背景和目的:Nell-1（Nel-like 1）是一種新型信號分子,它在成骨細胞分化、骨形成及骨再生過程中起到重要的正調(diào)控作用。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),Nell-1可以促進成牙本質(zhì)細胞分化、牙本質(zhì)形成,促進牙髓干細胞神經(jīng)向分化。有研究顯示,臍靜脈內(nèi)皮細胞及牙髓干細胞共培養(yǎng)可以促進血管向分化。本課題旨在通過體內(nèi)及體外研究,檢測Nell-1是否在牙髓干細胞血管向分化過程中起調(diào)節(jié)作用。材料方法:1.人牙髓干細胞的分離、培養(yǎng)及鑒定從無齲壞、無根尖周病的智齒中分離獲得牙髓干細胞。利用流式細胞術(shù)來檢測牙髓干細胞表面的間充質(zhì)干細胞標記物及造血干細胞標記物的表達。通過成骨及成脂實驗來檢測其多向分化能力。2.將牙髓干細胞單獨培養(yǎng)或與臍靜脈內(nèi)皮細胞共培養(yǎng)時,Nell-1對其血管向分化的體外研究首先利用細胞免疫熒光技術(shù)檢測Nell-1在牙髓干細胞及臍靜脈內(nèi)皮細胞中的表達及分布情況。利用實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR,quantitative real-time polymerase chain reaction）、酶聯(lián)免疫吸附反應(yīng)（ELISA,enzyme-linked immunosorbe... 

【文章來源】：山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１牙髓細胞克隆形成能力檢測（ｘ４０）??單個牙髓細胞呈集落生長，由中心向四周放射生長??

圖２：?ＮｅＵ－丨對于ＤＰＳＣｓ、ＨＵＶＥＣｓ的增殖影響及亞細胞定位??Ａ－Ｂ：?ＣＣＫ－８?增殖實驗，５０、１００、２００ｎｇ／ｍｌＮｅｌｌ－ｌ?對于?ＤＰＳＣｓ?（Ａ）、ＨＵＶＥＣｓ（Ｂ）增殖未見明顯影響??Ｃ＿Ｊ：?Ｎｅｌｌ－１在ＤＰＳＣｓ、ＨＵＶＥＣｓ的定位，Ｎｅｌｌ－１在ＤＰＳＣｓ?（Ｅ）、ＨＵＶＥＣｓ（Ｉ）的細胞核中呈顆粒狀表達，??ＤＡＰＩ進行復(fù)染（Ｄ、Ｈ），組合Ｎｅｌｌ－１染色、ＤＡＰＩ染色圖片（Ｆ、Ｊ）?（＜２?

?山東大學碩士學位論文???Ａ?Ｂ??古?１．５－｜?｜??０?ｎｇ／ｍｌ?Ｎｅｌｌ－１?丄?？?＾?ｎｇ／ｍｌ?Ｎｅｌｌ－１??ｇ?５０?ｎｇ／ｍｌ?Ｎｅｌｌ－１?＊＊＊?５０?ｎｇ／ｍｌ?ＮｅｌＭ?了??〇?ｉ?ｉ?ｉ?＊?Ｓ?１?６－?１??％?１０?ｒ１！?ｒ＾ｌ?ｆ＾ｌ?［＊１！?Ｉ??Ｉ?１?：；?ｊ?Ｓ４－??ｓ?°－５＇?ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?？，??ｉ?．．．．．．１＾－?．１?Ｉ〇ｃｉ?ｒ：，ｉ?４?ｒｉｉ??＾?＾?＾?＾?＾?＾?＾?＾?＾?＾??Ｔｉｍｅ?Ｔｉｍｅ??Ｃ?Ｄ??ｊｃ?４－ｉ?］?０?ｎｇ／ｍｌ?Ｎｅｌｌ－１??ＧＡＰＤＨ?儀？?籲＾?編？?＾?＾?５０?ｎｇ／ｍｌ?Ｎｅｌ�。�??０＜ｘ＞＾?ｉ３－。１０—１１?＊ｉ??ｄａｙ１?ｄａｙ２?ｄａｙ３?｜?２?ｌｌ??Ｆｌｋ，?ｒｎｍｍ?ｍｍｍ?ｉ?ｒ｜｜?ｌｌ?．｜｜?ｉ＼ｍ??ＧＡＰＤＨ?■？孀ｉ?〇．Ｌ?．ｕｕ＿ＬＵ「：：，：�。蹋蹋�?ＩＵ．＿??ｗ，＇＇ｚ?ａ?ｙ?ｙ?ｚ?Ｚ??ｄａｙ７?ｄａｙ?１４?Ｔｉｍｅ??圖３：?ＤＰＳＣｓ組血管生成相關(guān)標志物的基因和蛋白表達。??５０ｎｇ／ｍ丨Ｎｅｌｌ－１在第３、７、Ｕ天促進ＶＥＧＦ基因表達，在第３、７天促進Ｆｌｋ－１基因表達。??５０和１００?ｎｇ／ｍｌＮｅｌｌ－ｌ在笫３、７天促進Ｆｌｋ－１蛋丨丨表達。??＊ｐ＜０．０５，?＊＊／７＜０．０１，＊＊＞＜０．００１，＊＊＊＊ｐ＜０．０００１??２５??

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3553531