的細(xì)胞增殖率,應(yīng)用激光掃描共聚焦顯微鏡(confocal laser scanning microscope, CLSM)觀察共同培養(yǎng)1.5h、6h后成骨細(xì)胞細(xì)胞骨架的形態(tài)變化,熒光實(shí)時(shí)定量PCR (quantitative real-time PCR, RT-qPCR)法檢測(cè)共同培養(yǎng)6h、12h、24 h后IL-6和Cbfal mRNA表達(dá)情況。結(jié)果：PT組表面呈機(jī)械劃痕,SLA組呈大小結(jié)合、深淺不一的窩洞,AD組呈分布較均勻、大小不一的圓孔狀結(jié)構(gòu)。三組鈦片表面主要元素分別為Ti,Ti、Al, Ti、O。PT、SLA、AD組表面靜態(tài)水接觸角分別為54.47±3.33°、75.42±8.32°、38.91±4.00°,兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MTT結(jié)果顯示MC3T3在各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖率均低于TCPS(P0.05),而ADPTSLA(P0.05)。細(xì)胞接種各組鈦片表面1.5 h后,各組觀察不到明顯絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)構(gòu),SLA、AD兩組細(xì)胞出現(xiàn)突觸狀結(jié)構(gòu),SLA組較多,接種6h后,三組可見明顯絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)構(gòu),AD組細(xì)胞形態(tài)多樣,鋪展最為充分,可見網(wǎng)絡(luò)狀骨架結(jié)構(gòu)。RT-qPCR結(jié)果顯示在同一時(shí)間點(diǎn)各實(shí)驗(yàn)組相對(duì)TCPS組可下調(diào)IL-6 mRNA表達(dá)、上調(diào)Cbfal mRNA的表達(dá)(P0.05),而各實(shí)驗(yàn)組則ADSLAPT (P0.05)。結(jié)論：AD法處理種植體表面比PT法及SLA法對(duì)促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖、促使細(xì)胞骨架早期充分鋪展、下調(diào)IL-6 mRNA表達(dá)及上調(diào)Cbfal mRNA表達(dá)顯示出更強(qiáng)作用,提示AD法處理種植體表面在種植早期可獲得更好更快的骨結(jié)合。目的：研究不同濃度煙草浸提液(smokeless tobacco extract,STE)對(duì)成骨細(xì)胞生物學(xué)性能的影響,探討吸煙影響種植體骨結(jié)合的病理機(jī)制。方法：以含有STE濃度為0g/L(對(duì)照組)、0.01 g/L、0.1 g/L、1g/L、5g/L、10 g/L的細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14(MC3T3-E1 Subclone 14,MC3T3),培養(yǎng)1d、 3d、5d、7d后用MTT法檢測(cè)各組細(xì)胞的增殖情況,激光掃描共聚焦顯微鏡(confocal laser scanning microscope,CLSM)觀察MC3T3細(xì)胞骨架(cytoskeleton)在不同濃度STE作用24 h后,應(yīng)用羅丹明-鬼筆環(huán)肽免疫熒光染色后的形態(tài)變化,熒光實(shí)時(shí)定量PCR(quantitative real-time PCR, RT-qPCR)檢測(cè)白細(xì)胞介素-6 (interleukin-6, IL-6)和核心結(jié)核因子(Cbfal) mRNA在不同濃度STE作用48h后的表達(dá)情況。結(jié)果：MTT結(jié)果顯示0.01～10g/L的STE可抑制MC3T3增殖(P0.05),5～10 g/L的STE可隨時(shí)間的延長(zhǎng)而抑制MC3T3增殖(P0.05)。細(xì)胞骨架觀察顯示對(duì)照組細(xì)胞骨架呈網(wǎng)絡(luò)狀鋪展,在STE刺激下微絲解聚,細(xì)胞骨架重排,濃度升高時(shí)細(xì)胞骨架的重排更加明顯。RT-qPCR結(jié)果顯示5-10 g/L的STE可上調(diào)MC3T3的IL-6 mRNA表達(dá)(P0.05),0.1～10 g/L的STE可下調(diào)MC3T3的Cbfα1 mRNA表達(dá)(P0.05),隨STE濃度升高,作用更加明顯。結(jié)論：煙草可抑制成骨細(xì)胞增殖,影響細(xì)胞骨架正常結(jié)構(gòu),上調(diào)MC3T3細(xì)胞IL-6 mRNA的表達(dá)和下調(diào)Cbfal mRNA的表達(dá),從而抑制成骨細(xì)胞的分化及附著,提示吸煙影響骨結(jié)合。
【關(guān)鍵詞】：表面特性 噴砂酸蝕 陽(yáng)極氧化 成骨細(xì)胞 IL-6 Cbfα1 煙草 增殖 細(xì)胞骨架 IL-6 Cbfα1
【學(xué)位授予單位】：濱州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R783.6
【目錄】：

• 第一部分：不同表面特性種植體對(duì)成骨細(xì)胞生物學(xué)性能的影響4-34
• 中文摘要4-5
• Abstract5-6
• 縮略語(yǔ)表6-7
• 前言7-11
• 參考文獻(xiàn)9-11
• 材料與方法11-18
• 結(jié)果18-24
• 討論24-28
• 結(jié)論28-29
• 參考文獻(xiàn)29-34
• 第二部分：煙草浸提液對(duì)成骨細(xì)胞生物學(xué)性能的影響34-53
• 中文摘要34-35
• Abstract35-36
• 縮略語(yǔ)表36-37
• 前言37-39
• 參考文獻(xiàn)38-39
• 材料與方法39-43
• 結(jié)果43-48
• 討論48-50
• 結(jié)論50-51
• 參考文獻(xiàn)51-53
• 文獻(xiàn)綜述53-62
• 參考文獻(xiàn)57-62
• 致謝62-63
• 研究生期間發(fā)表論文63

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鄭紀(jì)偉;郭宏亮;孟堯;韓建國(guó);;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1對(duì)鈦表面成骨細(xì)胞中骨鈣素基因表達(dá)的影響[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2012年09期

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本文編號(hào)：720012