目的: 口腔白斑(oral leukoplakia,OLK)是指“口腔粘膜上以白色病變?yōu)橹鞯膿p害,不具有其他任何可定義的損害特征;一部分口腔白斑可轉(zhuǎn)化為癌”。OLK屬于癌前病變,有轉(zhuǎn)化為口腔鱗狀細胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)的潛能,其主要病理改變是上皮異常增生。研究表明有4%-40%的病人會發(fā)生癌變,其轉(zhuǎn)化為口腔鱗狀細胞癌的風險比正常人高50到100倍。其轉(zhuǎn)化是一個受多因素影響的多階段、多步驟的復雜過程,口腔鱗狀細胞癌是口腔頜面部最常見的惡性腫瘤。KGF(keratinocyte growth factor)一般由間充質(zhì)源性細胞分泌,上皮細胞表達其相應的受體——KGFR(Keratinocyte growth factor receptor)。Bcl-2(B-CellLymphoma/Leukemia 2)基因是一種原癌基因,是最早被認識的抗凋亡基因。有實驗發(fā)現(xiàn)角質(zhì)細胞生長因子在腫瘤的發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移中可能發(fā)揮一定作用,最近的研究證實了KGF具有抑制上皮細胞凋亡的生物學作用,并且KGFR與Bcl-2的共表達無論在細胞水平還是在組織水平都有非常緊密的聯(lián)系。課題組前期實驗研究表明,KGF mRNA及蛋白在正�？谇徽衬そM、OLK組及OSCC組的上皮細胞和結(jié)締組織中的表達分別依次增加。本實驗通過免疫組化技術(shù)檢測正�？谇徽衬�、OLK、OSCC組織中KGFR,Bcl-2蛋白的表達,以研究其在三種不同組織中的變化規(guī)律,探討其在癌變過程中與細胞凋亡的聯(lián)系及意義,為臨床上阻斷白斑的癌變以及預防、治療OLK和OSCC提供新的思路。 方法: 1.收集臨床及病理確診的口腔正常粘膜、OLK及OSCC標本共25例,將每個標本的連續(xù)切片分別進行HE染色、KGFR及Bcl-2免疫組化分析和陰性對照,根據(jù)免疫組化結(jié)果從蛋白水平觀察KGFR、Bcl-2在不同組織中的表達情況。 2.對免疫組化的結(jié)果進行圖像分析:切片輸入圖像分析系統(tǒng),對表達強度進行半定量分析。每張切片計算5個高倍視野下總陽性細胞數(shù),并取其均數(shù);同時自切片染色的中心區(qū)域上下左右各選擇相同面積有代表性的區(qū)域,檢測平均光密度(optical density,OD)。 3.統(tǒng)計學分析圖像系統(tǒng)分析KGFR,Bcl-2蛋白光密度值,結(jié)果以均數(shù)和標準差((?)±s)描述。顯著性檢驗采用單因素方差分析,組間比較采用q檢驗。P＜0.05有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果: 1.KGFR免疫組化結(jié)果顯示:在正�？谇徽衬ぶ�,KGFR在上皮細胞的陽性表達主要位于棘層及顆粒層細胞胞膜和部分胞質(zhì)中,其染色略淺。在OLK組織中,KGFR在全層上皮細胞胞膜、部分細胞胞質(zhì)中陽性表達,在顆粒層的表達最強,呈強陽性表達,其次為棘層,其染色較正常粘膜的上皮細胞染色要深。在OSCC組織中,KGFR在全層上皮島細胞胞膜、細胞胞質(zhì)和角化珠中強陽性表達。染色程度較OLK組增強。 2.Bcl-2免疫組化結(jié)果顯示:在正�？谇徽衬ぶ�,Bcl-2在上皮細胞的陽性表達主要位于基底層細胞的胞質(zhì)和核膜。在OLK組織中,Bcl-2在上皮細胞的表達與在正�？谇徽衬ど掀ぜ毎械谋磉_相似,但其染色較正常粘膜的上皮細胞染色要深。在OSCC組織中,Bcl-2在全層上皮細胞胞質(zhì)和核膜中陽性表達,在基底層的表達最強,其余各層表達較弱。染色程度較OLK組增強。 3.免疫組化平均光密度(OD)檢測:正�？谇徽衬そM、OLK組及OSCC組中的KGFR和Bcl-2平均光密度依次增加,組間兩兩比較均有顯著性差異(P＜0.05)。 結(jié)論: KGFR與Bcl-2蛋白在正�？谇徽衬そM、OLK組及OSCC組的表達分別依次增加。課題組前期實驗研究表明,KGF mRNA及蛋白在正�？谇徽衬そM、OLK組及OSCC組的上皮細胞和結(jié)締組織中的表達分別依次增加。提示KGF及KGFR在口腔白斑癌變的發(fā)生發(fā)展過程中可能發(fā)揮一定的作用——不僅可以促進上皮細胞的增殖和分化還有可能通過上調(diào)Bcl-2的表達來抑制上皮細胞的凋亡,為臨床上阻斷白斑的癌變以及預防、治療OLK和OSCC提供新的思路。
【學位單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2009
【中圖分類】：R781.5;R739.8
【部分圖文】：

陽性(SPX100)陽性(SpX200)圖9OSCC組織KGFR免疫組化染色呈陽性(SPX400)圖10OSCC組織KGFR免疫組化染色呈陽性(SPX400)

圖13正�？谇徽衬cl一2免疫組化染色呈弱陽性 (SPX100)圖14正常口腔粘膜Bcl一2免疫組化染色呈弱陽性 (sPX200)廠一~一寧:夕，萬圖巧正�？谇徽衬cl一2免疫組化染圖 16OLK組織Bel一2免疫組化染色

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本文編號：2868411