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硝苯地平在年輕成年大鼠前腭縫擴(kuò)大時(shí),對(duì)NF-kB信號(hào)通路與成骨的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-06-03 00:30
【摘要】:上頜骨快速擴(kuò)弓常用于解決牙列擁擠、牙弓狹窄、前牙反合等問題。在快速擴(kuò)弓過(guò)程中,骨縫在擴(kuò)弓力的作用下,牽張成骨過(guò)程激活,新骨開始在腭中縫沉積。但快速擴(kuò)弓過(guò)程中仍有很多問題出現(xiàn),比如擴(kuò)弓后最普遍的并發(fā)癥--復(fù)發(fā)。有學(xué)者發(fā)現(xiàn),由于在快速擴(kuò)弓過(guò)程中,擴(kuò)開的腭中縫無(wú)法在擴(kuò)弓期和保持期內(nèi),形成充足的新骨,是導(dǎo)致復(fù)發(fā)的重要原因之一。因此,在上頜快速擴(kuò)弓過(guò)程中,促進(jìn)骨縫新骨的形成和沉積,是減輕快速擴(kuò)弓復(fù)發(fā)的重要措施。目前有多種方法促進(jìn)骨縫新骨的形成,這些方法包括低能量激光、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子、二磷酸鹽、維生素等。有學(xué)者報(bào)道硝苯地平可抑制NF-kB的表達(dá),而NF-kB能抑制成骨細(xì)胞形成;還有學(xué)者報(bào)道前腭縫與腭中縫牽張成骨機(jī)制類似。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)大鼠腹腔注射硝苯地平劑量為50mg/kg,每天一次,觀察大鼠前腭縫成骨情況。目的:建立大鼠前腭縫快速擴(kuò)弓模型,觀察前腭縫中,是否存在NF-kB信號(hào)通路,以及成骨細(xì)胞的增殖情況與成骨因子OCN、BMP-2的表達(dá)情況;硝苯地平在大鼠前腭縫擴(kuò)大過(guò)程中,對(duì)NF-kB信號(hào)通路的影響,以及對(duì)成骨細(xì)胞的增殖情況與成骨因子OCN、BMP-2的表達(dá)情況。方法:8周齡SPF級(jí)雄性大鼠45只,隨機(jī)分成3組,A組為陰性對(duì)照組(Control group,CM)15只,不擴(kuò)弓,不用藥;B組為實(shí)驗(yàn)組15只,單純擴(kuò)弓;C組大鼠15只,在擴(kuò)弓的同時(shí)還腹腔注射硝苯地平50mg/kg。實(shí)驗(yàn)擴(kuò)弓天數(shù)為1、4、7天,擴(kuò)弓簧采用0.016英寸奧絲彎制帶圈開大曲,力值為2.00±0.20N,水合氯醛局麻下,將擴(kuò)弓簧安裝在上頜門牙之間,光固化樹脂固定。擴(kuò)弓組跟用藥組,均于擴(kuò)弓后的第1、4、7天處死,取上頜標(biāo)本,立刻10%福爾馬林溶液固定,拍Micro-CT,測(cè)量前腭縫寬度。標(biāo)本脫鈣6周,通過(guò)HE、免疫組化、免疫熒光染色,觀察NF-kB與各項(xiàng)成骨因子表達(dá)情況。結(jié)果:1.實(shí)驗(yàn)初期,所有參與實(shí)驗(yàn)大鼠體重均在280±10g范圍內(nèi),A組大鼠,體重隨時(shí)間均勻增加,B、C組大鼠在擴(kuò)弓后的前兩天體重下降較明顯,第三天后,體重開始逐漸增加。2.大鼠RME后,前腭縫寬度和組織的形態(tài)變化:大鼠上頜前縫線在拉伸力作用下逐漸變寬,在1、4、7天,寬度隨擴(kuò)弓時(shí)間遞增;Micro-CT在第4天檢測(cè)到新骨,呈指狀突起,幾乎與牽張力的方向平行。HE染色,可見前腭縫擴(kuò)開后,隨著擴(kuò)弓天數(shù)的增加,膠原纖維形成也在,同時(shí)伴隨明顯的新生血管生成;Masson染色后,可見前腭縫擴(kuò)開后,有明顯的膠原纖維生成,還可見新生軟骨以及軟骨細(xì)胞。3.各成骨指標(biāo)表達(dá)情況:免疫組化染色顯示,與空白對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組的擴(kuò)弓組與擴(kuò)弓+硝苯地平組,OCN、BMP-2的表達(dá)明顯增多。結(jié)論:本研究通過(guò)建立大鼠上頜擴(kuò)弓模型,檢測(cè)IL-1β、P65、OCN的表達(dá)情況,并比較硝苯地平懸濁液對(duì)大鼠上頜前腭縫擴(kuò)弓后骨改建的影響,可以得出以下結(jié)論:1.較大的擴(kuò)弓力值(2.00±0.20N)能有效打開年輕成年SD大鼠上頜前腭縫。2.在擴(kuò)弓過(guò)程中,有IL-1β表達(dá),隨著擴(kuò)弓時(shí)間的增加;有NF-kB信號(hào)通路的激活,隨著擴(kuò)弓時(shí)間的增加,P65表達(dá)增多。3.在擴(kuò)弓過(guò)程中,機(jī)械力能刺激OCN的表達(dá),并隨著時(shí)間增加,OCN表達(dá)增多。4.在擴(kuò)弓過(guò)程中,硝苯地平可以通過(guò)抑制NF-kB的信號(hào)通路的激活,可能有促進(jìn)骨細(xì)胞增殖、OCN表達(dá)增多的作用。
【圖文】:

模型圖,模型


SD大鼠前腭縫擴(kuò)弓模型

三維圖像,上頜骨,橫截面,三維圖像


aMicro-CT上頜骨橫截面前腭縫變化
【學(xué)位授予單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R782

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本文編號(hào):2694005

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