骨質(zhì)疏松會(huì)降低口腔種植體初期穩(wěn)定性和延遲骨結(jié)合,影響種植成功率。淫羊藿苷（ICA）具有骨誘導(dǎo)性,可促進(jìn)骨、血管生成,抑制骨質(zhì)吸收,治療骨質(zhì)疏松效果明確,無(wú)毒副作用。將ICA加載在鈦（Ti）種植體表面,可以促進(jìn)種植體周?chē)墙M織生成,實(shí)現(xiàn)早期骨結(jié)合。目的:研究不同濃度ICA對(duì)MC3T3-E1成骨細(xì)胞的作用效果;在此基礎(chǔ)上分別構(gòu)建二氧化鈦（TiO₂）納米管（NT）負(fù)載ICA并加蓋聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）涂層和綠色環(huán)保的鈦表面經(jīng)相轉(zhuǎn)變?nèi)芫福≒TL）預(yù)處理并以層層自組裝方式加載ICA的涂層,對(duì)兩種改性試樣進(jìn)行表征,研究藥物釋放規(guī)律,通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)觀察試樣對(duì)MC3T3-E1成骨細(xì)胞生物活性的作用效果。通過(guò)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究TiO₂納米管負(fù)載ICA并加蓋PLGA涂層在正常大鼠體內(nèi)骨結(jié)合的影響;進(jìn)一步探討鈦表面經(jīng)PTL預(yù)處理并以層層自組裝方式加載ICA涂層的鈦種植體對(duì)正常大鼠和骨質(zhì)疏松大鼠體內(nèi)骨結(jié)合的影響。方法:1、采用含不同濃度ICA的培養(yǎng)基培養(yǎng)MC3T3-E1成骨細(xì)胞。通過(guò)倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞的鋪展情況;細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)（CCK-8）、堿性磷酸酶檢測(cè)（... 

【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：152 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

不同濃度ICA刺激1d后MC3T3-E1成骨細(xì)胞的形態(tài)

醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文 一、淫羊藿苷對(duì)成骨細(xì)胞的作用Figure 1-1 Morphology of MC3T3-E1 cells stimulated by different concentrations of icarii 1 day. (A) 0mol/L; (B) 10-5mol/L; (C) 10-6mol/L; (D) 10-7mol/L; (E) 10-8mol/L; (F) 10-9mol/.2 細(xì)胞增殖活性檢測(cè)MC3T3-E1 成骨細(xì)胞的成熟經(jīng)歷了增殖，分化，礦化三個(gè)階段。CCK-8 分檢測(cè) ICA 濃度為 0、10-5、10-6、10-7、10-8和 10-9mol/L 的培養(yǎng)基在培養(yǎng)細(xì)胞 和 7d 后對(duì)細(xì)胞活力的影響。CCK 檢測(cè)結(jié)果（圖 1-2）顯示，與對(duì)照組相比本經(jīng)過(guò)不同濃度的 ICA 處理后 MC3T3-E1 成骨細(xì)胞的活性呈增強(qiáng)趨勢(shì)，且具劑量依賴(lài)性。細(xì)胞培養(yǎng) 3d 后，各組差異性較小，說(shuō)明前 3d 細(xì)胞增長(zhǎng)速度較。培養(yǎng) 7d 后，各組與對(duì)照組相比，均顯示出較高的細(xì)胞增殖，且低濃度 IC10-7-10-9mol/L）表現(xiàn)出更好的細(xì)胞增殖活性，但與高濃度 ICA 組沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)異。

醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文 一、淫羊藿苷對(duì)成骨細(xì)胞的作用10-9mol/L. The data are expressed as the means ±standard deviations (n = 3). * indicates astatistical significance compared to the Ti group. (P<0.05)3 堿性磷酸酶活性檢測(cè)ALP 是成骨細(xì)胞早期分化的標(biāo)志之一。采用 ALP 試劑盒分別檢測(cè) ICA 濃度、10-5、10-6、10-7、10-8和 10-9mol/L 條件下，細(xì)胞培養(yǎng) 7d 和 14d 后的細(xì)胞情況。結(jié)果（圖 1-3）顯示，對(duì)照組在 7d 時(shí) ALP 數(shù)值較低，14d 組的 ALP與 7d 組相差不大，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與對(duì)照組相比，不同濃度的 ICA 處在培養(yǎng) 7d 后 ALP 表現(xiàn)出較對(duì)照組明顯增強(qiáng)的趨勢(shì)。培養(yǎng) 14d 后，各實(shí)驗(yàn)組LP 的數(shù)值有所降低，但不同濃度的 ICA 處理組的 ALP 活性依舊高于對(duì)照進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，在第 7 天和 14 天時(shí)，ICA 濃度為 10-5mol/L 和 10-6mol/L別表現(xiàn)出較其他濃度的 ICA 組 ALP 活性增強(qiáng)更為明顯。上述結(jié)果提示，高（10-5-10-6mol/L）ICA 促進(jìn)分化的效果更佳。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]淫羊藿苷促前成骨細(xì)胞MC3T3-E1成骨分化的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 陳旭鳳,喻瀾,夏秦.  中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2018(06)
[3]淫羊藿苷基于ERα-Wnt/β-catenin信號(hào)通路對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠成骨分化的影響及機(jī)制研究[J]. 蔡國(guó)雄,曾意榮,曾建春.  中醫(yī)臨床研究. 2018(11)
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