牙本質(zhì)涎蛋白（dentin sialoprotein，DSP）屬于牙本質(zhì)非膠原蛋白，占牙本質(zhì)非膠原蛋白的5％～8％，因與骨涎蛋白（bone sialoprotein，BSP）相似而得名。DSP富含谷氨酸（Glu）、天冬氨酸（Asp）、絲氨酸（Ser）和甘氨酸（Gly），由366個(gè)氨基酸組成，分子量約為53 000，含30％的碳水化合物和10％的涎酸，有6個(gè)潛在的糖基化位點(diǎn)和13個(gè)潛在的磷酸化位點(diǎn)。DSP的功能尚不清楚，考慮到DSP在成牙本質(zhì)細(xì)胞中有陽(yáng)性表達(dá)，并在前成釉細(xì)胞中有一過(guò)性表達(dá)，推測(cè)DSP可作為成牙本質(zhì)細(xì)胞和相關(guān)細(xì)胞的標(biāo)記物，并可能在上皮和間充質(zhì)之間充當(dāng)信號(hào)分子，參與成牙本質(zhì)細(xì)胞分化。 一、人牙本質(zhì)涎蛋白的基因克隆、表達(dá)、多抗制備和組織表達(dá)研究 克隆hDSP成熟肽編碼區(qū)基因片段并進(jìn)行原核表達(dá)，用異硫氰酸胍一步法從人牙乳頭組織中抽提總RNA，再用Oligo（dt）作引物逆轉(zhuǎn)錄合成牙乳頭cDNA，然后用RT-PCR法，從cDNA中擴(kuò)增出hDSP基因片段（約600bp），將所得基因片段插入pBluescript質(zhì)粒載體，轉(zhuǎn)化到大腸桿菌XL1-Blue后，挑選陽(yáng)性克隆，提取... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：100 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略語(yǔ)表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻(xiàn)回顧
第一部分 人牙本質(zhì)涎蛋白的基因克隆、表達(dá)、多抗制備和組織表達(dá)研究
    實(shí)驗(yàn)一 人牙本質(zhì)涎蛋白的基因克隆和序列分析
    實(shí)驗(yàn)二 人牙本質(zhì)涎蛋白在大腸桿菌中的表達(dá)和純化
    實(shí)驗(yàn)三 抗人牙本質(zhì)涎蛋白抗體的制備和組織表達(dá)研究
第二部分 人牙本質(zhì)涎蛋白全長(zhǎng)基因表達(dá)載體的構(gòu)建和真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    實(shí)驗(yàn)一 人牙本質(zhì)涎蛋白真核表達(dá)載體的構(gòu)建
    實(shí)驗(yàn)二 用COS-7細(xì)胞表達(dá)人牙本質(zhì)涎蛋白基因
第三部分 人牙本質(zhì)涎蛋白的功能研究
    實(shí)驗(yàn)一 人牙本質(zhì)涎蛋白在人牙胚發(fā)育中的表達(dá)和意義
    實(shí)驗(yàn)二 人牙本質(zhì)涎蛋白對(duì)體外培養(yǎng)的人牙乳頭間充質(zhì)細(xì)胞增殖和堿性磷酸酶的影響
    實(shí)驗(yàn)三 人牙本質(zhì)涎蛋白對(duì)牙髓損傷修復(fù)影響的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究
全文總結(jié)
致謝
簡(jiǎn)歷、發(fā)表論文
附圖



本文編號(hào)：3572056