齲病是一種多因素引起的細(xì)菌感染性疾病，變形鏈球菌是其主要致病菌。葡聚糖結(jié)合蛋白是變形鏈球菌的主要致齲毒力因子之一，在細(xì)菌的黏附和聚集，促進(jìn)菌斑的形成中起著重要作用。免疫防齲是目前齲病預(yù)防研究的熱點(diǎn)之一�；蛞呙缡巧鲜兰o(jì)90年代發(fā)展起來(lái)的一種誘導(dǎo)免疫治療的新方法，與減毒活疫苗、滅活疫苗、重組亞單位疫苗等疫苗相比，它具有長(zhǎng)期穩(wěn)定表達(dá)抗原蛋白，在宿主體內(nèi)表達(dá)的蛋白與天然構(gòu)象更為接近，抗原性更強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。目前，基因疫苗免疫防齲僅限于對(duì)變形鏈球菌表面蛋白、葡糖基轉(zhuǎn)移酶、葡聚糖結(jié)合蛋白A的研究，關(guān)于利用葡聚糖結(jié)合蛋白B構(gòu)建防齲基因疫苗的研究國(guó)內(nèi)外還未見(jiàn)報(bào)道。已有的研究證實(shí)，葡聚糖結(jié)合蛋白B具有良好的免疫原性，但能否作為免疫防齲的候選基因疫苗，正是本研究所要解決的問(wèn)題。 本研究從變形鏈球菌S. mutans Ingbritt基因組DNA中克隆出gbpB的全長(zhǎng)編碼區(qū)基因片段，進(jìn)行原核表達(dá)，獲取大量純化蛋白，同時(shí)制備抗GbpB的特異性抗體；構(gòu)建GbpB的真核表達(dá)質(zhì)粒作為基因疫苗，通過(guò)不同途徑免疫動(dòng)物，觀察基因疫苗的免疫效果；通過(guò)建立定菌鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停^察了重組純化蛋白和基因疫苗的抑齲效果，充分說(shuō)明了...

【文章頁(yè)數(shù)】：99 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻(xiàn)回顧
實(shí)驗(yàn)研究
    第一部分 變形鏈球菌葡聚糖結(jié)合蛋白B基因的克隆和序列分析
    第二部分 變形鏈球菌葡聚糖結(jié)合蛋白B基因在原核和真核細(xì)胞中的表達(dá)
        實(shí)驗(yàn)一 變形鏈球菌葡聚糖結(jié)合蛋白B基因在大腸桿菌中的表達(dá)
        實(shí)驗(yàn)二 變形鏈球菌葡聚糖結(jié)合蛋白B的大量表達(dá)、純化和抗體制備
        實(shí)驗(yàn)三 變形鏈球菌葡聚糖結(jié)合蛋白B基因在COS-7細(xì)胞中的表達(dá)
    第三部分 基因防齲疫苗免疫動(dòng)物及抑齲實(shí)驗(yàn)研究
        實(shí)驗(yàn)一 基因防齲疫苗不同途徑免疫SD大鼠的實(shí)驗(yàn)研究
        實(shí)驗(yàn)二 防齲疫苗抑齲的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究
全文總結(jié)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷
發(fā)表論文



本文編號(hào)：3844588