燃煤型氟斑牙大鼠切牙成釉細(xì)胞顯微、亞顯微結(jié)構(gòu)觀察及TGF-β1、Smad4的表達(dá)研究

發(fā)布時間：2020-10-15 03:22

　　目的：通過建立燃煤型氟斑牙大鼠模型,觀察SD大鼠食用含氟煤烘玉米后牙齒成釉細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生的改變,以及氟對大鼠牙齒發(fā)育過程中細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子TGF-β1、Smad4在成釉細(xì)胞中表達(dá)的影響,探討燃煤型氟斑牙發(fā)生的分子機(jī)制和預(yù)防控制措施。方法：選取80只SD大鼠,雌雄各半,隨機(jī)分為8組,每組10只,雌雄各5只,分籠喂養(yǎng),自由飲食,分別為： (1)低氟組：飼以含氟量為30mg/kg的玉米,配以面粉、豆粉、魚粉、骨粉、麥麩和食鹽； (2)低氟偏食組：飼以含氟量為30mg/kg的玉米,配以面粉、豆粉和食鹽； (3)中氟組：飼以含氟量為56mg/kg的玉米,配以面粉、豆粉、魚粉、骨粉、麥麩和食鹽； (4)中氟偏食組：飼以含氟量為56mg/kg的玉米,配以面粉、豆粉和食鹽； (5)高氟組：飼以含氟量為88mg/kg的玉米,配以面粉、豆粉、魚粉、骨粉、麥麩和食鹽； (6)高氟偏食組：飼以含氟量為88mg/kg的玉米,配以面粉、豆粉和食鹽； (7)飲水加氟組：予飲用100mg/L的氟化鈉水溶液,玉米不含氟,配以面粉、豆粉、魚粉、骨粉、麥麩和食鹽； (8)正常飲食組：飲水和玉米均不含氟,配以面粉、豆粉、魚粉、骨粉、麥麩和食鹽; 觀察到大鼠切牙出現(xiàn)明顯的氟斑牙體征后(約3個月),斷頸處死大鼠,利用HE染色、透射電鏡觀察大鼠切牙成釉細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu),免疫組織化學(xué)技術(shù)觀察成釉細(xì)胞中TGF-β1、Smad4的表達(dá)。結(jié)果：(1)HE染色結(jié)果：正常飲食組大鼠切牙成釉細(xì)胞從根端向切端由立方狀向高柱狀分化,釉質(zhì)成熟后又逐漸變矮,細(xì)胞排列整齊,胞核逐漸遠(yuǎn)離基底膜；實(shí)驗(yàn)組大鼠切牙成釉細(xì)胞排列紊亂,高度變矮,細(xì)胞扭曲變形,可見空泡性變,Tomes突不規(guī)則或消失。 (2)透射電鏡觀察：正常飲食組成釉細(xì)胞核卵圓,核膜完整,核仁明顯,細(xì)胞器發(fā)達(dá),胞質(zhì)中可見豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和核糖體,胞漿中有基質(zhì)小泡；中氟組成釉細(xì)胞體積變小,細(xì)胞器減少,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹,線粒體部分腫脹、嵴消失,出現(xiàn)較多的空泡性變,核膜不完整,核仁固縮體積縮小；高氟組細(xì)胞器溶解消失,線粒體腫脹空泡化嚴(yán)重,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹明顯,核膜斷裂,常染色質(zhì)片狀溶解,異染色質(zhì)邊聚,核仁碎裂消失。 (3)免疫組化觀察：TGF-β1、Smad4均在細(xì)胞漿表達(dá),與正常組相比,實(shí)驗(yàn)組成釉細(xì)胞各期表達(dá)均下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論：過量氟可引起大鼠切牙成釉細(xì)胞排列紊亂,高度變矮,細(xì)胞器減少等形態(tài)結(jié)構(gòu)改變。細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子TGF-β1、Smad4表達(dá)下調(diào),提示過量氟可能通過抑制TGF-β1、Smad4的表達(dá),干擾細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的不同環(huán)節(jié),進(jìn)而影響成釉細(xì)胞的增殖分化和釉基質(zhì)的合成分泌,導(dǎo)致牙齒出現(xiàn)氟斑牙的一系列病理改變。
【學(xué)位單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2010
【中圖分類】：R780.2
【部分圖文】：

成釉細(xì)胞,飲水加氟

圖1正常飲食組大鼠切牙成釉細(xì)胞(HEX400)FiglAmeloblastofineisorinnonnaldietgrouP(HEx400)圖2飲水加氟組大鼠切牙成釉細(xì)胞(HEX400)FigZAmeloblastofincisorindrinkingfluorinatedwatergroup(HEx4oo)

飲水加氟,成釉細(xì)胞