本文關(guān)鍵詞：機(jī)械應(yīng)力作用下的骨細(xì)胞介導(dǎo)正畸牙移動(dòng)機(jī)制的相關(guān)研究

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【摘要】：目的經(jīng)典的正畸牙移動(dòng)理論認(rèn)為,在正畸治療中,當(dāng)我們施加合適的力作用于牙齒時(shí),首先引起牙周組織的改建,進(jìn)而發(fā)生骨改建,最終使牙齒發(fā)生移動(dòng)達(dá)到矯治目的。目前,普遍認(rèn)為牙周膜細(xì)胞受力后的活化增殖是啟動(dòng)組織改建的關(guān)鍵和開(kāi)端,骨重塑僅僅是牙周組織反應(yīng)伴隨的結(jié)局。然而,正畸臨床上的一個(gè)現(xiàn)象引起了我們的注意,牽引埋伏牙助萌的過(guò)程多沒(méi)有牙周膜組織參與,骨重塑依然會(huì)發(fā)生；另外選取植入微種植體作為支抗的病例,拍攝矯治前后錐形束CT(CBCT),通過(guò)CT三位配準(zhǔn)技術(shù)發(fā)現(xiàn),微種植體受力后也會(huì)產(chǎn)生位移。這是不是提示我們：埋伏牙和微種植體的移動(dòng)是牙槽骨直接感受機(jī)械應(yīng)力后的結(jié)果,而牙周膜并非埋伏牙(微種植體)移動(dòng)的關(guān)鍵。于是我們把目光轉(zhuǎn)向了骨細(xì)胞,在應(yīng)力刺激下,成熟骨細(xì)胞可以分泌一種抑制成骨的蛋白-Sclerostin。越來(lái)越多的研究表明,Sclerostin是Wnt/p-catenin信號(hào)通路的胞外抑制劑,通過(guò)與Wnt蛋白競(jìng)爭(zhēng)性地結(jié)合輔助受體LRP5/6抑制成骨細(xì)胞分化及活性；另外,Sclerostin通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合BMP的Ⅰ型和Ⅱ型受體抑制TGF-β/BMP信號(hào)通路,從而抑制成骨細(xì)胞的分化及骨形成；而在SOST基因敲除小鼠的動(dòng)物模型中,因?yàn)槿コ薙clerostin對(duì)Wnt/β-catenin信號(hào)途徑的抑制作用,成骨明顯增加。由此可見(jiàn),Sclerostin是骨重塑中非常重要的負(fù)性調(diào)控蛋白。綜合前期相關(guān)研究,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞施加牽引力模擬機(jī)體細(xì)胞受力環(huán)境,結(jié)合分子生物學(xué)檢測(cè)方法,擬從細(xì)胞水平和分子生物學(xué)角度探討Sclerostin在正畸牙齒移動(dòng)過(guò)程中對(duì)骨重塑的影響及作用機(jī)制,進(jìn)一步為正畸牙齒移動(dòng)提供理論和實(shí)踐依據(jù)。研究選取Saos2細(xì)胞來(lái)完成體外實(shí)驗(yàn),Saos2細(xì)胞是人骨肉瘤細(xì)胞,具有骨細(xì)胞的特點(diǎn),例如高表達(dá)成熟骨細(xì)胞的標(biāo)記基因SOST,DMP1等,而低表達(dá)成骨細(xì)胞的標(biāo)記基因RUNX2, COL1A1,并且在機(jī)械力的作用下分泌Sclerostin,是體外研究骨細(xì)胞的理想模型。方法觀察機(jī)械力加載下細(xì)胞SOST基因和Sclerostin的表達(dá)變化以Saos2細(xì)胞株為研究對(duì)象,利用細(xì)胞加力儀對(duì)Saos2細(xì)胞施加牽張力,在加力0,1,2,4,6,12,24,48小時(shí)后,RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞SOST基因表達(dá)情況,ELISA檢測(cè)細(xì)胞液中Sclerostin濃度變化。結(jié)果1.不同加力時(shí)間組Saos2細(xì)胞SOST基因表達(dá)變化以不加力組為對(duì)照組(即加力0h組),可見(jiàn)不加力組的Saos2細(xì)胞有SOST基因表達(dá)；在加載了機(jī)械牽張力以后,SOST基因表達(dá)發(fā)生變化,呈現(xiàn)先降后升的總體趨勢(shì)：加力1h時(shí)即出現(xiàn)明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；并于加力6h時(shí)降到最低,達(dá)到波谷(p0.01)；加力12h時(shí)表達(dá)開(kāi)始升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),但仍低于對(duì)照組的表達(dá)水平(p0.01)；直至加力48h時(shí),SOST相對(duì)表達(dá)量升高至對(duì)照組水平(p0.05)。2.不同加力時(shí)間組細(xì)胞培養(yǎng)液中Sclerostin表達(dá)變化與Real-time結(jié)果相似,以不加力組為對(duì)照組(即加力Oh組),可見(jiàn)不加力組的Saos2細(xì)胞培養(yǎng)液中有Sclerostin蛋白；在加載了機(jī)械牽張力以后,Sclerostin蛋白濃度發(fā)生變化,同樣呈現(xiàn)先降后升的總體趨勢(shì)：加力1h時(shí)開(kāi)始降低,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)；加力4h和6h時(shí),蛋白濃度低于其它組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01),但兩組之間未見(jiàn)明顯差異(p0.05,)；加力12h時(shí)表達(dá)開(kāi)始升高,但仍低于對(duì)照組的表達(dá)水平(p0.01)；加力48h時(shí)相對(duì)表達(dá)量升高至對(duì)照組水平(p0.05)。結(jié)論1. Saos2細(xì)胞在機(jī)械力的作用下,隨著加力時(shí)間的不同,SOST的表達(dá)有明顯的變化,表明骨細(xì)胞參與了牙齒移動(dòng)過(guò)程中的骨重塑,并且在完善正畸牙齒移動(dòng)的機(jī)制中具有重要意義。2.機(jī)械力可使骨細(xì)胞SOST及蛋白的表達(dá)降低,表達(dá)量在4h-6h達(dá)到低谷,隨后逐漸升高至正常水平；表明骨細(xì)胞可對(duì)力學(xué)刺激作出快速的、一過(guò)性的短暫表達(dá)反應(yīng)。從細(xì)胞水平證實(shí)骨細(xì)胞參與了牙齒移動(dòng)過(guò)程的骨重塑。3.此研究有助于更好地理解牙齒移動(dòng)中的骨重塑。
【關(guān)鍵詞】：骨重塑 Saos2細(xì)胞 Sclerostin 機(jī)械應(yīng)力 牙齒移動(dòng)
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R783.5
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 符號(hào)說(shuō)明12-13
• 前言13-16
• 材料與儀器16-19
• 實(shí)驗(yàn)方法與步驟19-27
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-28
• 討論28-31
• 結(jié)論31-32
• 附圖表32-36
• 參考文獻(xiàn)36-41
• 致謝41-42
• 病例42-54
• 附件54

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 趙紅斌;周煥發(fā);曹敏麗;馬慧;高明;;不同周期性應(yīng)變對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞形態(tài)變化的影響[J];生物醫(yī)學(xué)工程研究;2009年03期

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本文編號(hào)：684536