目的將不同濃度的骨髓基質(zhì)細(xì)胞(BMSCs)與膠原膜BME-10X復(fù)合培養(yǎng),體外構(gòu)建組織工程化復(fù)合物,對復(fù)合物體內(nèi)外成骨能力進(jìn)行比較研究,并將復(fù)合物移植修復(fù)SD大鼠牙周缺損,探討不同濃度BMSCs對牙周組織再生的影響,為深入開展牙周組織工程研究奠定基礎(chǔ)。 方法1.將體外培養(yǎng)的BMSCs分別以5×10~5/mL、5×10~6/mL和5×10~7/mL濃度接種于60mm培養(yǎng)皿,觀察礦化結(jié)節(jié)形成時間;分別與膠原膜復(fù)合培養(yǎng),比較2d、5d、7d的堿性磷酸酶(ALP)活性。2.將BMSCs分別以5×10~5/mL、5×10~6/mL和5×10~7/mL濃度與膠原膜復(fù)合培養(yǎng)后植入裸鼠皮下,8w后取材,HE及I型膠原免疫組化染色,觀察其體內(nèi)成骨能力。3.將BMSCs以5×10~5/mL、5×10~6/mL和5×10~7/mL濃度與膠原膜復(fù)合培養(yǎng)后,復(fù)合物和空白膠原膜分別植入人工制備的SD大鼠牙周急性缺損部位,并覆蓋e-PTFE膜,以缺損處只覆蓋e-PTFE膜為對照組,4w后取材,HE染色觀察牙周組織再生情況。 結(jié)果1.細(xì)胞接種濃度越高,形成礦化結(jié)節(jié)的時間就越短;ALP活性隨復(fù)合培養(yǎng)時間的延長而增加,5×10~7/mL與5×10~6/mL、5×10~5/mL濃度組間ALP含量有顯著差異(P＜0.05),而5×10~6/mL與5×10~5/mL組間則無顯著差別(P＞0.05)。2.實驗組和對照組均有不同程度I型膠原的表達(dá),5×10~6/mL和5×10~7/mL組高于對照組和5×10~5/mL組(P＜0.05),而5×10~6/mL與5×10~7/mL組、對照組與5×10~5/mL組之間無顯著型差異(P＞0.05)。3.實驗組和對照組均可見不同程度的牙周組織再生,各實驗組新生牙槽骨面積與對照組相比有明顯增加(P＜0.05),5×10~6/mL和5×10~7/mL組的新生牙槽骨量與5×10~5/mL和空白BME-10X組相比差異有顯著性(P＜0.05),而前兩組和后兩組組間比較則無顯著性差異(P＞0.05);各組新生牙骨質(zhì)面積之間無顯著性差異(P＞0.05)。 結(jié)論BMSCs濃度可影響其體內(nèi)及體外成骨能力,濃度越高成骨能力就越強(qiáng)。高濃度BMSCs能有效促進(jìn)牙周組織再生。
【學(xué)位單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R78
【部分圖文】：

層生長的BMSCs，相互呈網(wǎng)狀。(圖l一3)找喇雀利訓(xùn)

本文編號：2830035