目的:探究表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）對牙源性角化囊腫（OKC）上皮細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其可能的分子機(jī)制。方法:采用冷酶消化法,從牙源性角化囊腫囊壁組織分離得到上皮細(xì)胞,在角化細(xì)胞無血清培養(yǎng)基中進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)。免疫熒光染色法鑒定原代上皮細(xì)胞表面標(biāo)志物廣譜角蛋白（CK）、角蛋白10（CK10）、角蛋白14（CK14）以及間充質(zhì)細(xì)胞表面標(biāo)志物波形蛋白（Vimentin）。分別用0、20、40、80、160、320μmol/L EGCG溶液處理細(xì)胞24、48、72 h,CCK-8法檢測各組細(xì)胞的增殖率。實(shí)驗(yàn)分組設(shè)計(jì)為對照組（0μmol/L）,EGCG低、中、高濃度組（20、160、320μmol/L）,分別處理細(xì)胞48 h,流式細(xì)胞術(shù)PI單染色法檢測各組細(xì)胞周期分布情況;FITC-Annexin V/PI雙染色法檢測細(xì)胞凋亡情況。實(shí)時熒光定量PCR、Western免疫印跡法檢測各組細(xì)胞Wnt/JNK信號通路關(guān)鍵蛋白FZD3和JNK3的表達(dá)。以正常人口腔角質(zhì)細(xì)胞（HOKs）作為對照。采用SPSS 22.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:牙源性角化囊腫上皮細(xì)胞可在體外成功培養(yǎng)并傳代至... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第一章 材料與方法
    1.1 組織及細(xì)胞來源
    1.2 材料及試劑
    1.3 試劑配制及儲存
    1.4 儀器設(shè)備
    1.5 OKC上皮細(xì)胞原代和傳代培養(yǎng)
    1.6 HOK細(xì)胞復(fù)蘇和傳代培養(yǎng)
    1.7 免疫熒光染色鑒定
    1.8 CCK-8 實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖
    1.9 流式細(xì)胞術(shù)PI單染色檢測細(xì)胞周期分布
    1.10 FITC-Annexin V/PI雙染色檢測細(xì)胞凋亡
    1.11 實(shí)時熒光定量PCR檢測mRNA表達(dá)
    1.12 Western免疫印跡檢測蛋白表達(dá)
    1.13 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第二章 結(jié)果
    2.1 OKC上皮細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點(diǎn)
    2.2 OKC上皮細(xì)胞免疫熒光染色鑒定
    2.3 EGCG對細(xì)胞增殖的影響
    2.4 EGCG對細(xì)胞周期的影響
    2.5 EGCG對細(xì)胞凋亡的影響
    2.6 Wnt信號通路相關(guān)蛋白FZD3和JNK3在OKC上皮細(xì)胞中高表達(dá)
    2.7 EGCG下調(diào)FZD3和JNK3 的表達(dá)
第三章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
附錄 (20例臨床病例)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]EGCG阻斷FZD3和MAPK10基因表達(dá)調(diào)控頜骨牙源性角化囊性瘤轉(zhuǎn)歸[J]. 楊銀輝,王耀鐘,袁榮濤,賈暮云,林錫江.  口腔醫(yī)學(xué). 2017(05)
[2]EGCG開窗灌洗治療頜骨牙源性角化囊性瘤的臨床療效[J]. 楊銀輝,袁榮濤,孔麗,王科,賈暮云.  口腔醫(yī)學(xué). 2016(09)
[3]牙源性角化囊性瘤惡變1例[J]. 許來青,鄭廣寧,羅晶晶,吳紅兵,劉媛媛,郭文豪.  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2015(06)
[4]Wnt信號通路相關(guān)基因在頜骨牙源性角化囊性瘤中的表達(dá)及意義[J]. 孔麗,王炳超,袁榮濤,賈暮云,王科.  上�？谇会t(yī)學(xué). 2015(01)
[5]開窗減壓術(shù)治療頜骨巨大囊性病變的臨床研究[J]. 辛俊彤,袁榮濤,卜令學(xué),賈暮云,李寧毅.  口腔醫(yī)學(xué). 2011(04)
[6]Identification of Known and Novel PTCH Mutations in Both Syndromic and Non-syndromic Keratocystic Odontogenic Tumors[J]. Shuang Pan,Li-li Xu,Li-sha Sun,Tie-jun Li* Department of Oral Pathology,Peking University School and Hospital of Stomatology,Beijing,China.  International Journal of Oral Science. 2009(01)
[7]人口腔黏膜角化上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究[J]. 胡秀蓮,王興,林野,邱立新.  中國口腔頜面外科雜志. 2004(03)



本文編號：3633535