富血小板血漿及自體牙周韌帶細胞移植修復(fù)牙周組織缺損的實驗研究
發(fā)布時間:2020-05-24 22:54
【摘要】: 目的研究富血小板血漿(platelet-rich plasma,PRP)對牙周韌帶細胞(periodontal ligament cells, PDLCs)在牙骨質(zhì)表面附著和增殖的作用,探討其是否能促進牙周組織再生;并將不同數(shù)量牙周韌帶細胞植入慢性實驗性牙周缺損內(nèi),觀察細胞植入數(shù)量與牙周組織再生量的關(guān)系。 方法1.采用組織塊法培養(yǎng)人牙周韌帶細胞,取第四代細胞用于實驗。分別制備健康牙和牙周病患牙牙骨質(zhì)塊置于96孔板,附著實驗在接種細胞后加入含10%PRP和不含PRP的培養(yǎng)液,4小時后MTT法檢測附著細胞數(shù)量;增殖實驗在接種細胞后常規(guī)培養(yǎng)24h,加入不含血清的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)48h ,此后更換為含10%PRP和不含PRP的培養(yǎng)液,24h后MTT法檢測細胞數(shù)量;并以掃描電鏡觀察細胞在牙骨質(zhì)表面的情況。2.人工構(gòu)建4只Beagle犬慢性實驗性牙周缺損模型,體外培養(yǎng)犬的自體牙周韌帶細胞,分別調(diào)整細胞濃度至5×105/ml、5×106/ml和5×107/ml,各取20μl接種于膠原膜上,將載有1×104、1×105和1×106PDLCs的膠原膜植入牙周缺損內(nèi),常規(guī)覆蓋BIO-GIDE膜。12周后制作病理切片,進行組織學(xué)觀察,測量新生牙骨質(zhì)長度百分率和新生牙槽骨面積百分率,結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果1.附著實驗中10%PRP組附著細胞數(shù)量較不含PRP組明顯增多;增殖實驗中10%PRP組和不含PRP組細胞數(shù)量無明顯差異。2.各實驗組和對照組均可見不同程度牙周組織再生,1×104PDLCs組和1×105PDLCs組與對照組的新生牙骨質(zhì)長度百分率和新生牙槽骨面積百分率無顯著性差異,1×106PDLCs組的新生牙槽骨面積百分率較對照組顯著增高。 結(jié)論1. 10%PRP可促進人PDLCs在健康牙和牙周病患牙牙骨質(zhì)塊上的附著,但對細胞在牙骨質(zhì)塊上的增殖無明顯影響。2.在實驗性牙周缺損內(nèi)植入PDLCs,可促進牙周組織再生,其有效濃度約為5×107/ml,有效數(shù)量約為1×106PDLCs。
【圖文】:
第 10 頁圖1 原代培養(yǎng)的人PDLCs第5天,可見組織塊周圍有細胞游出(倒置顯微鏡,10×)圖2 第三代人PDLCs,細胞生長旺盛,呈漩渦狀排列(結(jié)晶紫染色,10×)圖3 第四代人PDLCs復(fù)層生長,形成肉眼可見的白色結(jié)節(jié)(倒置顯微鏡 2×)
圖1 原代培養(yǎng)的人PDLCs第5天,可見組織塊周圍有細胞游出(倒置顯微鏡,10×)圖2 第三代人PDLCs,細胞生長旺盛,,呈漩渦狀排列(結(jié)晶紫染色,10×)圖3 第四代人PDLCs復(fù)層生長,形成肉眼可見的白色結(jié)節(jié)(倒置顯微鏡 2×)
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2007
【分類號】:R783
【圖文】:
第 10 頁圖1 原代培養(yǎng)的人PDLCs第5天,可見組織塊周圍有細胞游出(倒置顯微鏡,10×)圖2 第三代人PDLCs,細胞生長旺盛,呈漩渦狀排列(結(jié)晶紫染色,10×)圖3 第四代人PDLCs復(fù)層生長,形成肉眼可見的白色結(jié)節(jié)(倒置顯微鏡 2×)
圖1 原代培養(yǎng)的人PDLCs第5天,可見組織塊周圍有細胞游出(倒置顯微鏡,10×)圖2 第三代人PDLCs,細胞生長旺盛,,呈漩渦狀排列(結(jié)晶紫染色,10×)圖3 第四代人PDLCs復(fù)層生長,形成肉眼可見的白色結(jié)節(jié)(倒置顯微鏡 2×)
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2007
【分類號】:R783
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5 牛竹萍;
本文編號:2679125
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