[目的]建立SD大鼠TMJOA動(dòng)物模型,并對(duì)髁突組織學(xué)改變進(jìn)行評(píng)價(jià)。檢測(cè)HIF-1α、OPN在髁突軟骨中的表達(dá)變化,探討HIF-1α、OPN在大鼠TMJOA中的作用,為TMJOA發(fā)病機(jī)制的研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。[方法]8周齡雄性SD大鼠,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,通過在大鼠右上第一磨牙牙面粘接正畸絲造成咬合創(chuàng)傷的辦法建立TMJOA動(dòng)物模型。建模后1w、2w、4w、6w、8w、10w分批處死動(dòng)物(實(shí)驗(yàn)組每組5只,對(duì)照組2只),取雙側(cè)髁突經(jīng)過固定,脫鈣,脫水,包埋后制作石蠟切片。HE及TRAP染色后進(jìn)行髁突軟骨Mankin組織評(píng)分,軟骨下骨骨形態(tài)計(jì)量分析以及骨軟骨交界處破骨細(xì)胞計(jì)數(shù);免疫組化染色檢測(cè)建模后不同時(shí)間點(diǎn)SD大鼠髁突軟骨中HIF-1α、OPN的表達(dá)變化,比較實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組以及實(shí)驗(yàn)側(cè)與非實(shí)驗(yàn)側(cè)之間的差別。[結(jié)果]1.HE染色結(jié)果:Mankin組織評(píng)分結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組中實(shí)驗(yàn)側(cè)建模后2w,非實(shí)驗(yàn)側(cè)建模后4w出現(xiàn)TMJOA早期病變,表現(xiàn)為軟骨細(xì)胞彌漫性增多,各層次輕度紊亂,分界不清;軟骨表面凹凸不平,增殖層內(nèi)出現(xiàn)裂隙及無細(xì)胞區(qū)。軟骨下骨組織形態(tài)改變:實(shí)驗(yàn)側(cè)Tb.Th、Tb.Sp、BV/TV、Tb.N分別在建模后1w、2w、4w、10w高于對(duì)照組(P0.05)。非實(shí)驗(yàn)側(cè):BV/TV建模后4w低于對(duì)照組(P0.05);Tb.Sp建模后2w高于對(duì)照組(P0.05);Tb.Th、Tb.N建模后8w高于對(duì)照組(P0.05)。實(shí)驗(yàn)組中實(shí)驗(yàn)側(cè)與非實(shí)驗(yàn)側(cè)在8w、10w差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.TRAP染色結(jié)果:與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)側(cè)建模后1w,非實(shí)驗(yàn)側(cè)建模后2w破骨細(xì)胞數(shù)量增多(P0.05),8w達(dá)最大值。實(shí)驗(yàn)側(cè)與非實(shí)驗(yàn)側(cè)在1w差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.免疫組化結(jié)果顯示:HIF-1α,OPN主要在肥大軟骨層及鈣化軟骨層細(xì)胞核及其胞質(zhì)中表達(dá)。與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)側(cè)HIF-1α陽(yáng)性表達(dá)在建模后2w明顯增強(qiáng)(P0.05),4w、8w 降低(P0.05),1w、6w、10w 無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。非實(shí)驗(yàn)側(cè)HIF-1α在建模后2w高于對(duì)照組(P0.05),6w降低(P0.05),1w、4w、8w、10w無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。HIF-1α在建模后2w實(shí)驗(yàn)側(cè)高于非實(shí)驗(yàn)側(cè)(P0.05),4w低于非實(shí)驗(yàn)側(cè)(P0.05)。與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)側(cè)OPN陽(yáng)性表達(dá)在建模后1w明顯升高,2w降低,4w、6w升高,8w、10w降低(P0.05)。非實(shí)驗(yàn)側(cè)2w降低,4w升高,6w、10w降低(P0.05)。實(shí)驗(yàn)側(cè)與非實(shí)驗(yàn)側(cè)相比,實(shí)驗(yàn)側(cè)OPN表達(dá)在6w高于非實(shí)驗(yàn)側(cè),8w低于非實(shí)驗(yàn)側(cè)(P0.05)。[結(jié)論]1.本實(shí)驗(yàn)通過在SD大鼠牙面上粘接正畸絲成功建立了 TMJOA動(dòng)物模型。髁突軟骨及軟骨下骨均發(fā)生了病理改變,表現(xiàn)為髁突軟骨層細(xì)胞分層紊亂,軟骨裂隙出現(xiàn),細(xì)胞減少及增生性聚集;軟骨下骨破骨細(xì)胞數(shù)量增加,骨改建活躍。2.TMJOA中HIF-1α、OPN主要表達(dá)于肥大層及鈣化軟骨層細(xì)胞核及胞質(zhì)中,參與了髁突軟骨的改建。
【學(xué)位單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R782.6
【部分圖文】：

逡逑圖１－１實(shí)驗(yàn)材料邐圖卜２粘接用正畸絲逡逑Ｉ邋、一＾邐＿逡逑圖１－３麻醉后ＳＤ大鼠邐圖１－４粘接后情況逡逑％－丨丨．＿邋哪逡逑圖１－５粘接模型圖邐圖１－６粘接完成圖逡逑２．２石蠟切片制作逡逑２．２．１取材及固定逡逑分別于建模術(shù)后ｌｗ、２ｗ、４ｗ、６ｗ、８ｗ、１０ｗ處死ＳＤ大鼠。實(shí)驗(yàn)前一天逡逑大鼠禁食、當(dāng)天禁水，通過腹腔注射過量１０％水合氯醛處死ＳＤ大鼠。通過開閉逡逑口運(yùn)動(dòng)捫觸到ＴＭＪ所在位置，用標(biāo)記筆做標(biāo)記。消毒術(shù)區(qū)后用眼科剪從大鼠口逡逑角Ｋ剪開皮膚，沿咬肌區(qū)向所標(biāo)記部位分離解剖，待大鼠ＴＭＪ完全曝露后，逐逡逑層剪開關(guān)節(jié)周圍附著的肌肉和筋膜，分離取出左右兩側(cè)髁突。生理鹽水沖洗，以逡逑１３逡逑

逡逑圖１－１實(shí)驗(yàn)材料邐圖卜２粘接用正畸絲逡逑Ｉ邋、一＾邐＿逡逑圖１－３麻醉后ＳＤ大鼠邐圖１－４粘接后情況逡逑％－丨丨．＿邋哪逡逑圖１－５粘接模型圖邐圖１－６粘接完成圖逡逑２．２石蠟切片制作逡逑２．２．１取材及固定逡逑分別于建模術(shù)后ｌｗ、２ｗ、４ｗ、６ｗ、８ｗ、１０ｗ處死ＳＤ大鼠。實(shí)驗(yàn)前一天逡逑大鼠禁食、當(dāng)天禁水，通過腹腔注射過量１０％水合氯醛處死ＳＤ大鼠。通過開閉逡逑口運(yùn)動(dòng)捫觸到ＴＭＪ所在位置，用標(biāo)記筆做標(biāo)記。消毒術(shù)區(qū)后用眼科剪從大鼠口逡逑角Ｋ剪開皮膚，沿咬肌區(qū)向所標(biāo)記部位分離解剖，待大鼠ＴＭＪ完全曝露后，逐逡逑層剪開關(guān)節(jié)周圍附著的肌肉和筋膜，分離取出左右兩側(cè)髁突。生理鹽水沖洗，以逡逑１３逡逑

逡逑圖１－１實(shí)驗(yàn)材料邐圖卜２粘接用正畸絲逡逑Ｉ邋、一＾邐＿逡逑圖１－３麻醉后ＳＤ大鼠邐圖１－４粘接后情況逡逑％－丨丨．＿邋哪逡逑圖１－５粘接模型圖邐圖１－６粘接完成圖逡逑２．２石蠟切片制作逡逑２．２．１取材及固定逡逑分別于建模術(shù)后ｌｗ、２ｗ、４ｗ、６ｗ、８ｗ、１０ｗ處死ＳＤ大鼠。實(shí)驗(yàn)前一天逡逑大鼠禁食、當(dāng)天禁水，通過腹腔注射過量１０％水合氯醛處死ＳＤ大鼠。通過開閉逡逑口運(yùn)動(dòng)捫觸到ＴＭＪ所在位置，用標(biāo)記筆做標(biāo)記。消毒術(shù)區(qū)后用眼科剪從大鼠口逡逑角Ｋ剪開皮膚，沿咬肌區(qū)向所標(biāo)記部位分離解剖，待大鼠ＴＭＪ完全曝露后，逐逡逑層剪開關(guān)節(jié)周圍附著的肌肉和筋膜，分離取出左右兩側(cè)髁突。生理鹽水沖洗，以逡逑１３逡逑

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2811858