本文關(guān)鍵詞：氨基等離子體表面活化改性純鈦種植體的細(xì)胞毒性和遺傳毒性研究

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【摘要】：目的與背景： 骨整合（Osseointegration）即種植體和骨組織之間直接相連，其界面沒(méi)有軟組織連接，該理念既為現(xiàn)代種植學(xué)奠定了生物學(xué)基礎(chǔ)，又是評(píng)價(jià)種植義齒是否成功的臨床金標(biāo)準(zhǔn)。然而，作為惰性金屬，純鈦本身的生物活性并不強(qiáng)，并且不具有局部誘導(dǎo)成骨能力，近年來(lái)，通過(guò)對(duì)純鈦及鈦合金種植體進(jìn)行表面改性處理，可以有效提高純鈦的生物活性，進(jìn)而增強(qiáng)種植體的骨整合強(qiáng)度，并縮短種植體的骨愈合時(shí)間。如何找尋一種也在近幾年成為了學(xué)者們關(guān)注熱點(diǎn)問(wèn)題。 本課題組前期采用低溫等離子體，將氨基引入純鈦表面，并探究了該種植體的理化性質(zhì)及生物活性，前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示：氨基等離子體活化改性的純鈦表面可以促進(jìn)成骨細(xì)胞在其表面的早期增殖和粘附，對(duì)成骨細(xì)胞的礦化有著促進(jìn)作用，并且可以促進(jìn)羥基磷灰石在其表面的沉積。種種結(jié)果表明：氨基等離子體表面活化改性可以提升純鈦的生物活性，該種表面處理的種植體有促進(jìn)局部骨再生，提升骨整合效果及速度的能力。 ISO-10993-3-2009及ISO-10993-5-2009標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：進(jìn)入體腔內(nèi)30天的生物材料，必須評(píng)價(jià)其遺傳毒性及細(xì)胞毒性。探究該種表面處理的材料是否可以作為牙種植體長(zhǎng)期留存在體內(nèi)，對(duì)其遺傳毒性及細(xì)胞毒性的評(píng)價(jià)勢(shì)在必行。 方法： 本實(shí)驗(yàn)采用低溫射頻等離子體方法，以庚氨為單體氨基源，將具有生物活性的氨基功能圖案引入純鈦表面，根據(jù)前期實(shí)驗(yàn)，選定了相對(duì)最佳的放電處理參數(shù)：CW、P(30%)、CW+P(30%)三個(gè)實(shí)驗(yàn)組，其中，CW表示連續(xù)波處理模式，P表示脈沖處理模式。將陰性對(duì)照組選擇為打磨拋光后未處理的純鈦組。將各組鈦片與MC3T3-E1細(xì)胞共培養(yǎng)24小時(shí)后，通過(guò)CCK-8實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)各實(shí)驗(yàn)組鈦片的細(xì)胞毒性，聯(lián)合應(yīng)用SCGE及微核實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)各實(shí)驗(yàn)組鈦片的遺傳毒性，通過(guò)SCGE評(píng)價(jià)各實(shí)驗(yàn)組鈦片對(duì)成骨細(xì)胞DNA造成損傷的水平，通過(guò)微核實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)各實(shí)驗(yàn)組鈦片對(duì)成骨細(xì)胞染色體及染色體組的損傷。通過(guò)SPSS軟件將各實(shí)驗(yàn)組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果： 1：CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果:各實(shí)驗(yàn)組試件對(duì)成骨細(xì)胞均不會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性，不會(huì)抑制細(xì)胞在其表面的增殖； 2.SCGE結(jié)果：各實(shí)驗(yàn)組彗星電泳的圖像參數(shù)中，彗星尾長(zhǎng)(Tail length)，尾強(qiáng)(Tail Intensity)，尾矩(Tail Moment)與純鈦陰性對(duì)照組無(wú)明顯差異；提示各實(shí)驗(yàn)組，相對(duì)于純鈦，不會(huì)對(duì)成骨細(xì)胞造成DNA原始損傷，，不會(huì)產(chǎn)生更多的DNA斷裂碎片； 3.微核實(shí)驗(yàn)結(jié)果：微核染色結(jié)果提示：各實(shí)驗(yàn)組的微核形成率，染色體小泡及染色質(zhì)芽形成率與純鈦陰性對(duì)照組無(wú)明顯差異。提示各實(shí)驗(yàn)組相比于純鈦，不會(huì)對(duì)成骨細(xì)胞造成染色體及染色體組畸變，對(duì)分裂中期的紡錘體也不存在毒性。 結(jié)論： 1：氨基等離子體活化的純鈦表面無(wú)細(xì)胞毒性，提示該處理方式的純鈦不會(huì)抑制成骨細(xì)胞的生長(zhǎng)； 2.氨基等離子活化的純鈦表面對(duì)成骨細(xì)胞造成的DNA原始損傷與清潔拋光后的純鈦相同； 3.氨基等離子體活化的純鈦表面不會(huì)對(duì)成骨細(xì)胞造成相對(duì)于純鈦額外的染色體損傷及染色體損傷，對(duì)分裂中期的紡錘體極著絲粒也不存在毒性。 4.實(shí)驗(yàn)提示氨基等離子體活化的純鈦不具有細(xì)胞毒性及遺傳毒性，該種種植體具有良好生物安全性，肯定了其將來(lái)應(yīng)用于臨床的可能性，并為其提供了理論支持。
【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R783.1
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 英文縮寫對(duì)照表9-12
• 第1章 引言12-24
• 1.1 研究背景12-14
• 1.2 遺傳毒性實(shí)驗(yàn)在評(píng)價(jià)口腔材料生物安全性方面的應(yīng)用14-24
• 第2章 實(shí)驗(yàn)材料24-28
• 2.1. 耗材與試劑24-25
• 2.2. 主要實(shí)驗(yàn)儀器25-26
• 2.3. 試劑的配制26-28
• 第3章 實(shí)驗(yàn)方法28-36
• 3.1. 鈦片的準(zhǔn)備28
• 3.2. 氨基等離子提表面活化改性28-29
• 3.3. MC3T3-E1 細(xì)胞的培養(yǎng)29-30
• 3.4. CCK-8 法評(píng)價(jià)樣品的細(xì)胞毒性30
• 3.5. 單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)(SCGE)評(píng)價(jià)樣品的遺傳毒性30-33
• 3.6. 微核實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)樣品的遺傳毒性33-35
• 3.7. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析35-36
• 第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果36-45
• 4.1. CCK-8 評(píng)價(jià)氨基等離子體表面活化純鈦的細(xì)胞毒性36-37
• 4.2. 單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)氨基等離子表面活化純鈦的遺傳毒性37-42
• 4.3. 微核試驗(yàn)評(píng)價(jià)氨基等離子體表面處理純鈦種植體的遺傳毒性42-45
• 第5章 結(jié)論45-51
• 第6章 討論51-53
• 參考文獻(xiàn)53-66
• 作者簡(jiǎn)介及科研成果66-68
• 致謝68-70

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