目的:通過檢測CFTR及Wnt/β-catenin信號通路的目標靶基因（Wisp-1和Axin）以及關(guān)鍵核心因子（β-catenin）在燃煤型氟斑牙仔鼠牙胚中的表達變化,明確氟作用于CFTR的關(guān)鍵時間靶點,并初步探討CFTR及Wnt/β-catenin信號通路表達變化在燃煤型氟斑牙發(fā)病中的相關(guān)機制,為氟斑牙特異性阻斷和靶向治療提供新的理論依據(jù)。方法:1、課題組前期已成功復制燃煤型氟中毒的大鼠模型,本實驗在此基礎(chǔ)上繼續(xù)合籠產(chǎn)仔;取同代出生后0（Postnetal 0 day,P0）、1（P1）、7（P7）、14（P14）和20（P20）天處于釉質(zhì)形成期的仔鼠牙胚組織樣本各12個;2、應用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測仔鼠下切牙牙胚中CFTR m RNA在以上各時間點中的表達變化。3、通過Western blot和實時熒光定量PCR檢測仔鼠下切牙牙胚中β-catenin蛋白,Wisp-1和Axin m RNA在以上各時間點的表達變化。結(jié)果:1、在正常仔鼠下切牙牙胚中CFTR m RNA的表達隨著時間的增加呈逐漸增加趨勢,P14和P20表達升高顯著（P﹤0.01）。在實驗組中CFTR m RNA... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學貴州省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

體式顯微鏡下觀察仔鼠下頜骨及切牙牙胚

碩士學位論文 NA 的純度高及完整性好dorf 紫外線分光光度儀檢測結(jié)果示樣品總 RNA 的 OD260/280均NA 無蛋白及胍鹽污染。瓊脂凝膠電泳（圖 2）結(jié)果示 28S rRNA 和，兩條帶之間和上下幾乎沒有彌散，5S rRNA 條帶處于凝膠的提取的總 RNA 純度高，無降解，完整性好。

2.4 β-catenin、Wisp-1 及Axin 在燃煤型氟斑牙仔鼠牙胚中的表達變化2.4.1 β-catenin 的表達變化如圖4顯示，在正常仔鼠牙胚中β-catenin蛋白表達隨著時間增加呈逐漸升高趨勢，且相鄰天數(shù)之間比較差異均有統(tǒng)計學意義（P﹤0.05）。在實驗組中，β-catenin 蛋白表達從 P1 開始呈逐漸增加趨勢，除 P0 與 P1 間比較


本文編號：3060664