【摘要】：目的 探討小白菊內(nèi)酯（parthenolide,Par）對體外培養(yǎng)的涎腺腺樣囊性癌（Adenoidcystic carcinoma of salivary gland，SACC）細胞系SACC-83的增殖抑制和誘導凋亡作用，闡明其在誘導凋亡過程中對NF-кB、Livin和Caspase-3蛋白表達的影響，并且分析其誘導凋亡的可能的作用機制。 方法 （1）倒置顯微鏡下觀察SACC-83細胞系在濃度為5.0mg/L的小白菊內(nèi)酯藥物24h作用前后的細胞形態(tài)的變化；（2）采用噻唑藍（MTT）法檢測小白菊內(nèi)酯6個不同濃度組干預SACC-83細胞24、48和72h后細胞的光吸收值（OD），繪制增殖抑制曲線圖；（3）碘化丙啶（PI）單染流式細胞術(shù)進行小白菊內(nèi)酯3個不同濃度（7.5、15.0和30.0mg/L）作用于SACC-83細胞系的細胞周期分析，觀察不同濃度小白菊內(nèi)酯作用24h后各組G_0/G_1期、S期及G_2/M期的細胞百分比分布；（4）流式細胞儀觀察AnnexinV-FITC/PI雙染后細胞凋亡狀況；（5）Western blot法檢測NF-КB、Livin及Caspaese-3蛋白的表達情況。計量資料采用(x±s)表示，采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析。 結(jié)果 （1）藥物作用后，形態(tài)學改變可見細胞變圓，變小，數(shù)量明顯減少，細胞膜完整；（2）小白菊內(nèi)酯能以時間、濃度依賴性方式抑制SACC-83細胞的增殖，24、48和72h的IC50分別為(60.23±7.41)、（27.44±5.45）和（8.73±5.02）mg/L；（3）經(jīng)3個不同濃度(7.5、15.0和30.0mg/L）濃度藥物作用24h后，與同期正常對照組比較，G_0/G_1期細胞比例均明顯增高，差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)，并且隨著藥物濃度而升高，S期細胞的比例逐漸降低，G_2/M期無明顯變化，細胞周期阻滯于G_0/G_1期；（4）經(jīng)3個不同濃度藥物作用24h后，小白菊內(nèi)酯能誘導SACC-83細胞凋亡，各組的凋亡率分別為14.7%±2.1%、30.5%±3.4%和38.7%±2.7%，與對照組凋亡率3.2%±0.9%相比，差異具有統(tǒng)計學意義（P0.05）；（5）Western blot法測得小白菊內(nèi)酯能下調(diào)SACC-83細胞中的NF-КB、Livin蛋白的表達，同時上調(diào)Caspase-3蛋白的表達，且各濃度組之間比較差異有統(tǒng)計學意義（P0.05）。 結(jié)論 小白菊內(nèi)酯能夠體外抑制SACC-83細胞的增殖，并使細胞大量累積于G_0/G_1期，小白菊內(nèi)酯誘導SACC-83細胞凋亡的機制可能與下調(diào)NF-КB、Livin蛋白的表達水平，活化Caspase-3蛋白的表達有關(guān)聯(lián)。
【學位授予單位】：遼寧醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R739.87

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本文編號：2728920