促進牙髓干細胞(dental pulp stem cells,DPSCs)分化與極化是組織工程牙再生的重要研究內(nèi)容。在牙本質(zhì)再生研究中,DPSCs的分化與極化決定了再生牙本質(zhì)的組織結(jié)構(gòu),進而影響再生牙本質(zhì)發(fā)揮機械性能和傳導刺激信號等生理功能。目前尚缺乏有效促進DPSCs分化與極化的牙本質(zhì)再生生物材料。在組織工程研究中,材料的微觀形貌在調(diào)控種子細胞的生物學行為并影響再生組織的組織結(jié)構(gòu)中發(fā)揮重要作用。具有管狀微結(jié)構(gòu)的材料因含有開放的通道并能誘導種子細胞生長和分化而被用于再生具有相似結(jié)構(gòu)的組織。牙本質(zhì)是一種含有密集排列的天然管狀結(jié)構(gòu)(牙本質(zhì)小管)的硬組織,研究其管狀結(jié)構(gòu)在生理環(huán)境下的功能及其對DPSCs形態(tài)和功能的影響,將有望以牙本質(zhì)為基礎(chǔ)形成具有調(diào)控種子細胞形態(tài)和功能的生物材料,進而對組織工程牙本質(zhì)再生產(chǎn)生重要意義。鑒于以上,在第二章中我們首先研究了生理環(huán)境下的牙本質(zhì)管狀結(jié)構(gòu)在促進修復性牙本質(zhì)形成中對藥物的傳導作用。實驗將負載攜帶人BMP2基因的重組腺病毒(AdCMV-hBMP2)明膠海綿置于大鼠磨牙近髓窩洞內(nèi),觀察牙本質(zhì)小管傳導AdCMV-hBMP2轉(zhuǎn)染牙髓細胞的能力以及促進修復性牙本質(zhì)...

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖2.1AdCMV-EGFP轉(zhuǎn)染大鼠牙髓1天和3天后綠熒光蛋白的表達

圖2.1AdCMV-EGFP轉(zhuǎn)染大鼠牙髓1天和3天后綠熒光蛋白的表達。2.4.2AdCMV-hBMP2轉(zhuǎn)染牙髓細胞促進修復性牙本質(zhì)形成取實驗組與對照組大鼠上頜骨，脫鈣并常規(guī)HE切片觀察。我們發(fā)現(xiàn)，在第7天時，實驗組磨牙髓腔側(cè)已經(jīng)形成薄層修復性牙本質(zhì)，其表面....

圖2.2轉(zhuǎn)染AdCMV-hBMP2和AdCMV-EGFP后髓腔內(nèi)形成修復性牙本質(zhì)的組織學表現(xiàn)

僅在牙本質(zhì)髓腔側(cè)表面小范圍內(nèi)形成了局灶性的修復性牙本質(zhì)（圖2.2A,E）。術(shù)后14天時，在實驗組中所形成的修復性牙本質(zhì)面積明顯增加，以窩洞制備區(qū)域?qū)?yīng)的髓角處最厚�？梢娧辣举|(zhì)小管形成，但數(shù)量較少，且排列紊亂（圖2.2D,H）。在對照組中，髓角處形成的修復性牙本質(zhì)也增多，....

圖2.3牙髓暴露時轉(zhuǎn)染AdCMV-hBMP2的大鼠牙髓表面修復性牙本質(zhì)形成情況

驗分別在第7天和第14天時通過HE切片觀察大鼠髓腔內(nèi)修復性牙本質(zhì)形成的面積和組織形態(tài)。在轉(zhuǎn)染第7天時，實驗組髓腔側(cè)已經(jīng)出現(xiàn)新生的修復性牙本質(zhì)層，這些牙本質(zhì)中含有成牙本質(zhì)細胞，為骨樣牙本質(zhì)。而對照組中僅在髓腔局部形成了少量修復性牙本質(zhì)。這提示所轉(zhuǎn)染的hBMP2已....

圖3.1第二代DPSCs形態(tài)觀察

3.2.10統(tǒng)計學分析本實驗數(shù)據(jù)按照均數(shù)±標準差形式表示，采用單因素方差分析法進行統(tǒng)計學分析，以P<0.05為具有統(tǒng)計學意義。3.3實驗結(jié)果3.3.1DPSCs培養(yǎng)與鑒定利用酶消化法聯(lián)合倒置貼壁法分離DPSCs，在組織培養(yǎng)24小時后于培養(yǎng)瓶底即可見少量單細胞....

本文編號：3978479