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RhoA/Rock通路對(duì)應(yīng)力調(diào)控脂多糖刺激的成骨細(xì)胞生長和分化的研究

發(fā)布時(shí)間:2023-01-29 08:50
  人的骨骼一生都處于不斷的改建過程中,當(dāng)受到外力刺激時(shí)骨骼會(huì)發(fā)生適應(yīng)性的變化,外力刺激可以促進(jìn)新骨的形成,包括臨床常見的牽張成骨、正畸牙齒移動(dòng)過程中牙槽骨的改建等。正畸牙齒移動(dòng)過程中,牙齒存在兩個(gè)主要的受力面,壓力面骨質(zhì)吸收,張力面骨質(zhì)增生,從而使牙齒移動(dòng)到目標(biāo)位置。在這一過程中,成骨細(xì)胞發(fā)揮了重要作用。臨床上,有許多牙周病患者需要通過正畸治療集中牙齒間隙,為后期修復(fù)治療做準(zhǔn)備。由于牙周病患者的牙周支持組織薄弱,因此在矯治過程中矯治力大小的控制尤為重要,機(jī)械應(yīng)力對(duì)骨組織的改建具有促進(jìn)作用,但是炎癥狀態(tài)下,骨骼改建的力學(xué)效應(yīng)更加復(fù)雜。有研究發(fā)現(xiàn)機(jī)械牽張力可通過RhoA/ROCK信號(hào)通路調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞的分化,但是,炎性環(huán)境下,機(jī)械牽張力對(duì)成骨細(xì)胞生長特性以及細(xì)胞內(nèi)RhoA/ROCK信號(hào)通路的影響尚不清楚。該實(shí)驗(yàn)在實(shí)驗(yàn)組前期研究結(jié)果的基礎(chǔ)上,以1ug/ml Pg-LPS(牙齦卟啉單胞菌來源的脂多糖)刺激小鼠成骨樣細(xì)胞(MC3T3-E1),模擬建立體外口腔炎性環(huán)境,應(yīng)用Flex-cell 5000應(yīng)力加載系統(tǒng)給成骨細(xì)胞施加8%牽張應(yīng)力刺激,觀察細(xì)胞的生長情況,通過RT-PCR、Western bl... 

【文章頁數(shù)】:58 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
第一章 緒論
    1.1 牙周病炎癥因子與成骨細(xì)胞的相互作用
        1.1.1 牙周病與炎癥因子
        1.1.2 炎癥因子與成骨破骨作用
    1.2 機(jī)械應(yīng)力對(duì)成骨細(xì)胞的調(diào)控作用
        1.2.1 細(xì)胞應(yīng)力加載模式
        1.2.2 成骨細(xì)胞力學(xué)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)信號(hào)通路
        1.2.3 應(yīng)力刺激與成骨細(xì)胞RhoA/ROCK的關(guān)系
第二章 機(jī)械牽張力對(duì)Pg-LPS誘導(dǎo)下成骨細(xì)胞生長的影響
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 Pg-LPS工作液的配置
        2.2.3 Cell Counting Kit-8(CCK-8)法檢測牽張應(yīng)力對(duì)Pg-LPS刺激下成骨細(xì)胞增殖活性的響
        2.2.4 Hoechst33258 染色觀察械牽張力對(duì)Pg-LPS誘導(dǎo)下成骨細(xì)胞凋亡的影響
        2.2.5 鬼筆環(huán)肽Phalloidin-TRITC染色觀察牽張應(yīng)力對(duì)Pg-LPS刺激下成骨細(xì)胞骨架的影響
        2.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 機(jī)械牽張力對(duì)Pg-LPS刺激下成骨細(xì)胞活性的影響
        2.3.2 機(jī)械牽張力對(duì)Pg-LPS刺激下成骨細(xì)胞凋亡的影響
        2.3.3 機(jī)械牽張力對(duì)Pg-LPS刺激下成骨細(xì)胞骨架的影響
    2.4 討論
第三章 牽張應(yīng)力對(duì)LPS刺激下成骨細(xì)胞內(nèi)RhoA、ROCK、Runx-2表達(dá)的影響
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.2 牽張應(yīng)力加載Pg-LPS、C3 處理的成骨細(xì)胞
        3.2.3 細(xì)胞蛋白的提取
        3.2.4 蛋白免疫印跡
        3.2.5 提取細(xì)胞總RNA
        3.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶反應(yīng)
        3.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.3 結(jié)果
    3.4 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間的研究成果
致謝
臨床病例



本文編號(hào):3732688

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