目的:（1）體外培養(yǎng)人牙齦成纖維細(xì)胞,建立該細(xì)胞模型,為進(jìn)一步研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。（2）觀察不同濃度IL-1β和IL-6干預(yù)下,角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子（keratinocyte growth factor,KGF）在人牙齦成纖維細(xì)胞炎癥損傷過(guò)程中基因表達(dá)水平的變化,進(jìn)一步明確KGF在牙周病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中可能的作用。方法:（1）取液氮凍存的人牙齦成纖維細(xì)胞復(fù)蘇傳代培養(yǎng),并進(jìn)行形態(tài)學(xué)和免疫學(xué)鑒定,觀察凍存后復(fù)蘇的細(xì)胞性能,從而建立穩(wěn)定的體外細(xì)胞模型。（2）選擇生長(zhǎng)穩(wěn)定、形態(tài)良好的第5⁸代人牙齦成纖維細(xì)胞,分別用濃度為0ng/ml、0.1ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml的IL-1β和0ng/ml、0.1ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml的IL-6對(duì)人牙齦成纖維細(xì)胞進(jìn)行干預(yù),建立炎癥損傷的牙齦成纖維細(xì)胞模型,采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)法（RT-PCR）檢測(cè)KGF基因在各實(shí)驗(yàn)組的表達(dá)情況,利用醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行圖像分析及數(shù)據(jù)采集,然后運(yùn)用單因素方差分析方法,對(duì)不同濃度IL-1β及IL-6干預(yù)后的人... 

【文章來(lái)源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：43 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

復(fù)蘇后的細(xì)胞呈成纖維樣細(xì)胞形態(tài)×100Figure1:recoverycellswerefibroblast-likecells

圖 1：復(fù)蘇后的細(xì)胞呈成纖維樣細(xì)胞形態(tài)×100Figure 1: recovery cells were fibroblast-like cells圖 2：免疫學(xué)鑒定陰性對(duì)照組×250Figure 2: the negative control group×250圖 3：免疫學(xué)鑒定抗波絲蛋白抗體陽(yáng)性×250圖 4：免疫學(xué)鑒定抗角蛋白抗體陰性×250

附圖圖 1：復(fù)蘇后的細(xì)胞呈成纖維樣細(xì)胞形態(tài)×100Figure 1: recovery cells were fibroblast-like cells圖 2：免疫學(xué)鑒定陰性對(duì)照組×250Figure 2: the negative control group×250

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人牙齦成纖維細(xì)胞的原代培養(yǎng)及鑒定[J]. 崔娟,孫克勤,李霞,張華屏.  中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2010(03)
[2]人牙齦成纖維細(xì)胞與牙周膜細(xì)胞的生物活性[J]. 程遠(yuǎn),曾照芳,朱俊.  生物信息學(xué). 2009(01)
[3]人牙周膜細(xì)胞和牙齦成纖維細(xì)胞生物學(xué)活性的研究[J]. 王琨,許彥枝,朱曚曚.  牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2008(06)
[4]牙周病的研究進(jìn)展[J]. 王珊.  中國(guó)醫(yī)藥指南. 2008(09)
[5]兩種冠邊緣設(shè)計(jì)對(duì)齦溝液中IL-6和TNF-α表達(dá)的影響[J]. 武紅艷,何惠明,王忠義,張春寶,賈衛(wèi),翟強(qiáng).  牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2003(12)
[6]人牙齦成纖維細(xì)胞和牙周膜成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)和生物學(xué)特征[J]. 徐燕,李頌,程繼光,胡勇,王明麗.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2002(06)
[7]牙周治療前后齦溝液中白細(xì)胞介素-6水平的變化[J]. 吳亞菲,趙川江,張靜儀.  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2001(02)
[8]白介素1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究進(jìn)展[J]. 郭甫坤,吳曙光.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè)). 2001(01)
[9]牙齦溝液中白細(xì)胞介素-6含量與牙周炎關(guān)系的研究[J]. 吳亞菲,趙川江,張靜儀,黃萍.  華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2000(04)

碩士論文
[1]IL-1β/LPS誘導(dǎo)下人牙齦成纖維細(xì)胞表達(dá)TRAF6的研究[D]. 崔娟.山西醫(yī)科大學(xué) 2010
[2]重度牙周炎患者唾液中IL-6和TNF-α含量作為牙周炎分子診斷標(biāo)記物的可行性研究[D]. 耿衛(wèi)艷.第三軍醫(yī)大學(xué) 2009
[3]角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子（KGF）及其受體（KGFR）在口腔扁平苔蘚中的表達(dá)[D]. 王伶俐.山東大學(xué) 2007
[4]角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子（KGF）在口腔白斑和口腔鱗癌中的表達(dá)[D]. 顏世果.山東大學(xué) 2006



本文編號(hào)：3519255