牙齒是人體的重要器官。牙齒的正常發(fā)育也是頜面部正常發(fā)育的必要條件。牙齒發(fā)育缺陷以及齲病、牙周疾病、外傷、腫瘤等所造成的牙齒缺損、缺失對(duì)人體身體和心理健康都有嚴(yán)重的影響。牙齒缺失后無(wú)法在體內(nèi)自行修復(fù)再生,臨床多采用種植、義齒修復(fù)等手段恢復(fù)缺失牙形態(tài)與功能。隨著再生醫(yī)學(xué)的發(fā)展,牙齒組織工程再生研究雖取得了極大的進(jìn)展,但仍存在如何最大程度地誘導(dǎo)出種子細(xì)胞的成牙潛能、如何通過(guò)基因操控加速發(fā)育過(guò)程等問(wèn)題需要解決。牙齒的發(fā)育由上皮與間充質(zhì)的相互作用完成,Hedgehog信號(hào)通路是介導(dǎo)這一過(guò)程的其中一條信號(hào)通路。以小鼠為模式動(dòng)物的研究集中在Hedgehog信號(hào)通路在牙齒發(fā)育中的作用,發(fā)現(xiàn)該通路不僅參與調(diào)控牙齒早期發(fā)生,且在后期形態(tài)發(fā)生過(guò)程也有重要作用,但關(guān)于Hedgehog信號(hào)通路在牙齒再生中的作用沒(méi)有報(bào)道。哺乳類(lèi)模式動(dòng)物的局限性阻礙了對(duì)牙齒發(fā)育調(diào)控機(jī)制的深入研究。斑馬魚(yú)具有與哺乳動(dòng)物牙齒結(jié)構(gòu)和發(fā)育均有極大相似性的咽齒,同時(shí)具有活體成像追蹤和原位研究的優(yōu)勢(shì)。本課題組前期建立了轉(zhuǎn)基因魚(yú)Tg(dlx2b:Dendra2-NTR),利用Mtz/NTR系統(tǒng)構(gòu)建了咽齒體內(nèi)損傷再生模型。本課題在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照
中文摘要
英文摘要
前言
實(shí)驗(yàn)一 Hedgehog信號(hào)通路抑制后信號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)變化
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
                1.2.2.1 LB培養(yǎng)基的配制
                1.2.2.2 原位雜交相關(guān)溶液的配制
                1.1.2.3 其他溶液的配制
            1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            1.2.1 Total RNA的提取
            1.2.2 反轉(zhuǎn)錄制備c DNA
            1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)PCR
                1.2.3.1 rTaq PCR
                1.2.3.2 LA Taq PCR
            1.2.4 電轉(zhuǎn)感受態(tài)制備
            1.2.5 電轉(zhuǎn)
            1.2.6 質(zhì)粒篩選、擴(kuò)增及提取
                1.2.6.1 質(zhì)粒篩選
                1.2.6.2 質(zhì)粒擴(kuò)增
                1.2.6.3 質(zhì)粒提取
            1.2.7 DNA瓊脂糖凝膠電泳回收
            1.2.8 DNA連接(以PGEM-T為載體)
            1.2.9 PCR探針制備(Dig標(biāo)記)
            1.2.10 探針純化
            1.2.11 原位雜交
            1.2.12 藥物處理實(shí)驗(yàn)
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1 成功制備反義探針
            2.1.1 設(shè)計(jì)并合成探針引物
            2.1.2 合成探針
        2.2 Cya抑制Hedgehog信號(hào)通路后信號(hào)通路相關(guān)基因變化
    3 結(jié)論
實(shí)驗(yàn)二 Hedgehog信號(hào)通路抑制后斑馬魚(yú)咽齒標(biāo)記基因表達(dá)變化 .
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
            1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3 結(jié)論
實(shí)驗(yàn)三 Hedgehog信號(hào)通路抑制后斑馬魚(yú)咽齒發(fā)育情況
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
            1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3 結(jié)論
實(shí)驗(yàn)四 斑馬魚(yú)咽齒再生模型的進(jìn)一步探索
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3 結(jié)論
實(shí)驗(yàn)五 Hedgehog信號(hào)通路抑制后斑馬魚(yú)咽齒再生情況
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述1
文獻(xiàn)綜述2
    參考文獻(xiàn)
致謝
碩士期間發(fā)表的論文



本文編號(hào)：3790369