【摘要】：目的觀察并評(píng)價(jià)特異性抗牙齦卟啉單胞菌卵黃抗體(IgY)體外抑制牙周主要致病菌牙齦卟啉單胞菌生長(zhǎng)和減輕牙周組織炎癥程度的作用;為免疫防治慢性牙周炎探索新的解決途徑。 方法將提出純化出的抗牙齦卟啉單胞菌-IgY稀釋成2mg/ml,1mg/ml,0.5mg/ml,0.25mg/ml,0.125mg/ml和0.0625mg/ml 6個(gè)濃度,厭氧環(huán)境培養(yǎng)牙齦卟啉單胞菌國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC 33277,分別采用微量稀釋法和紙片擴(kuò)散法測(cè)定抗牙齦卟啉單胞-IgY的最小抑菌濃度和抑菌圈直徑大小,評(píng)價(jià)抗牙齦卟啉單胞菌-IgY體外抑菌的能力;采用雙層絲線結(jié)扎加牙齦卟啉單胞菌接種同時(shí)輔以高糖飲料的方法在7周內(nèi)建立大鼠的實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型,分為抗牙齦卟啉單胞菌-IgY組、米諾環(huán)素組、PBS組、模型組和空白對(duì)照組5組,待牙周炎模型形成后按實(shí)驗(yàn)分組情況分別給予治療,記錄實(shí)驗(yàn)期間大鼠體重、一般情況和探診深度、齦溝出血指數(shù)、松動(dòng)度等牙周臨床指標(biāo)的變化,每3天治療一次,連續(xù)治療4周后處死動(dòng)物取出上下頜骨,截取實(shí)驗(yàn)牙位進(jìn)行固定、脫礦、包埋、切片并行HE染色,觀察抗牙齦卟啉單胞菌-IgY治療的實(shí)驗(yàn)牙位在組織學(xué)上的變化,并比較抗牙齦卟啉單胞菌-IgY和臨床常用抗菌藥物米諾環(huán)素在治療效果上是否存在差異,評(píng)價(jià)抗牙齦卟啉單胞菌-IgY抑制慢性牙周炎、改善牙周組織炎癥的作用。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用配對(duì)t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析(SPSS 10.0),P0.05表示存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)果經(jīng)比較在不同濃度共培養(yǎng)下的菌液的OD值可測(cè)定抗牙齦卟啉單胞菌-IgY的最小抑菌濃度為0.5mg/ml;最大抑菌圈直徑可達(dá)15.16±0.33mm。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,大鼠生命體征平穩(wěn),無明顯的毒副反應(yīng)。分組治療后,抗牙齦卟啉單胞菌-IgY組和PBS對(duì)照組的各項(xiàng)牙周臨床指標(biāo)統(tǒng)計(jì)結(jié)果均存在顯著性差異(P0.05);和米諾環(huán)素組的各項(xiàng)牙周臨床指標(biāo)在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著性差異(P0.05),兩者在治療后牙周臨床癥狀均得到明顯改善,牙齦色形質(zhì)逐漸恢復(fù)正常,松動(dòng)度減小,提示了抗牙齦卟啉單胞菌-IgY可取得與米諾環(huán)素相似的臨床治療效果;病理學(xué)切片染色結(jié)果表明經(jīng)抗牙齦卟啉單胞菌-IgY治療后,牙周組織的炎癥得到了控制并存在一定的組織修復(fù)反應(yīng)。 結(jié)論抗牙齦卟啉單胞菌-IgY在體外可獲得良好的抑菌效果,用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物口腔內(nèi)可明顯改善實(shí)驗(yàn)牙位的牙周炎癥,且不會(huì)對(duì)受試對(duì)象產(chǎn)生毒副反應(yīng),是一種安全、有效的生物制劑。該種抗體在免疫防治牙周炎方面具有良好的發(fā)展前景。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R781.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2713761