發(fā)布時(shí)間：2020-04-23 04:51

【摘要】：目的建立變異鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)株、htrA基因缺陷株、clpP基因缺陷株及htrA-clpP雙基因缺陷株的生長(zhǎng)模型,觀察比較幾種菌株在氧化應(yīng)激條件下的生長(zhǎng)情況的差異,研究變異鏈球菌htrA、clpP基因缺失對(duì)其氧化應(yīng)激耐受性的影響。方法利用變異鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)株及前期實(shí)驗(yàn)成功構(gòu)建并保存的htrA單基因缺陷株、clpP單基因缺陷株及(?)htrA-clpP雙基因缺陷株,測(cè)定4種菌株在普通TPY液體培養(yǎng)基中不同時(shí)段的吸光度(A值),并將4種菌株分別培養(yǎng)在含H2O2終濃度為0.0005%的TPY液體培養(yǎng)基中37℃微需氧條件下培養(yǎng),從接種入培養(yǎng)基開始以2h間隔采用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在600nnm下測(cè)定各菌株在各時(shí)間點(diǎn)的吸光度值,分別確定各菌株在不同培養(yǎng)條件下的生長(zhǎng)情況并繪制細(xì)菌生長(zhǎng)曲線比較其生長(zhǎng)情況的差異,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果1.在普通TPY液體培養(yǎng)基中,htrA單基因缺陷株、clpP單基因缺陷株及htrA-clpP雙基因缺陷株生長(zhǎng)周期均發(fā)生改變,對(duì)數(shù)期峰值提前且此階段生長(zhǎng)速度較標(biāo)準(zhǔn)快(P0.05),而標(biāo)準(zhǔn)株的對(duì)數(shù)期峰值及穩(wěn)定期A值均明顯高于缺陷株(P0.05),24h測(cè)得缺陷株A值比標(biāo)準(zhǔn)株A值明顯降低；2.在含H202終濃度為0.0005%的TPY液體培養(yǎng)基中,與標(biāo)準(zhǔn)株相比,htrA單基因缺陷株、clpP單基因缺陷株及htrA-clpP雙基因缺陷株對(duì)H202敏感性增強(qiáng),此時(shí)標(biāo)準(zhǔn)株在各生長(zhǎng)時(shí)期的生長(zhǎng)速度均高于缺陷株的生長(zhǎng)速度(P0.05),標(biāo)準(zhǔn)株和各缺陷株生長(zhǎng)能力較無(wú)H202條件下明顯降低(P0.05); clpP-htrA雙基因缺陷株在氧化應(yīng)激環(huán)境中生長(zhǎng)能力弱于clpP、htrA單基因缺陷株,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論變異鏈球菌htr、clpP基因缺失均可抑制變異鏈球菌的生長(zhǎng),與變異鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)株相比,htrA、clpP基因單獨(dú)缺失或同時(shí)缺失均可對(duì)其氧化應(yīng)激能力有一定影響。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R781.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2637372