目的:探討MicroRNA-214-3p（miR-214-3p）通過β-連環(huán)蛋白/TCF-4信號通路對于牙囊細胞（DFCs）成骨分化中的影響。方法:通過雙向差速傳代法體外分離,培養(yǎng)與提純牙囊細胞,通過向DFCs中轉(zhuǎn)染miR-214模擬物（mimics）及抑制物（inhibitor）以此上調(diào)及下調(diào)DFCSs中的miR-214的表達。經(jīng)成骨誘導7天后,通過qRT-PCR、茜素紅染色、免疫蛋白印跡證明miR-214及相關(guān)成骨基因的表達變化,以及β-連環(huán)蛋白（β-catenin）/TCF-4通路相關(guān)蛋白的變化。結(jié)果:RT-qPCR結(jié)果顯示:（1）DFCs成骨誘導后miR-214的表達下降。（2）使用Lipo3000將miR-214mimics與inhibitor轉(zhuǎn)染進入DFCs可以相應上調(diào)及下調(diào)DFCs中miR-214的表達。（3）miR-214上調(diào)可使DFCs在成骨誘導過程中的成骨相關(guān)基因ALP（P<0.01）,OSN（P>0.05）,RUNX-2（P>0.05）的mRNA下調(diào),miR-214下調(diào)可使DFCs在成骨誘導過程中的成骨相關(guān)基因ALP,OSN,RUNX-2的mRN... 

【文章來源】：新疆醫(yī)科大學新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

原代DFCs（×50倍）

新疆醫(yī)科大學碩士學位論文17注：*：p＜0.05，差異有統(tǒng)計學意義；**:p＜0.01，差異有統(tǒng)計學意義圖3轉(zhuǎn)染miR214mimics及miR214inhibitor后1、2、3dmiR214表達情況Fig.3ExpressionofmiR2141,2and3daysaftertransfectionofthemiR214mimicsandmiR214inhibitor3成骨誘導后DFCs表達miR-214的相關(guān)檢測取成骨誘導7天后的DFCs作為實驗組，進行成骨誘導后miR-214表達的檢測。與正常的DFCs相比，其miR-214的表達低于正常DFCs（P＜0.05）。注：*：p＜0.05，差異有統(tǒng)計學意義；圖4成骨誘導7天后DFCs中miR-214的表達Fig.4ExpressionofmicroRNA-214after7daysofosteoinduction

新疆醫(yī)科大學碩士學位論文184轉(zhuǎn)染后DFCs經(jīng)成骨誘導后的miR-214的表達取轉(zhuǎn)染miR-214inhibitor、miR-214mimics及未行轉(zhuǎn)染的DFCs（NC組），均進行成骨誘導7天的DFCs進行成骨誘導后miR-214的檢測，可見轉(zhuǎn)染后7天miR-214mimics組中miR-214的表達依舊較NC組高24倍，而miR-214inhibitor組經(jīng)7天的成骨誘導后其表達miR-214依舊低于NC組。說明轉(zhuǎn)染效果依然存在。注：*：p＜0.05，差異有統(tǒng)計學意義；**:p＜0.01，差異有統(tǒng)計學意義圖5轉(zhuǎn)染miR-214mimics及miR-214inhibitor并成骨誘導7天后miR-214的表達情況Fig.5ExpressionofmicroRNA-214after7daysofosteoinductionaftertransfectionofmicroRNA-214mimicsandmicroRNA-214inhibitor5成骨相關(guān)基因mRNA表達的檢測取轉(zhuǎn)染miR-214inhibitor、miR-214mimics及正常DFCs組（NC組），均進行成骨誘導7天的DFCs進行成骨誘導后成骨相關(guān)基因（ALP,OCN,RUNX-2）的檢測，可見miR-214mimics轉(zhuǎn)染后，其成骨相關(guān)基因的表達均低于NC組但OSN及RUNX-2（p＞0.05）無統(tǒng)計學差異，而miR-214inhibitor轉(zhuǎn)染后，其成骨相關(guān)基因OCN及RUNX-2的表達遠高于NC組,但ALP上調(diào)不明顯。

【參考文獻】：
期刊論文
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