【摘要】：甲狀旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)由甲狀旁腺主細(xì)胞合成分泌,調(diào)節(jié)鈣磷代謝、維持機(jī)體鈣平衡的主要激素之一。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn),甲狀旁腺激素在局部骨組織改建、再生等一系列過(guò)程中發(fā)揮了關(guān)鍵性的重要作用[1-3],對(duì)于骨骼具有促進(jìn)骨形成和增加骨吸收的雙向作用[4-6]。臨床上,重組人甲狀旁腺激素(1-34)[rhPTH(1-34)] -特立帕肽( Teriparatide Forteo,TPTD)于2002年經(jīng)美國(guó)FDA批準(zhǔn)用于治療絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥和原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥[7],其提高骨量、改善骨質(zhì)的作用已經(jīng)被大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床研究所證實(shí)。本研究擬在PTH基因敲除小鼠的基礎(chǔ)上,建立牙周病牙槽骨吸收及頜骨缺損的動(dòng)物模型,研究?jī)?nèi)源性PTH對(duì)牙周病牙槽骨吸收及頜骨缺損愈合過(guò)程的影響,為PTH用于預(yù)防和治療牙周病牙槽骨吸收、促進(jìn)牙槽骨及頜骨的再生修復(fù)提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 第一部分內(nèi)源性PTH在實(shí)驗(yàn)性小鼠牙周炎骨吸收中的作用 目的:探討內(nèi)源性甲狀旁腺素在實(shí)驗(yàn)性小鼠牙周炎骨吸收過(guò)程中的作用。 方法:取PTH基因敲除小鼠和野生型小鼠各20只,大腸桿菌內(nèi)毒素脂多糖牙齦局部注射法建立小鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎牙槽骨吸收模型,通過(guò)組織形態(tài)學(xué)、骨總膠原染色、耐酒石酸酸性磷酸酶染色等方法,比較分析甲狀旁腺激素基因敲除小鼠和野生型小鼠牙槽骨吸收程度的差異。 結(jié)果:與野生型小鼠相比,PTH基因敲除小鼠的牙周骨喪失值(PBL)、牙槽骨單位面積破骨細(xì)胞數(shù)(N.Oc/B.Pm)以及破骨細(xì)胞的總面積占牙槽骨總面積的百分比(Oc.S/B.S)則明顯增加,牙周單位面積骨量(BV/TV)%明顯降低。 結(jié)論:內(nèi)源性PTH對(duì)正常情況下小鼠牙槽骨的發(fā)生發(fā)育并無(wú)明顯影響,但對(duì)實(shí)驗(yàn)性牙周炎牙槽骨吸收有明顯的抑制作用。 第二部分內(nèi)源性PTH在實(shí)驗(yàn)性小鼠頜骨缺損愈合中的作用 目的:探討內(nèi)源性PTH在實(shí)驗(yàn)性小鼠頜骨缺損愈合過(guò)程中的作用。 方法:取PTH基因敲除小鼠和正�；蛐托∈蟾�30只,在左側(cè)下頜骨建立骨缺損模型,分別于術(shù)后5、7、10、14、21天處死小鼠并取下頜骨,通過(guò)影像學(xué)、組織形態(tài)學(xué)等方法,比較PTH基因敲除小鼠和野生型小鼠頜骨缺損愈合的差異。 結(jié)果:相同時(shí)間點(diǎn),PTH基因敲除小鼠下頜骨缺損區(qū)的X線平均灰度值明顯低于野生型小鼠組;組織學(xué)觀察,PTH基因敲除小鼠下頜骨缺損區(qū)纖維性骨痂和骨性骨痂形成時(shí)間均遲于野生型小鼠。 結(jié)論:內(nèi)源性PTH對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性下頜骨缺損的愈合有明顯的促進(jìn)作用。
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類(lèi)號(hào)】：R781.4
【圖文】：

南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文11) PCR 反應(yīng)產(chǎn)物電泳配制 2%瓊脂糖凝膠：稱取 0.5g 瓊脂糖，加入 50ml 的 TAE 緩沖液中，混勻，放入微波爐中加熱 5～7min，直至瓊脂糖完全融解，取出置通風(fēng)櫥中，冷卻至 65℃，加入 2μl 溴乙錠(EB)液，混勻，倒入預(yù)先準(zhǔn)備好的電泳槽中，立即插入梳子。待其完全冷卻時(shí)，拔出梳子，調(diào)整好凝膠方向并將凝膠置于 TAE 電泳緩沖液中。將 PCR 產(chǎn)物從水浴鍋中取出，向 PCR 管中加入 6×上樣緩沖液 5μl，混勻、離心后，取 12μl 加入已經(jīng)預(yù)制好的 2%瓊脂糖凝膠的上樣孔中，120V 電泳 10分鐘。將電泳后的凝膠拍照、存檔、記錄基因型(圖 1)。

3.2.2 用微量注射器（0-25μl）于小鼠左上頜第一磨牙頰、腭側(cè)齦溝處進(jìn)針，進(jìn)針深度約2mm，各注入2μl 濃度為5μg /μl 的內(nèi)毒素（lipopolysaccharide ,LPS）（Sigma公司，美國(guó)）。（圖2）圖2 左圖為L(zhǎng)PS試劑，右圖為在小鼠齦溝內(nèi)注射LPS。圖3 小鼠牙槽骨標(biāo)本的數(shù)碼照。16

小鼠牙槽骨標(biāo)本的數(shù)碼照

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 俞煥苗;下頜牙槽嵴增高術(shù)進(jìn)展[J];口腔醫(yī)學(xué);2004年01期

2 蔡慶華;北京市2191名老年人牙齒缺失和修復(fù)情況調(diào)查[J];臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志;1987年03期

本文編號(hào)：2780711