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糞腸球菌脂磷壁酸及TLR2激動劑對MG-63細(xì)胞NF-κB表達(dá)影響的研究

發(fā)布時間:2022-04-23 12:34
  目的:體外研究糞腸球菌脂磷壁酸及TLR2激動劑對人成骨肉瘤MG-63細(xì)胞中NF-κB表達(dá)水平的影響。方法:10μg/ml TLR2激動劑Pam3CSK4作用于體外培養(yǎng)的MG-63細(xì)胞48h后,以100μg/ml糞腸球菌脂磷壁酸分別處理24h和48h,對照組MG-63細(xì)胞未經(jīng)任何處理,分別培養(yǎng)24h和48h。以細(xì)胞裂解液提取細(xì)胞總蛋白并進(jìn)行各個樣本的蛋白質(zhì)定量。以蛋白印跡技術(shù)檢測糞腸球菌脂磷壁酸和Pam3CSK4作用于MG-63細(xì)胞不同時間后NF-κB表達(dá)水平的變化。用Bio-Rad圖像分析系統(tǒng)對目的條帶進(jìn)行掃描成像,應(yīng)用GelPro軟件進(jìn)行條帶分析,將各組NF-κB條帶的光密度值分別與內(nèi)參條帶的光密度值進(jìn)行比較,以二者的比值代表目的蛋白相對表達(dá)水平。結(jié)果:1.糞腸球菌脂磷壁酸處理MG-63細(xì)胞24h后,實驗組NF-κB的表達(dá)水平高于對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義;但Pam3CSK4對NF-κB的表達(dá)水平?jīng)]有明顯影響,糞腸球菌脂磷壁酸/Pam3CSK4組和糞腸球菌脂磷壁酸組的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。2.糞腸球菌脂磷壁酸處理MG-63細(xì)胞48h后,實驗組NF-κB的表達(dá)水平依然高于對照組,差異具有統(tǒng)... 

【文章頁數(shù)】:48 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
材料和方法
    1. 材料
        1.1 實驗儀器
        1.2 實驗試劑
        1.3 實驗試劑配方
    2. 方法
        2.1 MG-63 細(xì)胞的培養(yǎng)、傳代、凍存及復(fù)蘇
        2.2 LTA 和 Pam3CSK4 作用于 MG-63 細(xì)胞
        2.3 細(xì)胞蛋白的
        2.4 蛋白質(zhì)定量
        2.5 蛋白質(zhì)表達(dá)變化的測定和分析
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝



本文編號:3647185

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