目的:觀察血小板衍生生長因子BB（platelet derived growth factor BB, PDGFBB）基因修飾人牙周膜干細胞（human periodontal stem cells, h PDLSCs）的生物學特性,探討PDGFBB對hPDLSCs細胞增殖、遷移及誘導成骨的影響。方法:分離并擴增h PDLSCs,免疫熒光染色鑒定細胞表面標志和成骨誘導分化能力。通過慢病毒載體介導PDGFBB基因轉(zhuǎn)染hPDLSCs,轉(zhuǎn)染后,采用CCK-8及劃痕實驗檢測其對細胞增殖、遷移的影響。利用實時熒光定量PCR分析PDGFBB基因轉(zhuǎn)染后hPDLSCs細胞內(nèi)成骨相關基因和成血管相關基因VEGF mRNA的表達水平。采用SPSS 22.0軟件包對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。結(jié)果:采用組織塊培養(yǎng)及有限稀釋法成功獲得hPDLSCs。PDGFBB轉(zhuǎn)染hPDLSCs后,細胞形態(tài)良好,與空病毒組和未轉(zhuǎn)染組相比,轉(zhuǎn)染組細胞增殖及遷移能力顯著上升,OPN、COL-1和VEGF mRNA表達水平顯著上調(diào)（P＜0.05）。結(jié)論:慢病毒載體能在體外將PDGFBB基因轉(zhuǎn)入hPDLSCs,獲得持續(xù)、穩(wěn)定表達。PDGFB... 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與儀器
    1.2 人牙周膜干細胞的培養(yǎng)和鑒定
        1.2.1 hPDLSCs分離、培養(yǎng)及克隆篩選
        1.2.2 hPDLSCs表面標志物鑒定
        1.2.3 hPDLSCs成脂分化能力檢測
    1.3 PDGFBB慢病毒轉(zhuǎn)染人牙周膜干細胞及分組
        1.3.1 細胞增殖實驗
        1.3.2 劃痕實驗分析細胞遷移能力
        1.3.3實時熒光定量PCR檢測3組細胞VEGF、OPN、COL-1和OCN的m RNA表達水平
        1.3.4 3組牙周膜干細胞成骨分化能力檢測
    1.4 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果
    2.1 人牙周膜干細胞分離、培養(yǎng)、鑒定和克隆形成實驗結(jié)果
    2.2 人牙周膜干細胞成脂分化結(jié)果
    2.3 PDGFBB慢病毒轉(zhuǎn)染人牙周膜干細胞結(jié)果
    2.4 PDGFBB基因轉(zhuǎn)染后細胞增殖能力檢測結(jié)果
    2.5 PDGFBB基因修飾促進h PDLSCs遷移
    2.6 PDGFBB基因轉(zhuǎn)染后促進h PDLSCs細胞成骨相關基因OPN、OCN、COL-1和成血管相關基因VEGF的表達
    2.7 慢病毒轉(zhuǎn)染前、后人牙周膜干細胞成骨能力比較
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3727748