【摘要】：目的:盡管目前的癌癥治療方法不斷的進(jìn)步,但是癌癥患者經(jīng)過治療,如手術(shù)、術(shù)后輔助放療、聯(lián)合放化療及放療和靶向治療等,不良反應(yīng)仍令患者困擾痛苦�；煴挥米鬓D(zhuǎn)移性患者的姑息療法,對于癌癥仍需要開發(fā)新的合理的療法。新型磷鎂晶須具有優(yōu)秀的力學(xué)性能、彈性模量,在材料的增強(qiáng)補(bǔ)韌、抗菌、成骨、載藥等生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域都有廣泛應(yīng)用,但目前在抑癌方面研究仍顯不足。本研究通過一系列體外實(shí)驗(yàn),評價(jià)不同濃度的新型磷鎂晶須混懸液對舌鱗癌(Tca8113)細(xì)胞和小鼠成纖維(L-929)細(xì)胞的生長和凋亡的影響,對口腔鱗癌的治療進(jìn)行探索性研究。研究方法:1、將磷鎂晶須配制成1600ppm、1400ppm、1200ppm、1000ppm、800ppm這6組不同質(zhì)量濃度的稀釋混懸液,在孔板上進(jìn)行兩種細(xì)胞的接種和培養(yǎng)。2、采用CCK8法評價(jià)各組晶須對Tca 8113細(xì)胞和L-929細(xì)胞增殖的影響,計(jì)算相對增殖率以及進(jìn)行細(xì)胞毒性分析。3、倒置顯微鏡下觀察各組細(xì)胞形態(tài)學(xué)上的變化。4、通過FCM PI單染檢測兩種細(xì)胞周期水平,探究晶須濃度對其周期分布的影響。并對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。5、通過FCM AnnexinV FITC/PI雙染檢測晶須濃度對Tca 8113細(xì)胞和L-929細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果:1、CCK8結(jié)果表明隨晶須濃度增大兩種細(xì)胞增殖率減小,抑制率增大。當(dāng)晶須濃度小于1200ppm時(shí),對L-929細(xì)胞無毒性;晶須濃度小于1000ppm時(shí)對TCA8113細(xì)胞無毒性。所以晶須濃度為1200ppm時(shí)討論晶須抑癌性。2、從細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化上觀察,Tca 8113細(xì)胞經(jīng)不同刺激處理24h后,倒置顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn),晶須濃度1200ppm開始細(xì)胞形態(tài)變圓,細(xì)胞核濃縮,細(xì)胞凋亡。晶須濃度1400ppm、1600ppm時(shí)有細(xì)胞細(xì)胞膜破裂,有可能出現(xiàn)壞死。3、FCM測細(xì)胞周期結(jié)果,Tca 8113細(xì)胞實(shí)驗(yàn)組晶須濃度1200ppm組的細(xì)胞周期阻滯于G1期,G1期的細(xì)胞所占比例與對照Empty vector組相比明顯增大,而S期細(xì)胞比例明顯減小。說明此濃度晶須使Tca 8113細(xì)胞周期由G1期向S期轉(zhuǎn)化過程受到抑制,細(xì)胞周期進(jìn)程緩慢。而L-929細(xì)胞實(shí)驗(yàn)組1200ppm與其照組相比,G1期與S期幾乎沒有明顯改變。4、FCM測AnnexinV FITC/PI雙染實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示晶須濃度1200ppm時(shí)與陰性對照組相比,Tca 8113細(xì)胞早凋明顯增多,L-929細(xì)胞幾乎無影響。把Tca8113早期凋亡的細(xì)胞數(shù)目轉(zhuǎn)化為柱狀圖,其所占的百分比高達(dá)69.6%。結(jié)論:晶須濃度在1200ppm時(shí),可以最優(yōu)抑制舌鱗癌癌細(xì)胞生長,誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡,將癌細(xì)胞周期阻滯于G1期。而對正常體細(xì)胞生長、凋亡影響較弱。新型磷鎂晶須對口腔鱗狀細(xì)胞癌的防治是值得繼續(xù)探索的領(lǐng)域。
【學(xué)位授予單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R739.8
【圖文】：

-929細(xì)胞OD值隨共培養(yǎng)時(shí)間變化圖（CK為空白對照組，n=3）

圖 2 Tca 8113細(xì)胞 OD值隨共培養(yǎng)時(shí)間變化圖（CK 為空白對照組，n=3）*：Tca 8113 細(xì)胞，與其余各濃度組之間相比，P<0.001。下觀察

度晶須懸濁液處理 TCA8113細(xì)胞 24h后，熒光顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)學(xué)變組 ck b 800ppm c 1000ppm d 1200ppm e 1400ppm f 1600ppm。bar=50 μ胞儀檢測結(jié)果混懸液對細(xì)胞周期的影響用 FCM 對晶須處理細(xì)胞后進(jìn)行細(xì)胞周期的檢測，分析結(jié)果實(shí)驗(yàn)組晶須濃度 1200ppm 組的細(xì)胞周期阻滯于 G1 期，G1 期明顯增大，而 S 期細(xì)胞比例明顯減小（如圖 4）我們由此推

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2761157