【摘要】： [目的]研究噴砂表面、微弧氧化表面、仿生法表面、堿熱表面對(duì)成骨細(xì)胞形態(tài)、增殖及細(xì)胞骨架的影響。 [材料和方法]將直徑為15mm,厚度1mm的純鈦鈦片根據(jù)表面處理方法不同分為12組：機(jī)械打磨組(grooved, G)、噴砂組(sandblasted, SB)、堿熱1-4組(alkali heat, AH)、仿生法1-4組(SBF)、打磨微弧氧化組(grooved microarc oxidation, GMAO)和噴砂微弧氧化組(sandblasted microarc oxidation, SBMAO)。采用掃描電鏡、X射線(xiàn)衍射儀、能譜分析檢測(cè)鈦片表面理化性質(zhì)。采用掃描電鏡(SEM)、激光共聚焦顯微鏡(Laser scanning confocal microscope, LSCM)觀(guān)察研究鈦片表面成骨細(xì)胞生長(zhǎng)情況及細(xì)胞骨架的改變,并采用MTT法、大鼠骨鈣素(BGP)ELISA檢測(cè)法對(duì)各組鈦片表面對(duì)成骨細(xì)胞增殖、功能變化進(jìn)行研究。[結(jié)果]1.鈦片在機(jī)械打磨和噴砂的基礎(chǔ)上經(jīng)堿熱法,仿生法及微弧氧化法處理后,堿熱組出現(xiàn)了納米級(jí)均勻立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),仿生法組表面沉積了羥基磷灰石顆粒,微弧氧化組呈現(xiàn)出火山口狀層疊的孔洞。2.本研究采用改進(jìn)后的貼壁組織塊分步消化法分離培養(yǎng)的成骨細(xì)胞符合成骨細(xì)胞的特征,具有成骨細(xì)胞的多種生物學(xué)特征,并且具有較高的純度。3.各種鈦表面成骨細(xì)胞增值測(cè)定,噴砂微弧氧化組各時(shí)間點(diǎn)OD值均高于其他組。骨鈣素檢測(cè),14d時(shí)微弧氧化兩組均高于其余各組,噴砂微弧氧化組高于打磨微弧氧化組。4.成骨細(xì)胞接種12小時(shí)后,各組肌動(dòng)蛋白纖維清晰可見(jiàn),纖維束平行排列與細(xì)胞長(zhǎng)軸一致；打磨組肌動(dòng)蛋白纖維沿劃痕方向排列；噴砂組肌動(dòng)蛋白纖維沿孔洞邊緣排列,細(xì)胞覆蓋在孔洞上方；仿生法1-4組肌動(dòng)蛋白纖維依據(jù)附著點(diǎn)排列,包繞表面羥基磷灰石顆粒；堿熱1-4組細(xì)胞肌動(dòng)蛋白纖維沿表面排列,細(xì)胞邊緣處有微絲伸入孔洞中；MAO組細(xì)胞肌動(dòng)蛋白纖維平行排列,圈形排列的肌動(dòng)蛋白纖維減少,肌動(dòng)蛋白纖維在細(xì)胞邊緣出匯聚成束,伸向孔洞內(nèi)。 [結(jié)論]1.改進(jìn)后的貼壁組織塊分步消化法可用有限的SD大鼠獲得更多的、來(lái)源穩(wěn)定的具有典型成骨細(xì)胞生物學(xué)特性的成骨細(xì)胞。2.不同目數(shù)噴砂顆粒造成的粗糙表面對(duì)堿熱法、仿生法、微弧氧化法制備表面有一定的影響。3.微弧氧化表面形貌對(duì)成骨細(xì)胞增殖、功能的促進(jìn)作用強(qiáng)于其余各組。4.激光共聚焦顯微鏡觀(guān)察發(fā)現(xiàn),成骨細(xì)胞肌動(dòng)蛋白纖維的鋪展與鈦片表面形貌有關(guān)。
【圖文】：

打磨組

噴砂組
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類(lèi)號(hào)】：R783.1

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本文編號(hào)：2603034