間歇/持續(xù)應(yīng)用PTH(1-34)對(duì)髁突軟骨細(xì)胞雙重效應(yīng)的研究
發(fā)布時(shí)間:2021-10-31 18:30
下頜骨不對(duì)稱畸形是最常見(jiàn)的顱頜面畸形之一,目前尚無(wú)一種最佳的治療方法。髁突軟骨內(nèi)成骨是哺乳動(dòng)物出生后其下頜骨主要的生長(zhǎng)發(fā)育方式,軟骨內(nèi)成骨有兩個(gè)重要的過(guò)程:軟骨細(xì)胞的增殖分化;及成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞等參與的骨形成。PTH是由甲狀旁腺分泌的,維持機(jī)體鈣磷代謝的重要激素之一。目前研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)PTH對(duì)骨形成具有雙重作用,但PTH是否對(duì)軟骨細(xì)胞的增殖分化也具有雙重調(diào)控作用尚不清楚。本研究通過(guò)下述三部分實(shí)驗(yàn),應(yīng)用免疫組化、細(xì)胞增殖檢測(cè)、ALP活性檢測(cè)、礦化結(jié)節(jié)染色和real-time PCR等方法,比較了間歇/持續(xù)應(yīng)用PTH刺激原代髁突軟骨細(xì)胞后其增殖、分化等方面的變化,為將來(lái)有可能應(yīng)用PTH調(diào)控髁突軟骨內(nèi)成骨,達(dá)到治療下頜骨不對(duì)稱畸形的目的,提供實(shí)驗(yàn)及理論依據(jù)。第一部分髁突軟骨細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定目的:探討髁突軟骨的分離培養(yǎng)方法,獲得具有良好增殖分化能力的髁突軟骨細(xì)胞。方法:取24h內(nèi)雌性新生大鼠,采用改良胰酶和Ⅱ型膠原酶聯(lián)合酶消化法分離髁突軟骨細(xì)胞,體外培養(yǎng)所分離的軟骨細(xì)胞。于軟骨細(xì)胞接種第3天,即爬片細(xì)胞剛開(kāi)始融合時(shí),及細(xì)胞培養(yǎng)第10天分別行Ⅱ膠原、Ⅹ膠原免疫組化染色。細(xì)胞活力分析儀計(jì)數(shù)儀...
【文章來(lái)源】:武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:128 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
引言
文獻(xiàn)綜述一 PTH對(duì)骨代謝雙重效應(yīng)的研究進(jìn)展
文獻(xiàn)綜述二 PTH, PTHrP和PTH/PTHrP受體在軟骨內(nèi)成骨中作用的研究進(jìn)展
實(shí)驗(yàn)研究
實(shí)驗(yàn)一 髁突軟骨細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定
材料和方法
結(jié)果
討論
附圖1
實(shí)驗(yàn)二 不同濃度PTH對(duì)髁突軟骨細(xì)胞作用的研究
材料和方法
結(jié)果
討論
附圖2
實(shí)驗(yàn)三 間歇/持續(xù)應(yīng)用PTH對(duì)髁突軟骨細(xì)胞增殖分化的影響
材料和方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
主要參考文獻(xiàn)
發(fā)表文章
個(gè)人簡(jiǎn)歷
致謝
本文編號(hào):3468637
【文章來(lái)源】:武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
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文獻(xiàn)綜述一 PTH對(duì)骨代謝雙重效應(yīng)的研究進(jìn)展
文獻(xiàn)綜述二 PTH, PTHrP和PTH/PTHrP受體在軟骨內(nèi)成骨中作用的研究進(jìn)展
實(shí)驗(yàn)研究
實(shí)驗(yàn)一 髁突軟骨細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定
材料和方法
結(jié)果
討論
附圖1
實(shí)驗(yàn)二 不同濃度PTH對(duì)髁突軟骨細(xì)胞作用的研究
材料和方法
結(jié)果
討論
附圖2
實(shí)驗(yàn)三 間歇/持續(xù)應(yīng)用PTH對(duì)髁突軟骨細(xì)胞增殖分化的影響
材料和方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
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