舌鱗狀細(xì)胞癌(Tongue squamous cell carcinoma)是口腔頜面部最常見(jiàn)的惡性腫瘤;一般惡性程度較高,生長(zhǎng)快,浸潤(rùn)性較強(qiáng);容易侵犯舌肌,導(dǎo)致舌運(yùn)動(dòng)受限,從而影響進(jìn)食、吞咽、言語(yǔ)等口腔功能[1]。目前該病治療手段傳統(tǒng)上主要采取手術(shù)切除、放療和化療。雖然臨床上大多數(shù)病例采取這些手段進(jìn)行治療,但一些其它治療措施也在深入研究之中,已獲得更好的效果。 越來(lái)越多的證據(jù)表明,在眾多的影響因素中,血管生是影響腫瘤轉(zhuǎn)移及生長(zhǎng)的關(guān)鍵因子。而血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)作為促進(jìn)血管新生最重要的因子,在腫瘤生長(zhǎng)中扮演著極其重要的角色。因而,學(xué)者們嘗試應(yīng)用VEGF單克隆抗體來(lái)拮抗VEGF的作用,以抑制惡性腫瘤生長(zhǎng),并獲得了一定效果。但VEGF單克隆抗體對(duì)口腔頜面部癌瘤,尤其是舌鱗狀細(xì)胞癌的抑制作用,國(guó)內(nèi)外研究較少,其抑制效果有待進(jìn)一步深入探索。本研究正是基于上述研究現(xiàn)狀,通過(guò)體外、體內(nèi)兩方面實(shí)驗(yàn)來(lái)探討VEGF單克隆抗體對(duì)舌鱗狀細(xì)胞癌Tca-8113的抑制作用及其效應(yīng)機(jī)制,為今后其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),并為舌鱗狀細(xì)胞癌的基因及藥物治療提供新的思路和理論基礎(chǔ)。 目的: 探討VEGF單克隆抗體對(duì)體外舌鱗癌細(xì)胞Tca-8113及體內(nèi)移植瘤生長(zhǎng)的抑制效果,并闡明其作用機(jī)制,為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 材料與方法: 體外培養(yǎng)舌鱗癌Tca-8113細(xì)胞,分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組;實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞用VEGF單克隆抗體處理。于不同時(shí)間點(diǎn)應(yīng)用MTT實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞儀、Real-time PCR對(duì)細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、VEGF表達(dá)分別進(jìn)行檢測(cè)。以證實(shí)VEGF單克隆抗體在體外對(duì)舌鱗狀細(xì)胞癌Tca-8113的抑制作用,并闡明其作用機(jī)理。同時(shí)應(yīng)用培養(yǎng)的Tca-8113細(xì)胞,建立裸鼠皮下移植瘤模型(N=10)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為2組:實(shí)驗(yàn)組應(yīng)用VEGF單克隆抗體進(jìn)行瘤體注射,對(duì)照組注射生理鹽水,持續(xù)28天。檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)腫瘤體積、動(dòng)物體重以及動(dòng)物處死時(shí)瘤體重量;并對(duì)腫瘤組織內(nèi)VEGF表達(dá)進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測(cè)。通過(guò)上述實(shí)驗(yàn),進(jìn)一步證實(shí)VEGF單克隆抗體在體內(nèi)對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用,以及VEGF單克隆抗體通過(guò)拮抗VEGF表達(dá),減少腫瘤內(nèi)血管的生成來(lái)發(fā)揮腫瘤抑制作用的效應(yīng)機(jī)制。 結(jié)果: (1)MTT結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組(VEGF單克隆處理組)細(xì)胞增殖率顯著低于對(duì)照組(p0.01); (2)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞周期分布均發(fā)生明顯變化,實(shí)驗(yàn)組G2期細(xì)胞(7.393±0.323)顯著多于對(duì)照組(2.733±0.055)(p0.01); (3)Real-time PCR結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組VEGF mRNA水平顯著低于對(duì)照組(p0.01)。 (4)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明,實(shí)驗(yàn)組(VEGF單克隆處理組)移植瘤體積顯著低于對(duì)照組(p0.01),腫瘤最終重量低于對(duì)照組(p0.05),VEGF表達(dá)的平均灰度值明顯高于對(duì)照組(p0.05)。 結(jié)論: (1)VEGF單克隆抗體在體外可顯著抑制舌鱗癌細(xì)胞增殖、改變細(xì)胞周期、下調(diào)VEGF的表達(dá); (2)VEGF單克隆抗體可顯著抑制體內(nèi)移植瘤的生長(zhǎng),降低VEGF在瘤組織中的表達(dá); (3)VEGF單克隆抗體可通過(guò)直接抑制腫瘤細(xì)胞及減少瘤體內(nèi)血管生成來(lái)發(fā)揮對(duì)腫瘤的抑制作用。
【學(xué)位單位】：華北煤炭醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2010
【中圖分類】：R739.88
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研究論文 VEGF 單克隆抗體對(duì)人舌癌細(xì)胞Tca-8113 及移植瘤的生長(zhǎng)影響
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    不足與展望
    參考文獻(xiàn)
綜述 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與腫瘤生長(zhǎng)的關(guān)系
    參考文獻(xiàn)
致謝
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