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具核梭桿菌感染Tca8113舌鱗癌細胞發(fā)生DNA損傷并通過Ku70/p53途徑促進細胞增殖

發(fā)布時間:2021-11-04 19:09
  目的:近年來,研究發(fā)現(xiàn)牙周可疑致病菌感染與許多重要腫瘤相關(guān)。具核梭桿菌(Fusobacterium nucleatum,F.nucleatum)作為重要牙周病致病菌廣泛存在于口腔中,屬橙色復(fù)合體,梭桿菌屬,兼性厭氧菌,研究顯示F.nucleatum比口腔其他細菌更廣泛存在于身體其他器官,與呼吸系統(tǒng)疾病,肝膿腫,早產(chǎn)等疾病密切相關(guān)。細胞DNA損傷是細菌破壞基因組穩(wěn)定性和完整性,從而影響腫瘤細胞的遺傳改變的重要機制,其中真核細胞內(nèi)最常見的損傷為DNA雙鏈斷裂(DNA double-strand break,DSB),人類和高等真核生物中最常見的DSB的主要修復(fù)途徑是非同源重組修復(fù)(Non-homologous end joining,NHEJ),因此本文探討F.nucleatum感染口腔鱗癌細胞發(fā)生DNA雙鏈斷裂損傷后影響基因組的穩(wěn)定性和完整性,并對細胞增殖能力產(chǎn)生調(diào)控作用。通過檢測DSB標志因子γH2AX表達構(gòu)建F.nucleatum感染Tca8113舌鱗癌細胞DNA損傷模型,觀察細胞增殖和細胞周期的變化,進一步檢測NHEJ重要修復(fù)因子Ku70,抑癌因子wild p53,抑癌因子p27和... 

【文章來源】:中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】:62 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

具核梭桿菌感染Tca8113舌鱗癌細胞發(fā)生DNA損傷并通過Ku70/p53途徑促進細胞增殖


Westernblot檢測F.nucleatum感染Tca8113舌鱗癌細胞4h,γH2AX表達變化情況

損傷因子,免疫熒光法,時間點


圖 3.2 F.nucleatum 感染 Tca8113 舌鱗癌細胞 36h,γH2AX 表達變化情況A:Western blot 檢測γH2AX 的電泳圖,B:各組γH2AX 的灰度值柱狀圖。F.nucleatum(MOI=500)感染 Tca8113 舌鱗癌細胞 36h,損傷因子γH2AX 表達上調(diào)并呈現(xiàn)時間依賴性,且24h 顯著上調(diào),*表示與空白對照組相比 P<0.05;#表示與前一時間點相比 P<0.05。Western blot 結(jié)果發(fā)現(xiàn) 24h 時,損傷因子γH2AX 表達明顯增強,因此選取 24h時間點,運用免疫熒光法進一步驗證模型,結(jié)果顯示在 24h 時γH2AX 相比于空白對照組熒光強度明顯增強且數(shù)量明顯增加(見圖 3.3),進一步證明模型構(gòu)建成功。0h4h12h24h36h0.00.51.01.5grayscalevalue%ofγH2AX**#*AB

細胞周期,流式,時間點,細胞


atum 感染 Tca8113 舌鱗癌細胞 DNA 損傷模型內(nèi),各時間點 F.nucleatum 感染組細胞于空白對照組顯著增強,*表示與空白對照組相比細胞增殖率 P<0.05。cleatum 感染 Tca8113 舌鱗癌細胞發(fā)生 DNA 損傷并加速細胞 G1細胞于 S 期leatum 感染 Tca8113 舌鱗癌細胞 DNA 損傷模型內(nèi),進一步檢測細胞周期,見圖 3.6,3.7 和表 3.2),Tca8113 舌鱗癌細胞在 DNA 損傷模型內(nèi),各時各自空白對照組 G1 期細胞含量呈現(xiàn)下調(diào)狀態(tài)(P<0.05),而 S 期細胞 值)除在 36h 呈現(xiàn)少量下調(diào),其余時間點均呈上調(diào)狀態(tài)(P<0.05),說atum 感染 Tca8113 舌鱗癌細胞 DNA 損傷并調(diào)控細胞周期,使細胞阻滯于4h 12h 24h36h0h

【參考文獻】:
期刊論文
[1]淺談牙周病與呼吸道疾病之間的相關(guān)性[J]. 譚麗思,潘亞萍.  中國實用口腔科雜志. 2016(03)
[2]Abnormal DNA-PKcs and Ku 70/80 expression may promote malignant pathological processes in gastric carcinoma[J]. Wei Li,Chuan Xie,Zhen Yang,Jiang Chen,Nong-Hua Lu.  World Journal of Gastroenterology. 2013(40)
[3]Predictive role of XRCC5/XRCC6 genotypes in digestive system cancers[J]. Mei-Due Yang,Chia-Wen Tsai,Wen-Shin Chang,Yung-An Tsou,Cheng-Nan Wu,Da-Tian Bau.  World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2011(12)



本文編號:3476297

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