研究背景:熱療（Hyperthermia,HT）較常規(guī)外科手術(shù)和放、化療不僅具有保護(hù)正常組織結(jié)構(gòu)、提高患者生存質(zhì)量的優(yōu)勢(shì),還能通過逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）過程從而降低惡性腫瘤的術(shù)后復(fù)發(fā)率及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率。然而,單獨(dú)使用熱療治療腫瘤的效果不佳,臨床上通常將熱療與外科手術(shù)、放療、化療和分子靶向治療相結(jié)合而增強(qiáng)其療效,其中腫瘤分子靶向治療近年來成為腫瘤綜合療法的研究熱點(diǎn)。研究目的:本課題嘗試以分子靶向治療的方式抑制促癌基因DNA結(jié)合分化抑制因子-1（Id-1）的表達(dá),再與熱療進(jìn)行聯(lián)合配伍,探索兩者聯(lián)用于舌鱗癌治療的可能性,特別是觀察研究熱療及沉默Id-1基因作用于舌鱗癌細(xì)胞后,能否逆轉(zhuǎn)細(xì)胞的EMT過程,并初步探討兩者聯(lián)用作用于舌鱗癌細(xì)胞EMT的分子機(jī)制。研究方法:1.選取適宜本課題的舌鱗癌細(xì)胞株。實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SCC4、SCC9、SCC25和CAL-27 4株舌鱗癌細(xì)胞中Id-1 mRNA的表達(dá)水平,選取其中Id-1 mRNA表達(dá)量最高的細(xì)胞株作為本課題的研究細(xì)胞。2.驗(yàn)證siRNA沉默Id-1基因表達(dá)的能力... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

轉(zhuǎn)膜夾內(nèi)的排列順序Fig1Theorderinthetransmembraneclip

結(jié)果 實(shí)時(shí)定量 PCR 實(shí)驗(yàn)檢測(cè) 4 株舌鱗癌細(xì)胞中 Id-1 mRNA 的表達(dá)水平檢測(cè) 4 株舌鱗癌細(xì)胞中 Id-1 基因 mRNA 的表達(dá)水平，選擇 Id-1 mRNA 相對(duì)表平最高的細(xì)胞系進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。實(shí)時(shí)定量 PCR 結(jié)果顯示（見表 7 和圖 2），CAL-胞中 Id-1 mRNA 表達(dá)量明顯高于 SCC4 細(xì)胞、SCC9 細(xì)胞以及 SCC25 細(xì)胞，故舌鱗癌 CAL-27 細(xì)胞株用于本課題的后續(xù)研究細(xì)胞。表 7 4 株舌鱗癌細(xì)胞中 Id-1 mRNA 的表達(dá)水平比較Tab 7 Relative expression of Id-1 mRNAdetected by RT-PCR in four strain of STCCGroup Ct(Id-1) Ct(GAPDH) △Ct2-△△CtSCC4 30.17±0.45 14.72±0.12 15.45±0.36 0.3030±0.0798SCC9 30.44±0.66 14.49±0.15 15.95±0.58 0.2226±0.0930SCC25 30.30±0.46 14.43±0.41 15.88±0.80 0.2471±0.1501CAL-27 27.80±0.67 14.09±0.49 13.70±0.18 1.0030±0.1282

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文將 CAL-27 細(xì)胞隨機(jī)分為 3 組，分別為空白對(duì)照組（normal）、陰性對(duì)照組（N沉默 Id-1 組（Id-1-siRNA），通過實(shí)時(shí)定量 PCR 的檢測(cè)方法對(duì) siRNA 轉(zhuǎn)染 CAL-胞后 Id-1 的 mRNA 表達(dá)水平進(jìn)行測(cè)定（見表 8 和圖 3）。 Id-1-siRNA 組與空白組相比，Id-1 的 mRNA 表達(dá)水平下降 83.29%（P=0.0001）；Id-1-siRNA 組與 N相比，Id-1 的 mRNA 表達(dá)水平下降 70.39%（P=0.0003）；空白對(duì)照組和 NC 組，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.3011）。表 8 siRNA 轉(zhuǎn)染后細(xì)胞內(nèi) Id-1mRNA 的表達(dá)水平Tab 8 Relative expression of Id-1 mRNA after siRNA transfection of STCCGroup Ct(Id-1) Ct(GAPDH) △Ct2-△△Ctnormal 28.39±0.34 14.39±0.11 14.00±0.45 1.0298±0.1338NC 28.60±0.21 14.44±0.21 14.16±0.20 0.9008±0.1246Id-1-siRNA 30.77±0.19 14.42±0.14 16.35±0.20 0.1969±0.0257

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3619759