本文關(guān)鍵詞：IL-17對(duì)破骨細(xì)胞MMP-9表達(dá)水平的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:檢測(cè)白介素-17(Interleukin-17,IL-17)對(duì)破骨細(xì)胞細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表達(dá)水平的影響,為研究IL-17在正畸力致牙根吸收過(guò)程中的作用提供參考。方法:對(duì)小鼠單核/巨噬系細(xì)胞RAW264.7進(jìn)行破骨細(xì)胞誘導(dǎo),并通過(guò)抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色鑒定破骨細(xì)胞誘導(dǎo)成功。本實(shí)驗(yàn)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組在培養(yǎng)液中加入梯度濃度0.1、1.0、10和100 ng/m L的IL-17,依次設(shè)為a組、b組、c組和d組,對(duì)照組不加IL-17。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法檢測(cè)破骨細(xì)胞誘導(dǎo)第3 d、4 d和5 d時(shí)培養(yǎng)液中MMP-9蛋白的表達(dá)水平,采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Reverse-Transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法檢測(cè)破骨細(xì)胞誘導(dǎo)第3 d、4 d和5 d時(shí)培養(yǎng)液中MMP-9m RNA的表達(dá)水平,并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:1、破骨細(xì)胞TRAP染色:RAW264.7細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)3~5 d后,可見(jiàn)TRAP染色陽(yáng)性細(xì)胞,體積大,多核(核≥3個(gè)),細(xì)胞核呈紫藍(lán)色,胞漿中抗酒石酸酸性磷酸酶活性部位呈紫紅色顆粒。2、ELISA檢測(cè):在破骨細(xì)胞誘導(dǎo)第3 d時(shí),與對(duì)照組比較,d組MMP-9的蛋白表達(dá)水平升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);在破骨細(xì)胞誘導(dǎo)第4 d和第5 d時(shí),與對(duì)照組比較,b組、c組和d組MMP-9的蛋白表達(dá)水平升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。c組的MMP-9蛋白表達(dá)水平均高于b組,d組的MMP-9蛋白表達(dá)水平均高于c組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3、RT-PCR檢測(cè):在破骨細(xì)胞誘導(dǎo)第3 d、4 d和5 d時(shí),與對(duì)照組比較,a組、b組、c組和d組的MMP-9 m RNA表達(dá)水平均升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同一時(shí)間下的各實(shí)驗(yàn)組間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。各組在破骨細(xì)胞誘導(dǎo)第5 d時(shí)的MMP-9 m RNA表達(dá)水平均高于第3 d和第4 d,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:IL-17可以促進(jìn)破骨細(xì)胞MMP-9表達(dá),且促進(jìn)作用隨著IL-17濃度的增加而增強(qiáng)。提示IL-17對(duì)破骨細(xì)胞的調(diào)控作用除直接促進(jìn)破骨細(xì)胞的分化和作為核因子κB受體活化因子配體(Receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)的誘導(dǎo)劑以外,還可能通過(guò)促進(jìn)MMP-9表達(dá),進(jìn)而影響破骨細(xì)胞的遷移和增強(qiáng)其降解骨基質(zhì)的能力來(lái)實(shí)現(xiàn)。
【關(guān)鍵詞】：白介素-17 基質(zhì)金屬蛋白酶-9 RAW264.7
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R783.5
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 中英文對(duì)照表11-12
• 第1章 緒論12-18
• 1.1 研究背景12-17
• 1.1.1 正畸致牙根吸收的研究進(jìn)展12-14
• 1.1.2 IL-17與正畸炎性根吸收的相關(guān)性14-15
• 1.1.3 MMP-9 與正畸炎性根吸收的相關(guān)性15-17
• 1.2 立題依據(jù)及研究目的17-18
• 第2章 實(shí)驗(yàn)材料與方法18-28
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料18-19
• 2.1.1 主要材料和試劑18-19
• 2.1.2 主要儀器及設(shè)備19
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法19-28
• 2.2.1 RAW264.7 細(xì)胞的培養(yǎng)方法19-21
• 2.2.2 破骨細(xì)胞的誘導(dǎo)21
• 2.2.3 破骨細(xì)胞TRAP染色21-22
• 2.2.4 ELISA法檢測(cè)MMP-9 蛋白的表達(dá)水平22-24
• 2.2.5 RT-PCR法檢測(cè)MMP-9 mRNA的表達(dá)水平24-27
• 2.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析27-28
• 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-33
• 3.1 破骨細(xì)胞TRAP染色28
• 3.2 ELISA檢測(cè)MMP-9 蛋白的表達(dá)水平28-30
• 3.3 RT-PCR檢測(cè)MMP-9 mRNA的表達(dá)水平30-33
• 第4章 討論33-41
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料及方法的選擇33-35
• 4.1.1 小鼠單核/巨噬系細(xì)胞RAW264.733
• 4.1.2 破骨細(xì)胞的誘導(dǎo)33-34
• 4.1.3 破骨細(xì)胞MMP-9 蛋白和mRNA表達(dá)水平的測(cè)定時(shí)間34-35
• 4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析35-38
• 4.2.1 IL-17對(duì)破骨細(xì)胞MMP-9 蛋白和mRNA表達(dá)水平的影響35-37
• 4.2.2 破骨細(xì)胞MMP-9 mRNA和蛋白表達(dá)的差異性37-38
• 4.3 IL-17在正畸牙根吸收過(guò)程中的可能作用機(jī)制38-40
• 4.4 總結(jié)40-41
• 第5章 結(jié)論41-42
• 參考文獻(xiàn)42-51
• 作者簡(jiǎn)介及在讀期間成果51-52
• 致謝52-53

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 仝錫帥;顧建紅;王東;陳陽(yáng);卞建春;劉宗平;;Ca~(2+)信號(hào)對(duì)1α,25-(OH)_2D_3調(diào)控破骨細(xì)胞形成及骨吸收活性的影響[J];營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào);2015年05期

2 付應(yīng)霄;顧建紅;王怡;袁燕;劉學(xué)忠;卞建春;劉宗平;;RAW264.7細(xì)胞分化為破骨細(xì)胞的凋亡觀察[J];揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版);2015年01期

3 范瑞賢;李曉智;;白細(xì)胞介素-17與正畸牙根吸收相關(guān)性研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志;2013年03期

4 董強(qiáng);夏茜;馬洪;王永;;維生素D_3聯(lián)合地塞米松誘導(dǎo)大鼠破骨細(xì)胞的體外培養(yǎng)[J];貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年05期

5 劉鑫;向?qū)W熔;范小平;楊光玉;李亞奇;;人牙髓中基質(zhì)金屬蛋白酶-9受正畸力作用影響的初步分析[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2009年08期

6 黃曉斌;孫元明;李雨民;楊福軍;;破骨細(xì)胞分化成熟因子及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路[J];中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志;2007年11期

7 莊麗;白玉興;;基質(zhì)金屬蛋白酶在正畸源性牙根吸收中的作用[J];北京口腔醫(yī)學(xué);2007年05期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 張yN;牙齦卟啉單胞菌脂多糖對(duì)成骨細(xì)胞—破骨細(xì)胞間EphB4-ephrinB2雙向傳導(dǎo)信號(hào)的影響[D];吉林大學(xué);2013年

2 韓光紅;不同正畸力值對(duì)牙髓活力、Fos和MMP-9蛋白表達(dá)變化作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2012年

3 張凡;白細(xì)胞介素17促進(jìn)成骨細(xì)胞誘導(dǎo)破骨樣細(xì)胞分化的作用和機(jī)制[D];山東大學(xué);2010年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 羅俊;細(xì)胞因子IL-17A在牙根吸收過(guò)程中表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[D];南昌大學(xué);2012年

2 張錦蘋;正畸力對(duì)齦溝液中白介素-17表達(dá)影響的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2011年

  本文關(guān)鍵詞：IL-17對(duì)破骨細(xì)胞MMP-9表達(dá)水平的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：328513