目的：研究不同濃度β-glycerophosphate對DPSCs向成牙本質細胞分化的影響；探討在不同時間點，分化成熟相關蛋白DSP和MEPE在不同濃度β-glycerophosphate誘導下表達的變化，從而找到誘導DPSCs分化的最佳β-glycerophosphate濃度。 方法：分離培養(yǎng)人DPSCs，免疫熒光法檢測干細胞特異性抗體STRO-1的表達；用不同的誘導液誘導DPSCs分別向脂肪細胞，神經(jīng)細胞，成骨細胞分化，證實其多向分化能力。向脂肪細胞誘導3周后行油紅染色，神經(jīng)向誘導后檢測nestin表達是否陽性，向成骨細胞誘導21天用AlizarinRedS檢測礦化結節(jié)形成情況；用四種濃度的β-glycerophosphate及不含β-glycerophosphate的礦化誘導培養(yǎng)液培養(yǎng)DPSCs，MTT法檢測四種濃度的β-glycerophosphate對細胞增殖是否有抑制作用；分別在第7，14，21，28天提取各組細胞蛋白，Westernblot檢測MEPE和DSP的表達情況。培養(yǎng)至28天時，AlizarinRedS礦化結節(jié)染色，CPC提取法比較各組形成礦化結節(jié)的量。 ... 

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【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
1、文獻綜述
    1.1 細胞外基質磷酸糖蛋白（MEPE）
        1.1.1 MEPE 的分子結構
        1.1.2 MEPE 在骨發(fā)生上的研究現(xiàn)狀
        1.1.3 與牙形成相關的 MEPE7
        1.1.4 不同培養(yǎng)條件下的 MEPE 表達
    1.2 牙本質涎磷蛋白（ DSPP ）
    1.3 DPSCs 向成牙本質細胞的分化及礦化
    1.4 牙本質形成
    1.5 小結
2、前言
3、材料與方法
    3.1 實驗準備
        3.1.1 取材
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要儀器設備
        3.1.4 試劑的配制
    3.2 實驗方法
        3.2.1 分離培養(yǎng)人 DPSCs
        3.2.2 傳代培養(yǎng) DPSCs
        3.2.3 免疫熒光染色鑒定 DPSCs
        3.2.4 DPSCs 多向分化能力
        3.2.5 不同濃度β- glycerophosphate 誘導 DPSCs 向成牙本質細胞的分化
        3.2.6 細胞毒性分析
        3.2.7 Western blot 分析
        3.2.8 礦化誘導及定量
        3.2.9 數(shù)據(jù)分析
4、結果
    4.1 細胞培養(yǎng)
        4.1.1 分離培養(yǎng)人牙髓干細胞
        4.1.2 礦化誘導
    4.2 體外鑒定 DPSCs 多向分化能力及免疫顯型
    4.3 細胞毒性分析
    4.4 DPSCs 分化過程中的蛋白表達
    4.5 礦化分析
5、討論
6、結論
8、參考文獻
研究成果



本文編號：3715796