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骨保護(hù)素基因修飾聯(lián)合細(xì)胞移植技術(shù)治療牙周骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-07-28 21:11
  目的觀察骨保護(hù)素(osteoprotegerin,OPG)基因修飾的自體骨髓基質(zhì)細(xì)胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)聯(lián)合細(xì)胞移植技術(shù)治療beagle犬牙周骨缺損模型的效果,為探索基因治療牙周病提供依據(jù)。方法將真核分泌表達(dá)穿梭載體pSecTag2/B-OPG瞬時(shí)轉(zhuǎn)染犬BMSCs,免疫細(xì)胞化學(xué)、Western-blot鑒定OPG蛋白表達(dá)水平,體外構(gòu)建BMSCsOPG-PLGA和BMSC-PLGA的細(xì)胞支架復(fù)合物,掃描電鏡觀察細(xì)胞在支架上的生長情況。選用4只成年beagle犬,將其下頜兩側(cè)第2、3、4前磨牙作為實(shí)驗(yàn)牙,在每顆牙的頰側(cè)構(gòu)建牙槽骨缺損(4mm×4mm×3mm),并隨機(jī)分為4組,即BMSCsOPG-PLGA(實(shí)驗(yàn)組)、BMSC-PLGA(陰性對(duì)照組)、PLGA(支架對(duì)照組)、空白對(duì)照組。術(shù)后6周處死動(dòng)物,組織學(xué)觀察,采用Image-Pro-Express系統(tǒng)測量新生牙槽骨、新生牙骨質(zhì)高度、新生結(jié)締組織的附著量。測量結(jié)果進(jìn)行U檢驗(yàn)。結(jié)果免疫細(xì)胞化學(xué)和Western-blot結(jié)果證實(shí),轉(zhuǎn)染細(xì)胞內(nèi)有OPG蛋白的高表達(dá)。掃描電鏡顯示BMSCs可以在材料表面... 

【文章來源】:安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】:52 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

骨保護(hù)素基因修飾聯(lián)合細(xì)胞移植技術(shù)治療牙周骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究


手術(shù)過程

酶切鑒定,重組質(zhì)粒,牙槽骨,切跡


圖1.手術(shù)過程。(A:暴露牙槽骨,B:在每顆4~x4mmx3~(長度x寬度x深度)的牙槽骨牙槽骨缺損的根方表面做切跡,c:回植BMscE:瓣褥式復(fù)位縫合 Fig1.SurgiealProtoeol(A:ExPosedalveolarbone defeets(4nunx4mmx3nun)weresu嗯 ieallyereatedinthee卻crimental妙 upsandtheeontrol腳 uPswere eollagenmembranesweretrimmedandadaPtedover surmundingalveolarbone, E:Thewoundswereelos

細(xì)胞生長,集落,細(xì)胞


圖3.接種后第3天,首次換液后見細(xì)胞呈集落生長(圖3,Al)傳代后,細(xì)胞生長迅速,分散生長,折光性好(圖3,AZ)(100X)Fig3.ThecellmorphologiesofBMSCs.ThePrimaryPassageofBMSCsfromthebonemarrowgrewasseParateelonesintheflash(Fig3.AI).AfterPassage,theeellswerewelldistributedandwereuniformityasthefibroPlastiemorphologywithlowerrefraetionatthesamemagnifieation(Fig3.AZ)(100x)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]牙周病實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立和應(yīng)用[J]. 陳亞偉,王暉.  現(xiàn)代食品與藥品雜志. 2006(01)
[2]FGF2基因轉(zhuǎn)染對(duì)人牙周膜細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響[J]. 蔣宏偉,凌均棨.  中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2005(03)
[3]骨保護(hù)素基因修飾的pSecTag2/B載體的構(gòu)建[J]. 曹寅,梅陵宣,吳迪,趙春暉.  上?谇会t(yī)學(xué). 2005(03)
[4]細(xì)胞-支架構(gòu)建方式的牙周組織工程實(shí)驗(yàn)研究[J]. 魯紅,吳織芬,田宇.  中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2004(03)



本文編號(hào):3308652

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