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牙齦卟啉單胞菌蛋白酶基因rgpA與rgpB催化結構域的克隆和表達

發(fā)布時間:2020-05-28 20:45
【摘要】: 目的:克隆牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)rgpA、rgpB催化結構域,構建rgpA、rgpB催化結構域原核表達系統(tǒng)。 方法:采用聚合酶鏈式反應(PCR)從Pg ATCC 33277菌株中擴增rgpA、rgpB催化結構域,T-A克隆后測定核苷酸序列,構建pET42a的rgpA/rgpB催化結構域表達載體,在E.coli BL21DE3宿主菌中用不同濃度的IPTG誘導其表達。 結果:所克隆的Pg ATCC 33277菌株rgpA、rgpB基因催化結構域的核苷酸序列與報道的相應核苷酸序列同源性分別為98.9%、99.0%,氨基酸序列同源性分別高達99.2%、99.1%。pET42a-rgpA/rgp B-BL21DE3系統(tǒng)的蛋白表達量為細菌總蛋白的60%左右。 結論:本研究成功地構建了Pg rgpA、rgpB催化結構域高效表達系統(tǒng),為測定RgpA、RgpB免疫原性及作用提供前提。
【圖文】:

牙齦卟啉單胞菌蛋白酶基因rgpA與rgpB催化結構域的克隆和表達


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【學位授予單位】:浙江大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2009
【分類號】:R780.2

【參考文獻】

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本文編號:2685810

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