背景：NELL1，一種與人顱縫早閉癥（craniosynostosis,CS）顱縫過早融合相關的新型分泌型蛋白，能促進間充質干細胞的成骨分化。目的：研究NELL1對人牙周膜干細胞（humanperiodontalligamentstemcells,hPDLSC）體外成骨分化的作用并初步探討其作用機制。方法：構建攜帶NELL1的慢病毒載體（lenti-NELL1），用以轉染hPDLSCs，經(jīng)礦化誘導液誘導培養(yǎng)后，通過檢測成骨標志物堿性磷酸酶（alkalinephosphate,ALP）、骨鈣素（osteocalcin,OCN）及鈣沉積來評估NELL1對hPDLSCs的骨誘導作用。同時real-timePCR檢測成骨重要的轉錄因子（Msx2、Runx2）mRNA的表達變化。實驗以只攜帶報告基因EGFP的空載體lenti-EGFP轉染的hPDLSCs為對照。結果：WesternBlot及real-timePCR證實構建的lenti-NELL1轉染hADSCs能成功表達有生物學活性的NELL1蛋白。與對照相比，lenti-NELL1組ALP、OCN、鈣沉積及Msx2mRNA都顯著提高（p＜0.... 

【文章來源】：中國人民解放軍醫(yī)學院北京市

【文章頁數(shù)】：111 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中英文縮略詞表
中文摘要
Abstract
前言
實驗一、人牙周膜干細胞的分離、培養(yǎng)及生物學特性的研究
    摘要
    1 材料和方法
    2 結果
    3 討論
    參考文獻
實驗二、攜帶增強型綠色熒光蛋白的慢病毒載體感染人牙周膜干細胞對其體外成骨分化影響的研究
    摘要
    1 材料與方法
    2 結果
    3 討論
    參考文獻
實驗三、人NELL1基因慢病毒載體的構建
    摘要
    1 材料與方法
    2 結果
    3 討論
    參考文獻
實驗四、NELL1慢病毒載體轉染人牙周膜干細胞對其成骨分化影響的研究
    摘要
    1 材料與方法
    2 結果
    3 討論
    參考文獻
全文總結
綜述一、慢病毒載體的研究進展及應用
    摘要
    1 慢病毒載體分子構造
    2 慢病毒載體的遺傳毒性
    3 細胞工程應用
    4 動物模型應用
    參考文獻
綜述二、NELL1基因促進成骨作用的研究及其應用
    摘要
    1 NELL1基因的發(fā)現(xiàn)
    2 NELL1基因的結構
    3 NELL1蛋白的結構
    4 Nel1在小鼠骨骼發(fā)育中的作用
    5 NELL1促進骨軟骨再生的應用研究
    6 NELL1促進成骨的可能機制
    參考文獻
附圖
個人簡歷
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]慢病毒載體法高效轉基因雞制備技術研究[D]. 徐世永.南京農(nóng)業(yè)大學 2007



本文編號：3158077