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牽張力和Apelin單獨(dú)或聯(lián)合作用對MG-63成骨樣細(xì)胞增殖和分化的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-06-12 23:12
【摘要】:目的:探討牽張力和Apelin單獨(dú)或聯(lián)合作用對MG-63成骨樣細(xì)胞增殖分化的影響。 方法:取人成骨肉瘤MG-63細(xì)胞株復(fù)蘇、培養(yǎng)備用。采用根據(jù)四點(diǎn)彎曲加力原理設(shè)計(jì)的細(xì)胞加力裝置,加張應(yīng)力,大小分別為0、1000.2000.4000、6000、strain。在培養(yǎng)基中加或不加0-100nM的Apelin。對不同力值、不同時(shí)點(diǎn)、加或不加Apelin的MG-63細(xì)胞進(jìn)行分組。然后分別用α-磷酸奈酚法測定細(xì)胞內(nèi)的堿性磷酸酶活性(ALP); ELISA試劑盒測定釋放至培養(yǎng)基中的前膠原IC-端前肽(PICP),檢測Ⅰ型膠原的表達(dá);[3H]胸腺嘧啶摻入法對細(xì)胞增殖進(jìn)行檢測。 結(jié)果:當(dāng)應(yīng)變值為2000μstrain時(shí),牽張力對MG-63成骨樣細(xì)胞ALP活性、Ⅰ型膠原分泌和[3H]胸腺嘧啶的表達(dá)的促進(jìn)作用最強(qiáng)。12h內(nèi)牽張力呈時(shí)間依賴性上調(diào)ALP活性,之后緩慢下降;18h內(nèi)牽張力呈時(shí)間依賴性促進(jìn)Ⅰ型膠原分泌,之后緩慢減少。Apelin對MG-63成骨樣細(xì)胞的ALP活性和Ⅰ型膠原分泌無影響。不同濃度的Apelin可以促進(jìn)[3H]胸腺嘧啶的表達(dá),InM Apelin可起到顯著促進(jìn)作用。當(dāng)應(yīng)變?yōu)?000μstrain時(shí)加力3h時(shí),加不同濃度的Apelin,ALP的活性和Ⅰ型膠原的分泌與單純加力組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而[3H]胸腺嘧啶的表達(dá)與單純加Apelin組相比顯著增加,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論:適宜的牽張力刺激可以促進(jìn)MG-63成骨樣細(xì)胞的增殖分化,Apelin可以促進(jìn)MG-63成骨樣細(xì)胞的增殖,但對其分化并無影響。二者可以協(xié)同加強(qiáng)促進(jìn)MG-63成骨樣細(xì)胞的增殖,但對其分化無協(xié)同加強(qiáng)作用。
【圖文】:

示意圖,裝置原理,加力裝置,示意圖


激th、3h、6h、12h、18h、24h。與APelin聯(lián)合作用時(shí),,選擇最激3h。細(xì)胞加力裝置:華西口腔醫(yī)學(xué)院與成都電子科技大學(xué)聯(lián)合開四點(diǎn)彎曲加力裝置,已獲兩項(xiàng)國家專利(專利號01129166449.X)。如下圖所示:

胸腺,機(jī)械應(yīng)變,促進(jìn)作用,細(xì)胞增殖


成骨樣細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果顯示牽張力刺激能不同程度促進(jìn)口H]胸腺啼綻摻入量增加,當(dāng)應(yīng)變?yōu)?000件strain時(shí)促進(jìn)作用最為顯著。隨著牽張力值的增大、這種促進(jìn)作用逐漸減小。(圖3)乃的勻巧

本文編號:2710245

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