目的：研究抑癌基因RECK在口腔鱗癌淋巴道轉移中的作用及其臨床意義，探討RECK基因在口腔鱗癌淋巴道轉移中的調節(jié)機制以及中藥青蒿琥酯(Artesunate,ART)抑制口腔鱗癌侵襲轉移的機制。方法：1、收集符合實驗條件的口腔鱗癌組織60例，采用免疫組化技術分析RECK基因和MMP-9在腫瘤組織中的表達和臨床意義，并分析其相互關系；2、體外培養(yǎng)Tca8113細胞,用不同濃度的ART進行干預，采用MTT法觀察各濃度組對Tca8113細胞的生長抑制作用，并用流式細胞儀分析各濃度組對Tca8113細胞凋亡的影響，采用免疫組化技術分析各濃度組的ART對Tca8113細胞中RECK基因和MMP-9的蛋白表達水平的影響；3、通過建立口腔鱗癌細胞淋巴道轉移的動物模型，并采用轉移后實驗動物腹部注射ART進行干預，采用免疫組化技術分析移植瘤以及轉移淋巴結中RECK基因和MMP-9的表達，擬探討ART抑制口腔鱗癌細胞轉移的作用及其機制。結果：1、檢測60例口腔鱗癌臨床標本發(fā)現(xiàn)抑癌基因RECK的陽性表達率為51.67%，在正常組織中的陽性表達率為90%，二者相比差異有統(tǒng)計學意義（P0.05)；MMP-9的陽性表達率為78.33%，在正常組織中的陽性表達率為20%，二者相比差異有統(tǒng)計學意義（P0.05)。RECK與MMP-9的表達水平與口腔鱗癌病理分級、TMN分期以及淋巴結轉移密切相關(P0.05)，隨著惡性程度的增加，淋巴結轉移程度的遞進，RECK蛋白表達水平逐漸下降，并且與MMP-9表達水平呈負相關，相關系數(shù)為-3.266(P0.05)；2、MTT檢測發(fā)現(xiàn)，ART能有效地抑制Tca8113細胞的增殖活性，各濃度組與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)，其作用隨著干預時間的延長及藥物濃度的增加越來越明顯，且在72h效果最明顯。流式細胞術檢測ART作用72h能有效地誘導Tca8113細胞的早期和晚期凋亡，且早期凋亡率大于晚期凋亡率，除12.5ug/ml外，各濃度組與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)，并隨著藥物濃度的增加，凋亡率越來越高，呈現(xiàn)劑量依賴性。免疫組化結果顯示，ART作用72h后，隨著用藥濃度的增加，RECK陽性表達細胞的數(shù)量呈逐漸增加的趨勢，其平均光密度值也逐漸升高，且在濃度為200ug/ml時最高，除12.5ug/ml以外，各濃度組與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)，而MMP-9陽性表達細胞的數(shù)量除12.5ug/ml以外，其余隨著藥物濃度的增加其光密度值逐漸降低，且在200ug/ml最低，與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；3、經200mg/kg濃度的ART治療干預動物模型后發(fā)現(xiàn)，ART組移植瘤的平均重量明顯低于陰性對照組（P0.05），可見ART能明顯抑制口腔鱗癌細胞的生長侵襲轉移能力，但移植瘤及淋巴結轉移中口腔鱗癌細胞的RECK與MMP-9的蛋白表達水平，各組相比差異沒有統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結論：1、RECK基因在口腔鱗癌中的蛋白表達水平隨著口腔鱗癌患者的臨床病理分級、TNM分期、淋巴結轉移的遞進逐漸下降相關，而MMP-9的蛋白表達水平逐漸升高，二者與患者的年齡、性別、腫瘤的大小等臨床特征沒有關系。由于臨床病理分級、TNM分期、有無淋巴結轉移是判斷腫瘤患者預后的主要參考指標，因此，檢測RECK基因的蛋白表達水平可能對患者的預后有一定的參考價值；2、RECK基因與MMP-9在口腔鱗癌中的表達水平與口腔鱗癌患者的臨床病理特征有密切的關系，RECK基因可以通過下調MMP-9蛋白水平的表達來抑制口腔鱗癌的侵襲與轉移。3、ART能夠抑制口腔鱗癌Tca8113細胞的增殖，并對其早期和晚期凋亡均有促進作用，并隨著藥物濃度的增加逐漸上升；4、ART可能通過上調RECK在Tca8113細胞中的表達來下調MMP-9的蛋白表達，從而抑制Tca8113細胞的增殖，促進其凋亡；5、ART對口腔鱗癌的生長浸潤及淋巴道轉移有抑制作用，這提示ART在口腔鱗癌的治療方面具有潛在的基礎與臨床研究價值，為新型抗腫瘤藥物及輔助化療藥物的篩選提供了一個方向。
【學位單位】：瀘州醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2012
【中圖分類】：R739.8
【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
材料與方法
結果
討論
結論
參考文獻
英漢縮略詞對照表
致謝
綜述
    參考文獻

【相似文獻】

相關期刊論文 前19條

1 周鐵軍;向麗;李健;賈春霞;王云;龔莉;;青蒿琥酯對Tca8113細胞的抑制作用及對RECK蛋白表達的影響[J];重慶醫(yī)學;2012年23期

2 梁新華,馮戈,王大章,毛祖彝,冷衛(wèi)東,何嘉;熱休克對人舌癌Tca8113細胞尿激酶型纖溶酶原激活物受體表達的影響[J];實用口腔醫(yī)學雜志;2004年06期

3 劉念;朱光勛;;RECK與牙周病[J];臨床口腔醫(yī)學雜志;2015年11期

4 陳麗;向麗;周鐵軍;賈春霞;龔莉;;口腔鱗癌中RECK和MMP-9蛋白的表達及臨床意義[J];瀘州醫(yī)學院學報;2014年01期

5 羅穆云;肖秋香;楊少春;;RECK蛋白在人腦星形細胞瘤中的表達及意義[J];臨床醫(yī)學工程;2013年12期

6 趙美林;黃萍;;桂皮醛對人舌癌Tca8113細胞體外增殖的影響[J];西部中醫(yī)藥;2013年10期

7 劉晶晶;顧振鵬;姚麗娟;;RECK和MMP-9在子宮內膜癌組織中的表達及其臨床意義[J];中國腫瘤生物治療雜志;2012年03期

8 傅全勝;蘇澤軒;梁蔚波;卓育敏;徐誼朝;李紅;康舉齡;;腎細胞癌中RECK和MMP-9蛋白表達的相關性[J];中國老年學雜志;2012年12期

9 王旭峰;王斌全;張海利;張春明;高偉;;RECK和MMP-9在喉鱗癌中的表達及相關性研究[J];中國醫(yī)療前沿;2011年04期

10 吳也可;宋東哲;景歡;王馨玉;趙振剛;呂胡玲;廖爽;陳謙明;;雷公藤內酯醇對人口腔鱗狀細胞癌細胞株Tca8113作用的實驗研究[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2011年05期

11 孫健;董蒨;隋愛華;姚如永;于丹;;肝母細胞瘤組織RECK及膜型基質金屬蛋白酶-1的表達及與腫瘤轉移抑制關系的探討(英文)[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2010年02期

12 徐建達;施鑫;吳蘇稼;張先燎;周志平;;RECK、MMP-2在骨肉瘤中的表達及其臨床意義[J];臨床腫瘤學雜志;2010年03期

13 董慧蕾;郭星;李振東;;RECK在人喉鱗癌組織中的表達及臨床意義[J];遼寧醫(yī)學院學報;2010年01期

14 常瑋;王斌全;;RECK和MMP-9在喉鱗癌中的表達及其臨床意義[J];醫(yī)學研究雜志;2010年04期

15 阮敏;楊雯君;周曉健;陳萬濤;張陳平;;紫草素對口腔鱗癌Tca8113細胞增殖與凋亡的作用[J];中國口腔頜面外科雜志;2010年01期

16 張?zhí)毂?許丹;關一夫;;RECK和MMP-2在口腔鱗癌中的表達及其與侵襲轉移關系研究[J];中國實用口腔科雜志;2010年05期

17 張金陵;馬先文;李家華;桂斌捷;;RECK在骨巨細胞瘤中的表達及與MMP-2的關系[J];中國骨腫瘤骨病;2011年02期

18 謝謙;黃洪章;胡曉文;賀凌飛;;放射線對Tca8113細胞端粒重復序列結合因子2蛋白的影響[J];武漢大學學報(醫(yī)學版);2013年03期

19 孫曉宏;陳玲;龐作良;;抑癌基因RECK轉錄mRNA在食管癌中的表達及臨床意義[J];中國老年學雜志;2013年10期

相關博士學位論文 前10條

1 李愛霞;熊果酸對人舌癌Tca8113細胞增殖、凋亡的影響及機制的實驗研究[D];鄭州大學;2010年

2 王磊升;半胱氨酸蛋白酶RECK啟動子甲基化在骨肉瘤的轉移發(fā)生過程中的作用及機制研究[D];山東大學;2016年

3 馮紅超;酸性微環(huán)境對單核-巨噬細胞、Tca8113細胞的影響及雷公藤甲素在其中的作用[D];貴陽醫(yī)學院;2015年

4 李偉忠;環(huán)氧化酶-2抑制劑塞來昔布對人舌鱗癌Tca8113細胞生長抑制及誘導凋亡的作用[D];南方醫(yī)科大學;2008年

5 王雷;重組人乳鐵蛋白對口腔鱗癌Tca8113細胞的抑制作用及其機制研究[D];吉林大學;2009年

6 田青水;慢病毒介導的RECK基因治療胰腺癌的實驗研究[D];蘇州大學;2011年

7 郭君紅;腫瘤抑制基因RECK對早孕滋養(yǎng)細胞侵蝕生物學行為影響的研究[D];華中科技大學;2007年

8 宋櫻;乏氧對舌鱗癌細胞系Tca8113生物學行為的影響及其調控機制研究[D];山東大學;2009年

9 周曉清;RECK基因在人腺樣囊性癌中的表達、甲基化狀態(tài)及與臨床病理因素及預后的相關性研究[D];山東大學;2015年

10 張旭東;成釉細胞瘤BRAF、SMO、RECK基因突變與其生物學行為的關系[D];河北醫(yī)科大學;2016年

相關碩士學位論文 前10條

1 賈春霞;RECK基因和MMP-9在口腔鱗癌中的表達及青蒿琥酯抑制Tca8113細胞的實驗研究[D];瀘州醫(yī)學院;2012年

2 李磊;RECK與MMP-2在口腔扁平苔蘚的表達及意義[D];青島大學;2015年

3 劉晶晶;RECK與MMP-9基因在子宮內膜癌中的表達及臨床意義[D];濱州醫(yī)學院;2012年

4 沙杰;芹菜素聯(lián)合熱療法對舌癌Tca8113細胞抗增殖及誘導凋亡的影響[D];鄭州大學;2010年

5 馬志遠;RECK、MMP-2及MMP-9在腎透明細胞癌中的表達及意義[D];鄭州大學;2011年

6 張亞航;RECK和MMP-2在皮膚鱗狀細胞癌中的表達及臨床意義[D];青島大學;2011年

7 亓麟;RECK及MMP-9蛋白在皮膚鱗狀細胞癌中的表達及臨床病理意義[D];青島大學;2010年

8 孫健;肝母細胞瘤組織RECK蛋白及膜型基質金屬蛋白酶-1的表達及與腫瘤轉移抑制關系的探討[D];青島大學;2010年

9 王旭峰;RECK和MMP-9在喉鱗癌中的表達及相關性研究[D];山西醫(yī)科大學;2011年

10 朱麗業(yè);基質金屬蛋白酶抑制劑RECK在卵巢上皮性腫瘤中的表達及臨床意義[D];吉林大學;2008年

本文編號：2894733