目的研究BMP2和BMP4對小鼠ALC（ameloblast-lineage cell）內(nèi)牙釉質(zhì)基質(zhì)蛋白酶中基質(zhì)金屬蛋白酶20（matrix metalloproteinase 20,MMP20）和激肽釋放酶4（kallikrein 4,KLK4）表達(dá)的調(diào)控作用。方法在ALC細(xì)胞系中加入BMP2和BMP4重組蛋白,利用免疫印跡實(shí)驗(yàn)和熒光定量PCR檢測BMP通路信號分子和牙釉質(zhì)基質(zhì)蛋白酶的表達(dá)變化。同期,在另一組ALC細(xì)胞系中加入BMP通路抑制劑（Dorsomorphin）,檢測牙釉質(zhì)基質(zhì)蛋白酶的表達(dá)情況。結(jié)果在BMP2和BMP4蛋白的作用下,ALC細(xì)胞中BMP通路的經(jīng)典通路（Smad1/5/8）和非經(jīng)典通路（p38）的表達(dá)顯著增強(qiáng),同時(shí)MMP20和KLK4的基因表達(dá)也有明顯上調(diào)。同期添加Dorsomorphin的ALC細(xì)胞中BMP通路的經(jīng)典通路的表達(dá)明顯下降,而非經(jīng)典通路的表達(dá)變化不大,同時(shí)MMP20和KLK4的基因表達(dá)也有明顯的下調(diào)趨勢。在另一組實(shí)驗(yàn)中添加BMP抑制劑的處理組則表現(xiàn)出MMP20和KLK4蛋白表達(dá)的下調(diào),而使用BMP2和BMP4對抑制劑組進(jìn)行處理的挽救組則表現(xiàn)出MMP2... 

【文章來源】：口腔醫(yī)學(xué). 2020,40(09)

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Western blot檢測BMP2和BMP4誘導(dǎo)的ALC中 Smad1/5/8和p38的磷酸化變化

圖1 Western blot檢測BMP2和BMP4誘導(dǎo)的ALC中 Smad1/5/8和p38的磷酸化變化2.2 牙釉質(zhì)基質(zhì)蛋白酶MMP20和KLK4的變化

Real-time PCR的結(jié)果顯示,與對照組相比,BMP蛋白刺激12 h后,MMP20和KLK4的基因表達(dá)明顯升高(P<0.01,圖3);與對照組相比,抑制劑處理12 h后,Real-time PCR的結(jié)果顯示MMP20和KLK4的基因表達(dá)明顯下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01,圖3)。該結(jié)果表明BMP2和BMP4重組蛋白能夠正向調(diào)控MMP20、KLK4基因的表達(dá),抑制劑Dorsomorphin可以負(fù)向調(diào)控MMP20、KLK4基因的表達(dá),據(jù)此我們可以認(rèn)為:BMP通路,尤其是Smad依賴性通路對MMP20、KLK4基因的表達(dá)具有至關(guān)重要的作用。2.3 BMP蛋白的挽救作用

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Making a tooth:growth factors,transcription factors,and stem cells[J]. Yan Ding ZHANG1,2, Zhi CHEN1, Yi Qiang SONG3, Chao LIU2, Yi Ping CHEN2,3,* 1College of Stomatology, Wuhan University, Wuhan 430072, China 2College of Bioengineering, Fujian Normal University, Fuzhou 350007, China 3Division of Developmental Biology, Department of Cell and Molecular Biology, Tulane University, New Orleans, LA 70118, USA.  Cell Research. 2005(05)



本文編號：3238755