目的:軟骨組織因缺乏血管和神經(jīng),導(dǎo)致自愈能力非常有限,組織損傷后無法完全修復(fù),傳統(tǒng)的治療方法也無法達(dá)到讓人滿意的臨床效果。近年來間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化研究不斷深入為軟骨修復(fù)再生提供了一種有效的策略。現(xiàn)有證據(jù)表明表觀遺傳學(xué)調(diào)控包括組蛋白翻譯后修飾和MicroRNA在間充質(zhì)干細(xì)胞分化的調(diào)控上均扮演著重要角色。但是關(guān)于二者之間是否相互作用共同調(diào)控間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨分化的研究甚少。本研究擬通過基因沉默組蛋白去甲基化酶KDM6A改變牙周膜干細(xì)胞中組蛋白H3賴氨酸27三甲基化（H3K27me3）的水平,探討牙周膜干細(xì)胞成軟骨分化中MicroRNA204和MicroRNA211的表達(dá)變化,為進(jìn)一步闡述間充質(zhì)干細(xì)胞分化中的基因表達(dá)表觀遺傳學(xué)調(diào)控規(guī)律,促進(jìn)軟骨組織再生臨床轉(zhuǎn)化提供基礎(chǔ)研究證據(jù)。方法:1、收集因正畸拔除的前磨牙和完整無齲的第三磨牙,采用酶消化法分離培養(yǎng)牙周膜干細(xì)胞。2、通過慢病毒轉(zhuǎn)染建立KDM6A穩(wěn)定敲低的細(xì)胞系。3、分別培養(yǎng)低表達(dá)KDM6A的PDLSCs和EZH2抑制劑處理的PDLSCs,并進(jìn)行成軟骨誘導(dǎo)分化,通過阿辛藍(lán)染色和蛋白多糖定量實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)牙周膜干細(xì)胞成軟骨分化能力的改變。通過免疫... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

阿辛藍(lán)染色

免疫熒光染色

成軟骨相關(guān)分子Runx2的檢測(cè)


本文編號(hào)：2913846