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烏魯木齊市維吾爾族不同齲敏感兒童變形鏈球菌臨床分離株黏附、產(chǎn)糖及相關(guān)基因多態(tài)性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-10-21 16:23
   目的:通過(guò)比較烏魯木齊市維吾爾族不同齲敏感兒童變形鏈球菌臨床分離株黏附及合成胞外多糖能力的差異,以及其黏附相關(guān)基因spaP-a,spaP-c,spaP-pv和糖代謝相關(guān)基因gtfB,gtfC,Srv~+遺傳多態(tài)性的比較,探討高齲和無(wú)齲兒童致齲能力差異的相關(guān)機(jī)制。方法:1.利用酶標(biāo)儀檢測(cè)高齲組(dmft≥5)和無(wú)齲組(dmft=0)變形鏈球菌在牛心腦浸粉液體培養(yǎng)基中對(duì)玻壁的黏附情況。2.分別對(duì)高黏附組和低黏附組變鏈菌表面蛋白A區(qū)、PV區(qū)、C末端編碼基因spaP-a,spaP-c,spaP-pv經(jīng)限制性內(nèi)切酶HaeⅢ、AluⅠ酶切分型,利用PCR-RFLP比較各基因型在兩組細(xì)菌中的分布情況。3.采用蒽酮法測(cè)定高齲組與無(wú)齲組變鏈菌在生物膜狀態(tài)下合成胞外多糖的量。4.對(duì)合成水不溶性葡聚糖較高組和較低組變鏈菌葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶編碼基因gtfB、gtfC,以及表面蛋白可變區(qū)V區(qū)編碼基因SrV~+,經(jīng)限制性內(nèi)切酶BsrⅠ、SsPⅠ、DdeⅠ進(jìn)行酶切分型,利用PCR-RFLP比較各基因型在兩組細(xì)菌中的分布情況。結(jié)果:1.高齲組變鏈菌玻壁黏附比率平均為(33.928.79)%,高于無(wú)齲組(27.537.45)%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2. spaP-a經(jīng)HaeⅢ酶切后出現(xiàn)兩種基因型,且在不同黏附力菌株間的分布不同(P<0.05)。spaP-c,spaP-pv經(jīng)AluⅠ酶切后均表現(xiàn)為同一基因型。3.高齲組合成水不溶性葡聚糖量平均為0.33330.0479mg/ml,高于無(wú)齲組0.23560.0507mg/ml,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);高齲及無(wú)齲組變鏈菌臨床菌株生物膜狀態(tài)下合成水不溶性葡聚糖量為0.33110.0576mg/ml高于水溶性葡聚糖量0.25780.0632mg/ml,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。4. gtfB、gtfC經(jīng)BsrⅠ和SsPⅠ酶切后分別表現(xiàn)出三種和兩種基因型,gtfB在WIG合成量較高和較低的菌株中分布不同(P<0.05);SrV~+經(jīng)DdeⅠ后出現(xiàn)四種基因型,且四種基因型在兩組菌株的構(gòu)成情況不同(P<0.05)。測(cè)序證實(shí)spaP-a、gtfB、SrV~+基因的特異性堿基突變引起酶切位點(diǎn)改變而產(chǎn)生基因多態(tài)性。結(jié)論:維吾爾族不同齲敏感兒童變鏈菌臨床分離株黏附及合成胞外多糖能力不同,spaP-a、gtfB、SrV~+表現(xiàn)出的遺傳多態(tài)性可能是導(dǎo)致兩組變鏈菌黏附能力與合成胞外多糖能力差異的原因之一。為進(jìn)一步研究維吾爾族不同齲敏感兒童致齲性差異的機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
【學(xué)位單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2012
【中圖分類】:R788.1
【文章目錄】:
中英文縮略詞對(duì)照表
摘要
Abstract
前言
內(nèi)容與方法
    1 材料和儀器
    2 內(nèi)容與方法
        2.1 制備菌懸液
        2.2 維吾爾族高齲、無(wú)齲兒童變鏈菌臨床分離株形成黏附能力的比較
        2.3 變鏈菌不同黏附能力菌株表面蛋白遺傳多態(tài)性的比較
        2.4 維吾爾族不同齲敏感兒童變鏈菌臨床分離株生物膜狀態(tài)下合成胞外多糖能力的比較
        2.5 變鏈菌不同葡聚糖合成能力菌株 gtfB、gtfC 基因以及表面蛋白可變區(qū) SrV~+遺傳多態(tài)性的比較
    3 質(zhì)量控制
    4 統(tǒng)計(jì)分析方法
    附技術(shù)路線圖
結(jié)果
討論
小結(jié)
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
導(dǎo)師評(píng)閱表

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2850346

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