目的：本研究通過抗-EMMPRIN單克隆抗體、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑多西環(huán)素及抗-EMMPRIN單克隆抗體與多西環(huán)素聯(lián)合應(yīng)用分別觀察對人舌鱗癌Tca8113細胞及裸鼠移植瘤的抑制作用,從而探索阻斷腫瘤侵襲的機制,為治療口腔鱗癌尋找新途徑。 方法： 1.MTT法(四甲基偶氮唑藍法)：通過加入藥物抗-EMMPRIN單克隆抗體、多西環(huán)素、抗-EMMPRIN單克隆抗體與多西環(huán)素聯(lián)合用藥,觀察三種藥物對舌鱗癌Tca8113細胞的增殖抑制作用； 2.構(gòu)建裸鼠Yca8113細胞皮下移植瘤動物模型：通過于裸鼠右腋皮下注射1×106個混勻的Tca8113細胞,觀察成瘤情況。成瘤兩周后隨機分為4組,每組8只,分別為對照組(生理鹽水,0.1ml/d)、抗-EMMPRIN單克隆抗體組(10mg/kg/d)、多西環(huán)素組(20mg/ml/3d)、抗-EMMPRIN單克隆抗體(10mg/kg/d)+多西環(huán)素(20mg/ml/3d)。開始給藥后每隔3天稱重裸鼠,游標(biāo)卡尺測量腫瘤結(jié)節(jié)的長短直徑。4周后處死,連同包膜完整剝離腫瘤組織,稱重。根據(jù)腫瘤體積計算抑瘤率 3.免疫組織化學(xué)法(SP法)檢測蛋白表達：采用SP法檢測各組裸鼠腫瘤組織內(nèi)CD147及MMP-2, MMP-9蛋白表達。CD147陽性信號定位于細胞膜和細胞漿,MMP-2陽性信號定位于細胞膜和細胞漿,MMP-9陽性信號定位于細胞質(zhì)和細胞膜,成棕黃色顆粒。每張切片隨機選取4個高倍視野,計數(shù)癌細胞中陽性細胞數(shù),分別按以下比例分級：0級為無明顯陽性反應(yīng)細胞；1級為陽性細胞10%、弱染色；2級為陽性細胞10%-50%；3級為陽性細胞50%、強染色。0-1級判為陰性表達；2-3級判為陽性表達。 結(jié)果： 1.細胞增殖抑制實驗結(jié)果：抗-EMMPRIN單克隆抗體及多西環(huán)素聯(lián)合用藥24h、48h、72h對Tca8113細胞的增殖抑制作用強于單獨使用抗-EMMPRIN單克隆抗體和多西環(huán)素；單獨使用抗-EMMPRIN單克隆抗體對細胞的增殖抑制作用強于單獨使用多西環(huán)素,P0.05,結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)差異。 2.瘤體重量及抑瘤率結(jié)果：對照組、多西環(huán)素組、抗-EMMPRIN單克隆抗體組及聯(lián)合用藥組瘤體重量分別為1.12±0.31g、0.86±0.11g、0.74±0.19g及0.55±0.17g。對照組與實驗組之間差別有顯著差別(P0.01),聯(lián)合用藥與單純用藥組之間比較有差別(P0.05)。各組腫瘤體積變化：對照組瘤體變化大,而三個實驗組變化較小。對照組與實驗組之間有顯著差別(P0.01),聯(lián)合用藥組較抗-EMMPRIN單克隆抗體組和多西環(huán)素組變化最小,P0.05,結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)差異；抗-EMMPRIN單克隆抗體組和多西環(huán)素組之間無明顯差異(P0.05)�？�-EMMPRIN單克隆抗體組、多西環(huán)素組及聯(lián)合用藥組抑瘤率分別為37.58%、34.28%及40.35%。 3.CD147及MMP-2, MMP-9蛋白表達：對照組CD147蛋白陽性表達率為100%.MMP-2蛋白陽性表達率為100%,MMP-9蛋白陽性表達率為100%�？�-EMMPRIN單克隆抗體組CD147蛋白陽性表達率為25%, MMP-2蛋白陽性表達率為12.5%,MMP-9蛋白陽性表達率為12.5%。多西環(huán)素組CD147蛋白陽性表達率為50%,MMP-2蛋白陽性表達率為50%,MMP-9蛋白陽性表達率為50%。聯(lián)合用藥組CD147蛋白陽性表達率為12.5%,MMP-2蛋白陽性表達率為12.5%,MMP-9蛋白陽性表達率為12.5%。 結(jié)論： 1.抗-EMMPRIN單克隆抗體及多西環(huán)素均能夠抑制Tca8113細胞增殖及裸鼠舌鱗癌移植瘤的生長,二者聯(lián)合抑制效果更強。 2.抗-EMMPRIN單克隆抗體及多西環(huán)素均能夠降低裸鼠舌鱗癌移植瘤內(nèi)CD147及MMP-2, MMP-9蛋白表達,二者聯(lián)合用藥后CD147及MMP-2, MMP-9蛋白的表達更弱。CD147蛋白表達下調(diào),則MMP-2, MMP-9蛋白表達亦下調(diào)。
【學(xué)位單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2012
【中圖分類】：R739.86
【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
中英文縮略表
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
致謝

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 韓金利,謝文練,黃健,姚友生;人膀胱癌組織中細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子的表達[J];癌癥;2003年11期

2 劉斌;曹云新;關(guān)素敏;吳軍正;王哲;;PTEN基因聯(lián)合多西環(huán)素對黏液表皮樣癌細胞增殖的影響[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2010年01期

3 余曉玲,米力,姚西英,陳志南;擴張柱床吸附層析與固定柱床層析純化單克隆抗體的比較[J];中國生物工程雜志;2003年01期

4 張慶詩,劉斌,楊連甲,陳希哲,陳琰;強力霉素對腺樣囊性癌細胞系SAcc83增殖及侵襲行為的影響[J];實用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2001年06期

5 張英;康媛媛;;VEGF、DEX對舌鱗癌細胞株MMP-9表達及侵襲力的影響[J];實用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2007年06期

6 黃志權(quán);李勁松;陳偉良;李海剛;潘朝斌;王建廣;;細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子表達與唾液腺腫瘤侵襲性的關(guān)系[J];中國口腔頜面外科雜志;2007年04期

7 徐海濤;杜杰;董新舒;;Doxycycline抑制大腸癌LS174T細胞侵襲的體外實驗研究[J];中國腫瘤臨床;2007年11期

8 謝兆蘭;朱尤慶;林小玲;湯小燕;;強力霉素對胃癌細胞SGC-7901基質(zhì)金屬蛋白酶-2和基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子-2表達的影響[J];胃腸病學(xué);2006年04期

本文編號：2869991